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从益髓生血颗粒调控β-珠蛋白及相关基因表达探讨肾生髓理论的分子机制

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-17页
英文缩略语第17-19页
前言第19-22页
上篇 理论研究第22-57页
 第一章 肾生髓理论的形成与发展第22-28页
  一、肾生髓与藏精的内在关系第22-23页
  二、肾生髓与髓养骨第23-24页
  三、肾生髓通于脑第24-25页
  四、肾生髓与髓生血第25-27页
  参考文献第27-28页
 第二章 肾生髓理论的现代研究进展第28-37页
  一、肾生髓与神经系统功能的相关性第28-29页
  二、肾生髓与髓养骨物质基础的现代研究第29-31页
  三、肾生髓与髓生血的客观性研究第31-32页
  四、肾生髓理论的分子机制研究第32-33页
  五、问题和展望第33-34页
  参考文献第34-37页
 第三章 珠蛋白基因的表达调控及开关机制第37-46页
  一、珠蛋白基因簇的组织及表达的时空顺序性第37-38页
  二、珠蛋白基因的结构与表达第38-39页
  三、珠蛋白基因表达与红系分化起重要作用的转录因子第39-41页
  四、珠蛋白基因的顺式作用元件第41-42页
  五、β-珠蛋白基因簇位点调控区第42-44页
  参考文献第44-46页
 第四章 中药治疗地中海贫血的分子基础与临床研究第46-49页
 第五章 地中海贫血的药物治疗进展第49-56页
  一、输血配合铁螯合剂治疗第49-50页
  二、γ-珠蛋白基因激活剂第50页
  三、珠蛋白合成调节剂第50-51页
  四、α-肽链合成抑制剂第51页
  五、中医药治疗第51-52页
  六、展望第52-53页
  参考文献第53-56页
 理论研究总结第56-57页
下篇 益髓生血颗粒调控珠蛋白及相关基因表达的研究第57-118页
 第一章 益髓生血颗粒治疗β-地中海贫血整体效应的研究第57-67页
  第一节 益髓生血颗粒对β-地中海贫血患者血液学参数及相关症候的影响第57-62页
   1 病例选择第57-58页
   2 材料与方法第58页
   3 结果第58-60页
   4 讨论第60-61页
   参考文献第61-62页
  第二节 益髓生血颗粒对β-地中海贫血患者骨髓幼稚红细胞DNA和RNA荧光强度的影响第62-66页
   1 材料与方法第62页
    1.1 病例选择第62页
    1.2 骨髓血细胞涂片的制备第62页
    1.3 AO染色第62页
    1.4 观察方法第62页
   2 结果第62-64页
    2.1 治疗前后骨髓幼稚红细胞DNA和RNA AO荧光染色叠加图像分析第62-63页
    2.2 治疗前后骨髓幼稚红细胞DNA和RNA三维立体重组图像分析第63-64页
   3 讨论第64-65页
   参考文献第65-66页
  小结第66-67页
 第二章 益髓生血颗粒对造血刺激因子表达的影响第67-80页
  1 ELISA检测治疗前后患者外周血EPO含量的改变第67-68页
   1.1 病例一般资料第67页
   1.2 材料与方法第67-68页
   1.3 结果第68页
  2 real-time PCR检测患者治疗前后外周血中EPO R、c-kit及骨髓血中SCF基因表达的改变第68-74页
   2.1 病例一般资料第68页
   2.2 所用试剂及部分仪器第68-69页
   2.3 有核血细胞分离第69-70页
   2.4 Total RNA提取第70-71页
   2.5 逆转录反应第71页
   2.6 real-time PCR第71-72页
   2.7 1.5%琼脂糖凝胶电泳观察扩增结果第72-73页
   2.8 GeneAMP 5700 SDS software分析荧光检测结果第73页
   2.9 统计学方法第73页
   2.10 治疗前后患者外周血细胞c-kit、EPO R和骨髓有核细胞SCF基因表达的改变第73-74页
  3 讨论第74-77页
   3.1 益髓生血颗粒对GM-CSF基因表达的影响第74-75页
   3.2 益髓生血颗粒对EPO和EPO R表达的影响第75页
   3.3 益髓生血颗粒对SCF和c-kit基因表达的影响第75-77页
  小结第77-78页
  参考文献第78-80页
 第三章 益髓生血颗粒对β-珠蛋白LCR HS2位点DNA与核蛋白结合作用的影响第80-94页
  1 材料与方法第80-90页
   1.1 实验病例选择第80页
   1.2 核蛋白提取第80-81页
   1.3 HS2位点DNA探针制备第81-90页
    1.3.1 大量制备pBSK质粒DNA第81-83页
    1.3.2 目的片段探针制备第83-85页
    1.3.3 通过酶切反应获得多条DNA片段第85-88页
    1.3.4 同位素探针标记第88页
    1.3.5 核蛋白粗提物与DNA探针结合第88-89页
    1.3.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳,放射自显影第89页
    1.3.7 电泳结果第89-90页
  2 结果第90页
  3 讨论第90-91页
  小结第91-92页
  参考文献第92-94页
 第四章 益髓生血颗粒对珠蛋白表达调控反式作用因子基因表达的影响第94-105页
  1 材料与方法第94-97页
   1.1 病例一般资料第94页
   1.2 治疗方法第94页
   1.3 骨髓有核细胞样品采集第94页
   1.4 Total RNA的提取与RT反应第94页
   1.5 real-time PCR检测治疗前后患者相关转录因子基因表达的改变第94-97页
   1.6 统计学方法第97页
  2 结果第97-99页
  3 讨论第99-102页
   3.1 益髓生血颗粒对GATA-1、GATA-2基因表达的调节作用第99-100页
   3.2 益髓生血颗粒调节NF-E2基因表达的作用机制第100-102页
  小结第102页
  参考文献第102-105页
 第五章:益髓生血颗粒对β-地中海贫血患者铁蛋白基因表达的影响第105-116页
  1 材料与方法第105-112页
   1.1 实验病例选择第105页
   1.2 骨髓有核细胞分离第105页
   1.3 Total RNA提取第105-106页
   1.4 逆转录反应第106-107页
   1.5 通过PCR扩增来增加模板量第107页
   1.6 摸索PCR反应最佳退火温度第107-108页
   1.7 同位素标记随机引物第108-109页
   1.8 PCR反应第109页
   1.9 PAGE,放射自显影第109-110页
   1.10 对照胶片切下差异条带进行PCR反应第110-111页
   1.11 鉴别表达有差异的条带第111-112页
  2 结果第112页
  3 讨论第112-114页
  小结第114页
  参考文献第114-116页
 实验研究总结第116-118页
结语第118-120页
致谢第120-122页
研究生个人简介第122-123页
攻读博士期间发表论文、参加课题及参加学术会议第123-125页
附件第125-126页
 β-地中海贫血诊断标准和疗效评定标准第125-126页

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