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盾叶薯蓣遗传多样性及多倍体新种质培育的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-17页
第一章 前言第17-39页
 1 文献综述第17-35页
   ·盾叶薯蓣研究进展第17-27页
     ·盾叶薯蓣的主要用途第17-18页
     ·甾体激素药物及其药源植物的研发第18-21页
       ·甾体化合物结构和种类第18页
       ·甾体激素药物的用途第18-19页
       ·薯蓣皂苷元高含植物的探寻第19-20页
       ·薯蓣皂苷元生产与甾体激素的合成第20-21页
     ·分类学研究第21-22页
     ·细胞染色体研究第22-23页
     ·组织与细胞培养及同源四倍体诱导研究第23-24页
     ·盾叶薯蓣的生态分布及植物资源学研究第24-25页
     ·引种驯化栽培与繁殖研究第25-26页
     ·盾叶薯蓣生物多样性及种质研究第26页
     ·盾叶薯蓣其他方面的研究第26-27页
   ·遗传多样性研究进展第27-32页
     ·遗传多样性概念及其研究意义第27-28页
     ·遗传多样性产生的基础研究第28页
     ·种群遗传多样性的评价指标研究第28-29页
     ·分子生物学技术在遗传多样性研究中的应用第29-30页
     ·RAPD技术及其在遗传多样性研究中的应用第30-32页
       ·RAPD技术的基本原理及技术特点第30页
       ·RAPD在种质资源遗传亲缘关系研究中的应用第30-31页
       ·基于RAPD的植物遗传多样性研究第31-32页
   ·倍性诱变及多倍体育种研究进展第32-35页
     ·倍性诱变及多倍体育种原理与方法第32-33页
     ·药用植物多倍体育种研究第33-34页
     ·花药培养与单倍体育种研究第34-35页
 2 立题的依据和意义第35-36页
 3 研究的主要内容与目的第36-39页
   ·主要内容第36-38页
   ·主要目的第38-39页
第二章 盾叶薯蓣的资源调查及形态多样性研究第39-57页
 1 方法第39-42页
   ·盾叶薯蓣的分布及群落多样性调查方法第39页
   ·盾叶薯蓣器官形态多样性研究方法第39-41页
   ·盾叶薯蓣染色体多样性研究方法第41-42页
     ·材料处理第41页
     ·试剂配制第41页
     ·染色体标本制作与观察第41-42页
 2 结果与分析第42-54页
   ·盾叶薯蓣的分布及种群扩散第42-43页
   ·盾叶薯蓣生境的多样性第43-46页
     ·植被多样性第43-44页
     ·群落多样性第44-46页
       ·群落类型第44-45页
       ·盾叶薯蓣在群落中的分布第45-46页
   ·根与茎的形态多样性第46-48页
     ·地上茎的形态多样性第46-47页
     ·地下茎及根的形态多样性第47-48页
   ·叶的形态多样性第48-50页
   ·花、花序及花性的形态多样性第50-52页
   ·果实、种子与胚的多样性第52-53页
   ·染色体的多样性第53-54页
     ·染色体数目第53-54页
     ·染色体形态第54页
 3 讨论第54-57页
   ·盾叶薯蓣分布与种群扩散及薯蓣皂苷元含量的关系第54-55页
   ·盾叶薯蓣的形态多样性与薯蓣皂苷元含量的关系第55-56页
   ·种群染色体数目与进化、薯蓣皂苷元含量的关系第56-57页
第三章 盾叶薯蓣遗传多样性研究第57-94页
 1 材料与方法第57-63页
   ·材料第57-59页
     ·材料及其来源第57-59页
     ·材料处理第59页
   ·方法第59-63页
     ·试剂与仪器第59-60页
       ·主要生化试剂第59-60页
       ·主要仪器设备第60页
     ·实验方法或操作程序第60-63页
       ·供试材料基因组DNA的提取与纯化第60-61页
       ·DNA的检测第61页
       ·RAPD扩增反应及条件优化第61-62页
       ·遗传多样性RAPD分析第62-63页
       ·系统分类学研究方法第63页
 2 结果及分析第63-84页
   ·基因组总DNA的质量与产量检测结果第63-65页
   ·RAPD反应条件比较第65-69页
