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酵母双杂交筛选结核分枝杆菌异柠檬酸裂合酶的相互作用蛋白

第一章 综述第1-19页
 1.酵母双杂交技术及其发展第9-12页
 2.异柠檬酸裂合酶在结核分枝杆菌持留中的作用第12-13页
 3.补体C3在感染免疫中的作用研究进展第13-17页
 4.Zyxin的研究进展第17-19页
第二章 前言第19-20页
第三章 材料与方法第20-27页
 1.材料第20-23页
   ·菌株第20-21页
   ·质粒及异柠檬酸裂合酶的克隆第21页
   ·引物第21页
   ·主要试剂和试剂盒第21页
   ·培养基及常用溶液第21-23页
 2.方法第23-27页
   ·质粒的重新构建第23-24页
   ·酵母细胞的小规模转化及LacZ自激检测第24-25页
   ·酵母细胞大规模转化第25页
   ·阳性克隆的挑取和LacZ检测第25页
   ·酵母质粒抽提第25页
   ·共转验证及LaeZ检测第25-26页
   ·用pDBLeu—C3做诱饵进行酵母双杂交第26页
   ·体外结合验证实验第26-27页
     ·大肠杆菌IPTG诱导表达融合蛋白第26页
     ·纯化GST融合蛋白第26页
     ·纯化PET融合蛋白第26-27页
     ·GST pull-down第27页
     ·Western blotting第27页
第四章 实验结果第27-31页
 1.质粒NpDBLeu-icl的构建第27-28页
 2.自激活检测和酵母双杂交筛选第28页
 3.所得阳性克隆的测序鉴定及重新构建第28-29页
 4.NpDBLeu-C3为诱饵蛋白所得阳性克隆的测序鉴定第29页
 5.GST和PET融合蛋白的表达第29-31页
 6.GST pull-down及Western blotting第31页
第五章 讨论第31-33页
参考文献第33-38页
致谢第38页

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