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柚皮苷对骨质疏松模型大鼠MSCs增殖、骨向分化及凋亡影响的实验研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
主要英文缩略语第11-12页
1 绪论第12-29页
   ·MSCs生物学特第12-14页
   ·MSCs与骨质疏松第14-18页
   ·MSCs骨向分化的影响因素第18-24页
     ·常规化学药物第18-20页
     ·外源性生长因子第20-22页
     ·激素第22-23页
     ·基因转染第23页
     ·物理因素第23-24页
   ·中约对MSCs骨向分化的影响第24-25页
     ·中药复方及含药血清对MSCs骨向分化的影响第24页
     ·中药有效成分对MSCs骨向分化的影响第24-25页
   ·骨碎补对骨质疏松的治疗作用第25-26页
   ·NG的生物效应第26-27页
   ·课题设计思路及实验目的第27-29页
2 实验一 去卵巢OP大鼠MSCs生物学特性研究第29-47页
   ·研究目的第29页
   ·实验材料第29-31页
     ·实验动物第29页
     ·主要试剂第29-30页
     ·主要仪器设备第30-31页
   ·实验方法第31-37页
     ·主要试剂的配制第31-33页
     ·去卵巢OP模型的建立第33页
     ·OP大鼠MSCs的分离、培养第33-34页
     ·OP大鼠MSCs的体外鉴定第34-35页
   ①. MSCs表面的标志的鉴定第34-35页
   ②. 从MSCs多向分化的潜能来鉴定第35页
     ·OP大鼠MSCs生物学特性的研究第35-37页
       ·OP大鼠MSCS生长曲线的测定第35页
       ·OP大鼠MSCs贴壁率的检测第35-36页
       ·OP大鼠MSCs的超微结构的观察第36页
       ·OP大鼠与对照大鼠MSCs无诱导条件下骨向分化及脂向分化的观察第36-37页
   ·结果第37-47页
     ·不同方法分离所得OP大鼠MSCs的情况第37-38页
     ·流式细胞仪对大鼠MSCs表面抗原的鉴定第38页
     ·OP大鼠MSCs生物学特性的研究第38-47页
       ·对培养的OP大鼠及其同龄对照大鼠MSCs扫描电镜分析结果第38-40页
       ·对培养的OP大鼠及其同龄对照大鼠MSCs生长曲线的检测第40页
       ·对培养的OP大鼠及其同龄对照大鼠MSCs的贴壁率的检测第40-41页
       ·对培养的OP大鼠MSCs骨向分化及脂向分化的观察第41-47页
3 实验二 NG对OP大鼠MSCs增殖及骨向分化的研究第47-63页
   ·研究目的第47页
   ·实验材料第47-48页
     ·主要试剂第47-48页
     ·实验仪器第48页
     ·实验药物第48页
   ·实验方法第48-53页
     ·主要试剂的配制第48-49页
     ·NG对OP大鼠MSCs增殖的研究第49-50页
       ·MTT法测定不同浓度的NG对OP大鼠MSCs增殖影响第49页
       ·流式细胞仪(FCM)检测细胞周期第49-50页
     ·NG诱导OP大鼠MSCs骨向分化的研究第50-53页
       ·最佳诱导剂量的确定第50页
       ·ALP染色及其活性检测第50-51页
       ·Ⅰ型胶原的形成第51-52页
       ·放射免疫法(RIA)测定BGP的含量第52页
       ·矿化结节茜素红染色第52-53页
   ·实验结果第53-59页
     ·不同浓度NG对OP大鼠MSCs增殖的影响第53页
     ·NG对OP大鼠MSCs细胞周期的影响第53-54页
     ·不同浓度NG对OP大鼠MSCs的ALP阳性表达率的影响第54-55页
     ·NG对OP大鼠MSCs的ALP活性的影响第55页
     ·成骨诱导培养对OP大鼠MSCs形态影响第55-56页
     ·NG对OP大鼠MSCs体外BGP表达的影响第56-57页
     ·NG对OP大鼠MSCs体外COLI表达的影响第57-58页
     ·NG对OP大鼠MSCs体外矿化的影响第58-59页
   ·讨论第59-62页
   ·小结第62-63页
4 实验三 NG抗OP大鼠MSCs氧化凋亡的实验研究第63-74页
   ·研究目的第63页
   ·实验材料第63-64页
     ·主要试剂第63页
     ·主要仪器设备第63-64页
     ·实验药物第64页
   ·实验方法第64-67页
     ·主要试剂的配制第64-65页
     ·细胞毒性实验确定H_2O_2诱导凋亡剂量第65页
     ·形态上观察NG抗对诱导的氧化凋亡作用第65页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡率第65-66页
     ·单细胞凝胶电泳检测NG的抗氧化凋亡作用第66-67页
   ·实验结果第67-71页
     ·细胞毒性实验确定H_2O_2诱导剂量和时间第67-68页
     ·对H_2O_诱导的MSCs氧化凋亡的形态学观察第68-69页
     ·单细胞凝胶电泳对细胞凋亡的检测第69-70页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡第70-71页
   ·讨论第71-73页
   ·实验小结第73-74页
结语第74-75页
参考文献第75-90页
致谢第90页

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