     ·模板浓度对RAPD反应的影响第65页
     ·引物浓度对RAPD反应的影响第65页
     ·Mg2+的浓度对RAPD反应的影响第65-66页
     ·dNTP浓度对RAPD反应的影响第66页
     ·Taq DNA聚合酶对RAPD反应的影响第66页
     ·扩增循环数对RAPD反应的影响第66页
     ·退火温度对RAPD反应的影响第66-69页
   ·遗传多样性RAPD分析第69-80页
     ·随机引物筛选结果第69页
     ·PCR扩增结果第69-74页
     ·RAPD扩增产物的多态性第74页
     ·盾叶薯蓣遗传多样性分析第74-78页
       ·盾叶薯蓣与同属其它种的遗传多样性比较第74-75页
       ·盾叶薯蓣不同种群的遗传多样性比较第75-76页
       ·盾叶薯蓣几个种群内的遗传多样性比较第76-78页
     ·盾叶薯蓣的遗传分化比较第78-80页
       ·种群间与种群内的基因分化第78-79页
       ·盾叶薯蓣的基因分化与多样性总体比较第79-80页
   ·分子系统分类学探讨第80-84页
     ·遗传距离第80-82页
       ·种间遗传距离第80页
       ·盾叶薯蓣种群间的遗传距离第80-82页
     ·聚类分析第82-83页
       ·盾叶薯蓣种群聚类分析第82-83页
       ·盾叶薯蓣与同属植物的种间聚类分析第83页
     ·RAPD分子系统分类学结果第83-84页
       ·盾叶薯蓣种内系统分类学处理第83-84页
       ·薯蓣属6个种的分组系统分类学处理第84页
 3 小结与讨论第84-94页
   ·RAPD—PCR反应第84-86页
     ·不同提取方法及实验条件对盾叶薯蓣DNA提取的影响第84-86页
     ·RAPD反应体系第86页
       ·各反应参数对RAPD反应的影响第86页
       ·RAPD稳定程度的可控性第86页
   ·RAPD遗传多样性分析第86-90页
     ·随机引物及供试材料对RAPD-PCR扩增结果的影响第86-87页
     ·分类等级与遗传多样性的关系第87页
     ·种群遗传多样性的差异及其影响因素第87页
     ·种群及世代的遗传多样性差异及其影响因素第87-88页
     ·种群间基因分化的原因及其与遗传多样性的关系第88-89页
     ·多倍体NDA分子及基因表达差异的原因第89页
     ·遗传分化与遗传多样性保护第89-90页
   ·分子系统分类学方法的选择及其可靠性第90-92页
   ·聚类分析及分子系统分类学结果的解析第92-94页
     ·种上分类等级及其进化路线处理的适用性分析第92-93页
     ·种下分类群划分的解析第93-94页
第四章 薯蓣皂甙元含量的HPLC测定及其比较研究第94-101页
 1 材料与仪器第94-95页
   ·材料第94-95页
   ·仪器与试剂第95页
 2 方法与结果第95-99页
   ·含水量测定第95-96页
   ·薯蓣皂苷元含量测定第96-99页
     ·色谱条件第96页
     ·标准品溶液配制第96页
     ·样品溶液的制备第96页
     ·线性关系的考察第96-97页
     ·样品的测定第97-99页
     ·回收率实验第99页
 3 结论与分析讨论第99-101页
   ·薯蓣皂苷元含量的测定方法第99页
   ·薯蓣皂苷元含量的比较第99-101页
第五章 盾叶薯蓣的倍性诱变研究第101-123页
 1 材料与方法第101-106页
   ·材料第101页
   ·方法第101-106页
     ·盾叶薯蓣二倍体离体再生体系的建立方法第102-104页
       ·材料处理第102页
       ·培养基的制备第102页
       ·盾叶薯蓣二倍体愈伤组织的诱导第102-103页
         ·外植体的接种及培养条件第102页
         ·不同基本培养基对愈伤组织诱导的影响第102-103页
         ·不同外植体的愈伤组织诱导效果比较第103页
         ·不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导的影响第103页
       ·不同植物生长调节剂浓度组合对愈伤组织分化的影响第103页
       ·不同因素与水平组合对类原球茎生根的影响第103-104页
