第一章 综述 | 第1-19页 |
1.酵母双杂交技术及其发展 | 第9-12页 |
2.异柠檬酸裂合酶在结核分枝杆菌持留中的作用 | 第12-13页 |
3.补体C3在感染免疫中的作用研究进展 | 第13-17页 |
4.Zyxin的研究进展 | 第17-19页 |
第二章 前言 | 第19-20页 |
第三章 材料与方法 | 第20-27页 |
1.材料 | 第20-23页 |
·菌株 | 第20-21页 |
·质粒及异柠檬酸裂合酶的克隆 | 第21页 |
·引物 | 第21页 |
·主要试剂和试剂盒 | 第21页 |
·培养基及常用溶液 | 第21-23页 |
2.方法 | 第23-27页 |
·质粒的重新构建 | 第23-24页 |
·酵母细胞的小规模转化及LacZ自激检测 | 第24-25页 |
·酵母细胞大规模转化 | 第25页 |
·阳性克隆的挑取和LacZ检测 | 第25页 |
·酵母质粒抽提 | 第25页 |
·共转验证及LaeZ检测 | 第25-26页 |
·用pDBLeu—C3做诱饵进行酵母双杂交 | 第26页 |
·体外结合验证实验 | 第26-27页 |
·大肠杆菌IPTG诱导表达融合蛋白 | 第26页 |
·纯化GST融合蛋白 | 第26页 |
·纯化PET融合蛋白 | 第26-27页 |
·GST pull-down | 第27页 |
·Western blotting | 第27页 |
第四章 实验结果 | 第27-31页 |
1.质粒NpDBLeu-icl的构建 | 第27-28页 |
2.自激活检测和酵母双杂交筛选 | 第28页 |
3.所得阳性克隆的测序鉴定及重新构建 | 第28-29页 |
4.NpDBLeu-C3为诱饵蛋白所得阳性克隆的测序鉴定 | 第29页 |
5.GST和PET融合蛋白的表达 | 第29-31页 |
6.GST pull-down及Western blotting | 第31页 |
第五章 讨论 | 第31-33页 |
参考文献 | 第33-38页 |
致谢 | 第38页 |