| 前言 | 第1-35页 |
| 一、HIV病毒简介 | 第11-14页 |
| 1. HIV的基因组结构、主要蛋白及其功能 | 第11-13页 |
| 2. HIV的复制周期 | 第13页 |
| 3. HIV的分型 | 第13-14页 |
| 二、HIV疫苗的研究背景 | 第14页 |
| 三、HIV感染的体液免疫应答 | 第14-15页 |
| 四、HIV感染的细胞免疫应答 | 第15-16页 |
| 五、HIV疫苗研究进展 | 第16-20页 |
| 1. 传统疫苗 | 第16-17页 |
| 2. 新型疫苗 | 第17-20页 |
| 六、艾滋病疫苗的构建策略 | 第20-21页 |
| 七、新型疫苗免疫策略 | 第21-22页 |
| 八、病毒载体疫苗的热稳定性 | 第22-24页 |
| 1. MVA病毒载体稳定性的研究现状 | 第23页 |
| 2. 腺病毒载体稳定性的研究现状 | 第23-24页 |
| 九、药品冷冻干燥 | 第24-35页 |
| 1. 真空冷冻干燥的突出优点及意义 | 第24-25页 |
| 2. 在生物制品方面的应用 | 第25页 |
| 3. 真空冷冻干燥的原理 | 第25-26页 |
| 4. 冻干机的组成 | 第26页 |
| 5. 药品冻干损伤和保护机理 | 第26-28页 |
| 6. 冷冻干燥的程序及技术 | 第28-35页 |
| 第一部分 HIV重组MVA病毒载体疫苗株的构建 | 第35-46页 |
| 一、材料 | 第35-36页 |
| 二、方法 | 第36-43页 |
| 1. 抗原基因的选择 | 第36页 |
| 2. 重组穿梭质粒pSC11-GPE的构建 | 第36-37页 |
| 3. 重组痘苗病毒M-GPE的构建 | 第37-40页 |
| 4. 重组痘苗病毒M-GPE的鉴定 | 第40-41页 |
| 5. 重组痘苗病毒M-GPE体外表达鉴定 | 第41-43页 |
| 三、结果与讨论 | 第43-46页 |
| 1. 重组痘病毒M-GPE的克隆筛选 | 第43页 |
| 2. 重组痘病毒M-GPE插入序列的鉴定 | 第43-44页 |
| 3. 重组痘病毒M-GPE抗原性研究 | 第44-46页 |
| 第二部分 HIV重组腺病毒载体疫苗株的构建 | 第46-54页 |
| 一、材料 | 第46-47页 |
| 二、方法 | 第47-50页 |
| 1. 重组腺病毒质粒Ad-gagpol的构建 | 第47-50页 |
| 2. 重组腺病毒 Ad-gagpol 的鉴定 | 第50页 |
| 三、结果与讨论 | 第50-54页 |
| 1. 穿梭质粒pShutle-gagpol的酶切鉴定 | 第50-51页 |
| 2. 重组腺病毒载体质粒Ad-gagpol的酶切鉴定 | 第51页 |
| 3. Pac Ⅰ酶切重组腺病毒载体质粒Ad-gagpol | 第51-52页 |
| 4. 线性化重组腺病毒载体Ad-gagpol质粒转染HEK293 细胞 | 第52-53页 |
| 5. Western blot检测外源基因的表达 | 第53-54页 |
| 第三部分 HIV重组MVA载体疫苗冻干制剂及其制备工艺的研究 | 第54-72页 |
| 一、材料 | 第54页 |
| 二、方法 | 第54-60页 |
| 1. 液体M-GPE病毒疫苗的扩增、纯化 | 第54-55页 |
| 2. 实验分组 | 第55页 |
| 3. 冻干重组M-GPE疫苗的制备 | 第55页 |
| 4. 残余水分含量测定 | 第55-56页 |
| 5. 感染性滴度测定 | 第56-57页 |
| 6. 热稳定性的监测 | 第57-58页 |
| 7. 冻干M-GPE疫苗的抗原性研究 | 第58页 |
| 8. 免疫小鼠 | 第58页 |
| 9. 间接ELISA检测小鼠抗-P24 抗体 | 第58页 |
| 10. Western blot检测血清抗体 | 第58页 |
| 11. CTL检测 | 第58-60页 |
| 三、结果和讨论 | 第60-72页 |
| 1. 共晶点的测定 | 第60-61页 |
| 2. 物理性状检查 | 第61页 |
| 3. 冻干保护剂组合的热稳定性 | 第61-66页 |
| 4. 残余水分含量 | 第66-67页 |
| 5. 复溶后的冻干苗的热稳定性 | 第67页 |
| 6. 冻干M-GPE的抗原性 | 第67-68页 |
| 7. 冻干M-GPE疫苗的安全性 | 第68页 |
| 8. 体液免疫 | 第68-69页 |
| 9. CTL检测 | 第69-72页 |
| 第四部分 HIV重组腺病毒载体疫苗冻干制剂及其制备工艺的研究 | 第72-86页 |
| 一、材料 | 第72页 |
| 二、方法 | 第72-76页 |
| 1. 腺病毒载体疫苗Ad-gagpol的扩增 | 第72页 |
| 2. 腺病毒载体疫苗Ad-gagpol的纯化 | 第72-73页 |
| 3. 试验分组 | 第73页 |
| 4. 冻干重组腺病毒疫苗Ad-gagpol的制备 | 第73页 |
| 5. 残余水分含量测定 | 第73页 |
| 6. 滴度测定 | 第73-74页 |
| 7. 热稳定性试验 | 第74页 |
| 8. 复溶后的冻干苗的热稳定性 | 第74页 |
| 9. 冻干重组腺病毒疫苗的抗原性研究 | 第74页 |
| 10. 免疫小鼠 | 第74-75页 |
| 11. Western blot检测血清抗体 | 第75页 |
| 12. 鼠IFN-γELISPOT检测 | 第75-76页 |
| 三、结果和讨论 | 第76-86页 |
| 1. 共晶点的测定 | 第76页 |
| 2. 物理性状检查 | 第76-77页 |
| 3. 热稳定性的监测 | 第77-82页 |
| 4. 残余水分含量 | 第82页 |
| 5. 复溶后的冻干苗的热稳定性 | 第82-83页 |
| 6. 冻干重组Ad-Gagpol疫苗的抗原性 | 第83页 |
| 7. 体液免疫 | 第83-84页 |
| 8. 鼠IFN-γ ELISPOT | 第84-86页 |
| 第五部分 HIV重组病毒载体疫苗冻干制剂联合免疫的策略 | 第86-95页 |
| 一、材料 | 第86页 |
| 二、方法 | 第86-87页 |
| 1. 免疫小鼠 | 第86-87页 |
| 2. Western blot检测血清抗体 | 第87页 |
| 3. 鼠IFN-γ Elispot检测细胞免疫 | 第87页 |
| 三、结果和讨论 | 第87-95页 |
| 1. 体液免疫 | 第87-88页 |
| 2. 细胞免疫 | 第88-95页 |
| 小结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 中文摘要 | 第105-110页 |
| ABSTRACT | 第110-115页 |
| 作者简历 | 第115页 |