       ·二倍体试管苗的炼苗与移栽第104页
     ·盾叶薯蓣四倍体的诱导及其鉴定第104-105页
       ·离体诱变培养体系的建立第104页
       ·利用秋水仙素诱导四倍体植株第104-105页
       ·四倍体植株的鉴定第105页
     ·盾叶薯蓣花药培养及其鉴定第105-106页
       ·外植体的接种及培养条件第105页
       ·花药愈伤组织的诱导和增殖第105页
       ·花药愈伤组织的分化第105-106页
 2 结果与分析第106-120页
   ·盾叶薯蓣二倍体离体再生体系的建立第106-113页
     ·不同基本培养基对愈伤组织诱导的影响第106页
     ·不同基因型外植体对愈伤组织诱导的影响第106-107页
     ·不同部位外植体对愈伤组织诱导的影响第107-108页
     ·不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导的影响第108-109页
     ·不同植物生长调节剂浓度组合对愈伤组织分化的影响第109-112页
     ·不同因素组合对试管苗生根的影响第112-113页
     ·二倍体试管苗的炼苗与移栽第113页
   ·盾叶薯蓣四倍体的诱导及其鉴定第113-117页
     ·不同处理方式对盾叶薯蓣四倍体诱变率的影响第113-117页
       ·浸泡法对四倍体诱变率的影响第113-115页
       ·混培法对四倍体诱变率的影响第115-116页
       ·点滴法对四倍体诱变率的影响第116-117页
     ·四倍体植株的形态学鉴定第117页
   ·盾叶薯蓣花药培养单倍体愈伤组织的诱导及其分化第117-120页
     ·基本培养基对愈伤组织诱导的影响第117页
     ·不同浓度的蔗糖对愈伤组织诱导的影响第117页
     ·光培养和暗培养对愈伤组织诱导的影响第117-118页
     ·固体和液体培养基对愈伤组织诱导的影响第118页
     ·不同植物生长调节剂浓度组合对愈伤组织诱导的影响第118-119页
     ·愈伤组织的分化第119-120页
   ·盾叶薯蓣不同倍性植株染色体的鉴定第120页
     ·染色体数目检测第120页
     ·倍性诱导稳定性实验第120页
 3 讨论第120-123页
   ·盾叶薯蓣组织培养和植株再生体系的建立第120-121页
     ·不同基本培养基对盾叶薯蓣组织培养的影响第120-121页
     ·不同外植体对盾叶薯蓣组织培养的影响第121页
     ·不同植物生长调节剂种类与浓度对盾叶薯蓣组织培养的影响第121页
   ·盾叶薯蓣多倍体的诱导第121-122页
     ·不同秋水仙素处理方法对染色体多倍性的影响第121页
     ·嵌合体现象第121-122页
   ·影响单倍体的诱导的因素第122-123页
第六章 盾叶薯蓣四倍体新种质"XHJ-401"快速繁殖体系的建立第123-139页
 1 材料与方法第123-125页
   ·材料第123页
   ·方法第123-125页
     ·外植体的接种及培养条件第123页
     ·愈伤组织的诱导和增殖第123-124页
     ·类原球茎的分化与增殖第124页
     ·类原球茎及其植株的个体生长第124页
     ·带类原球茎植株的生根第124-125页
     ·带类原球茎试管苗的炼苗与壮苗第125页
 2 结果与分析第125-134页
   ·不同外植体在不同植物生长调节剂配比培养基上培养效果比较第125-126页
   ·不同植物生长调节剂浓度组合对致密愈伤组织形成的影响第126-127页
   ·不同植物生长调节剂浓度组合对类原球茎诱导的影响第127-129页
   ·类原球茎在分化增殖培养基上的生长第129-130页
   ·不同因素组合对类原球茎生根的影响第130-131页
   ·带类原球茎试管苗的炼苗与壮苗第131-133页
     ·类原球茎的生长发育第131页
     ·人工气候箱炼苗实验第131-132页
     ·温室炼苗与壮苗实验第132-133页
   ·盾叶薯蓣四倍体离体培养快速繁殖技术体系第133-134页
 3 讨论第134-139页
   ·不同外植体与愈伤组织诱导及类原球茎分化的关系第134-135页
   ·6-BA和2,4-D在愈伤组织诱导和增殖中的作用第135页
   ·6-BA、KT和蔗糖对类原球茎诱导的影响第135-136页
   ·类原球茎生根培养中各因素的影响第136页
