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苹果砧木耐盐突变体的筛选及其鉴定

引言第1-25页
 1 盐分对植物的生理生化影响第14-17页
   ·盐分对植物细胞膜系统的影响第14-15页
   ·盐分对内源激素和多胺含量的影响第15-17页
 2 植物耐盐育种研究进展第17-19页
   ·诱变技术在耐盐育种上的应用第17-18页
   ·分子标记在耐盐育种上的应用第18-19页
 3 植物耐盐相关基因克隆第19-24页
   ·耐盐相关基因研究第19-20页
   ·植物耐盐相关基因克隆第20-24页
     ·渗透调节有关的基因第22页
     ·与离子区域化相关的基因第22-23页
     ·保护酶基因第23页
     ·与转录因子有关的基因第23-24页
 4 本研究目的意义第24-25页
材料与方法第25-36页
 1 试验材料第25页
 2 试验内容与方法第25-36页
   ·材料辐射诱变处理第25页
   ·78-48高效叶片再生体系的建立第25-26页
     ·激素种类对叶片再生的影响第25页
     ·暗培养时间对叶片再生的影响第25页
     ·辐射诱变对叶片再生的影响第25-26页
   ·耐盐突变体的筛选第26页
   ·耐盐突变体生理指标检测第26-29页
     ·游离脯氨酸含量测定第26-27页
     ·质膜透性测定第27页
     ·Na~+、K~+离子含量测定第27页
     ·Cl~-含量测定第27页
     ·SOD、POD酶活性测定第27-28页
     ·丙二醛(MDA)和超氧阴离子(O_2~-)含量测定第28页
     ·可溶性蛋白质含量测定第28页
     ·内源多胺含量的测定第28页
     ·植物内源激素含量测定第28-29页
   ·耐盐突变体RAPD分析:第29-30页
     ·DNA的检测第29页
       ·DNA提取及检测第29页
       ·紫外吸收法第29页
     ·RAPD反应体系的建立第29-30页
     ·RAPD扩增产物检测第30页
     ·引物筛选第30页
   ·耐盐植株特异性带回收克隆及序列分析第30-33页
     ·从琼脂糖凝胶中回收DNA片断第31页
     ·目的DNA片断的克隆第31-32页
     ·目的DNA的测序第32页
     ·耐盐基因序列分析第32-33页
   ·苹果砧木耐盐突变体AFLP分析第33-36页
     ·酶切体系第33页
     ·接头连接第33页
     ·预扩增体系第33-34页
     ·选择性扩增体系第34页
     ·扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第34页
     ·电泳结果统计第34-36页
结果与分析第36-74页
 1 辐射诱变对苹果砧木形态和生长的影响第36-38页
   ·辐射诱变对苹果砧木叶片形态的影响第36-37页
   ·辐射诱变对苹果砧木生长的影响第37-38页
 2 苹果砧木耐盐突变体的获得第38-44页
   ·78-48高效叶片再生体系的建立第38-40页
     ·不同激素种类对苹果叶片再生的影响第38-40页
     ·暗培养时间对苹果叶片再生的影响第40页
   ·辐射诱变对苹果砧木叶片再生的影响第40-41页
   ·诱变材料的NaCl筛选第41-44页
     ·NaCl胁迫下砧木及其耐盐突变植株的生长情况第42-43页
     ·NaCl胁迫下砧木及其耐盐突变株系的受害率和受害指数第43-44页
 3 耐盐突变体生理指标检测第44-58页
   ·Na~+、K~+离子含量第44-45页
     ·Na~+含量变化第44页
     ·K~+含量变化第44-45页
     ·Na~+/K~+比值的变化第45页
   ·游离脯氨酸含量第45-46页
   ·质膜透性第46-47页
   ·Cl~-离子含量第47-48页
   ·SOD、POD活性第48-49页
     ·SOD活性变化第48页
     ·POD活性变化第48-49页
   ·MDA和O_2~-含量变化第49-50页
     ·MDA含量变化第49-50页
     ·O_2~-含量变化第50页
   ·可溶性蛋白质含量变化第50-52页
   ·多胺含量变化第52-54页
     ·精胺含量变化第52-53页
     ·亚精胺含量变化第53页
     ·腐胺含量变化第53-54页
     ·多胺总量和(Spm+Spd)/Put比值变化第54页
   ·植物内源激素含量变化第54-57页
     ·ABA含量变化第54-55页
     ·IAA含量变化第55-56页
     ·ZR含量变化第56页
     ·GA_3含量变化第56-57页
     ·ZR/ABA比值的变化第57页
   ·质膜透性与生理生化指标的相关分析第57-58页
 4 苹果砧木耐盐突变体分子鉴定第58-74页
   ·基因组DNA提取和检测第58-59页
   ·苹果砧木耐盐突变体的RAPD分析第59-62页
     ·引物多态性分析第59-61页
     ·78-48及其突变体的多态性与遗传背景分析第61-62页
   ·多态性带克隆、转化和测序结果分析第62-72页
     ·PCR产物回收及载体连接检测第62-63页
     ·测序结果分析第63-72页
   ·苹果砧木耐盐突变体AFLP分析第72-74页
     ·供试材料的多态性带第72-73页
     ·遗传多样性分析第73-74页
讨论第74-79页
 1 关于苹果砧木耐盐突变体筛选的问题第74页
 2 突变体耐盐性与生理生化指标的关系第74-76页
   ·突变体耐盐性的形态学分析第74-75页
   ·突变体耐盐性的生理水平鉴定第75-76页
 3 苹果砧木突变体耐盐性的分子鉴定第76-79页
   ·突变体的RAPD分析第76-78页
   ·突变体的AFLP分析第78-79页
结论第79-80页
参考文献第80-88页
附图第88-111页
在校期间发表文章第111-112页
作者简历第112-113页
致谢第113-114页
附录第114-119页

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