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草鱼Ⅰ型胶原蛋白基因cDNA全序列的克隆、组织分布及在体调控研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 引言第13-24页
第二章 Ⅰ型胶原蛋白A1、A2 基因CDNA 全序列克隆及生物信息学分析第24-63页
 1 实验材料第24-25页
   ·实验鱼第24页
   ·主要试剂及试剂盒第24-25页
   ·主要仪器设备第25页
 2 实验方法第25-32页
   ·草鱼总RNA 提取及检测(无菌条件,冰上操作)第25-26页
   ·通过Long-PCR 法对编码两种胶原蛋白的COL1A1 和COL1A2 基因全长cDNA 扩增第26-28页
   ·引物设计及COL1A1 和COL1A2 编码区片段的获得第28-29页
   ·通过3ˊ、5ˊ-RACE 法对COL1A1 和COL1A2 基因末端非编码区域的扩增和克隆第29-32页
 3 结果与分析第32-60页
   ·草鱼总RNA 的提取第32页
   ·草鱼COL1A1 和COL1A2 基因编码区片段扩增第32-33页
   ·COL1A1 和COL1A2 基因cDNA 全长序列克隆第33-34页
   ·草鱼COL1A1 和COL1A2 基因序列分析第34-44页
   ·序列比对以及系统进化分析第44-54页
   ·COLlA1 和 COLlA2 蛋白序列的生物信息学分析第54-60页
 4 讨论第60-63页
第三章 蚕豆对草鱼Ⅰ型胶原蛋白基因组织表达调控研究第63-73页
 1 材料第63页
   ·实验材料第63页
   ·主要仪器第63页
 2 方法第63-64页
   ·RNA 提取第63页
   ·cDNA 第一链的合成第63页
   ·引物设计第63-64页
   ·RT-PCR 检测目的基因的表达第64页
   ·统计分析第64页
 3 结果与分析第64-71页
   ·草鱼COL1A1 和COL1A2 基因的组织分布及差异性表达第64-70页
   ·蚕豆对草鱼COL1A1 和COL1A2 基因表达差异性影响分析第70-71页
 4 讨论第71-73页
第四章 蚕豆对草鱼肌肉胶原蛋白含量及Ⅰ型胶原蛋白基因表达调控研究第73-85页
 1 材料与方法第73-79页
   ·实验材料第73页
   ·主要试剂和仪器第73-76页
   ·实验方法第76页
   ·实时荧光定量RT-PCR第76-77页
   ·蛋白免疫印迹反应第77-78页
   ·统计学方法第78-79页
 2 结果第79-82页
   ·胶原蛋白含量第79页
   ·超微结构观察第79-80页
   ·实时荧光定量RT-PCR第80-81页
   ·蛋白免疫印迹结果分析第81-82页
 3 讨论第82-85页
第五章 脆肉鲩鱼皮和肌肉胶原蛋白的理化特性及其影响因素比较分析第85-94页
 1 材料与方法第85-87页
   ·实验材料第85-86页
   ·实验方法第86-87页
 2 结果与讨论第87-93页
   ·胶原蛋白的粘度第87-88页
   ·胶原蛋白的热变性温度第88-89页
   ·胶原蛋白的凝胶强度第89-90页
   ·影响胶原蛋白凝胶强度的几个因素第90-93页
 3 结论第93-94页
总结第94-95页
参考文献第95-104页
附录A 常用试剂与缓冲液的配制第104-106页
附录B 缩略词表第106-107页
附录C 在读期间拟发表的文章第107-108页
附录D 部分基因结构功能域三级结构图第108-111页
致谢第111页

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