   ·温度、湿度与栽培基质对试管苗炼苗与壮苗的影响第136-137页
   ·四倍体盾叶薯蓣离体培养快速繁殖技术体系的可行性第137-139页
第七章 盾叶薯蓣四倍体新种质"XHJ-401"生物学特性研究第139-160页
 1 材料与方法第139-142页
   ·材料第139页
   ·方法第139-142页
     ·物候及其生长发育特性比较观察方法第139-140页
     ·器官形态学及生长性能比较方法第140页
     ·叶表皮及保卫细胞叶绿体显微与超微结构比较方法第140-141页
       ·仪器及药剂第140页
       ·方法与步骤第140-141页
     ·栽培与杂交方法第141-142页
       ·栽培及根茎产量与薯蓣皂苷元含量测定方法第141-142页
       ·杂交试验方法第142页
 2.结果第142-155页
   ·四倍体与二倍体物候学比较观察第142-144页
   ·四倍体与二倍体器官形态学及生长性能比较第144-150页
     ·根的形态学及生长性能比较第144-145页
     ·地上茎的形态学及生长特性比较第145-146页
     ·根状茎的形态学及生长性能比较第146-147页
     ·叶的形态学比较第147-148页
     ·花的形态学及变性率比较第148-149页
     ·果实与种子的形态学比较第149-150页
   ·四倍体与二倍体组织与细胞形态结构比较第150-154页
     ·叶表皮及气孔器的显微形态结构比较第150-152页
       ·表皮细胞及气孔器的密度第150-151页
       ·气孔器大小第151-152页
     ·叶下表皮及气孔器的显微形态结构观察第152页
     ·保卫细胞叶绿体的超微形态结构比较第152-154页
   ·盾叶薯蓣四倍体新种质"XHJ-401"的栽培与杂交第154-155页
     ·XHJ-401的根茎产量第154页
     ·XHJ-401的根茎含水量与薯蓣皂苷元含量第154-155页
     ·四倍体XHJ-401与二倍体AK的杂交第155页
 3 分析与讨论第155-160页
   ·四倍体与二倍体物候学比较观察第155-156页
   ·四倍体与二倍体器官形态学比较第156-157页
   ·四倍体与二倍体叶表皮及气孔器的显微形态结构比较第157-158页
     ·气孔器密度、大小与环境的关系及倍性鉴定第158页
     ·叶下表皮及气孔器的显微形态与倍性鉴定第158页
   ·保卫细胞叶绿体的超微形态结构与光合作用的关系第158-160页
第八章 盾叶薯蓣四倍体新种质"XHJ-401"生理生化特性研究第160-169页
 1 材料与仪器及方法第160-163页
   ·材料第160页
     ·光合特性研究材料第160页
     ·叶片叶绿体色素含量及其酶活性研究材料第160页
   ·仪器与试剂第160-161页
     ·仪器第161页
     ·试剂第161页
   ·方法第161-163页
     ·光合特性测定第161页
     ·叶绿体色素含量测定第161-162页
       ·色素的提取第161页
       ·吸光度的测定第161-162页
       ·各色素含量的计算第162页
     ·过氧化物酶活性测定第162-163页
       ·试剂配制第162页
       ·实验步骤第162页
       ·计算方法第162-163页
     ·过氧化氢酶活性的测定方法第163页
 2 结果与分析第163-167页
   ·光合特性研究第163-165页
     ·不同倍性盾叶薯蓣之间的光合速率比较第164-165页
     ·二倍体不同种群之间的光合速率比较第165页
   ·叶绿体色素含量第165-166页
   ·XHJ-401的过氧化物酶活性第166-167页
   ·XHJ-401的过氧化氢酶活性第167页
 3 分析与讨论第167-169页
   ·盾叶薯蓣的光合特性第167-168页
   ·叶绿体色素含量第168页
   ·过氧化物酶活性第168页
   ·过氧化氢酶活性第168-169页
全文总结第169-174页
创新点第174-176页
图版第176-187页
参考文献第187-197页
缩写词表第197-199页
作者简介第199-200页
致谢第200页

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