| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 第一部分 SARS冠状病毒GD322株M基因序列测定及分析 | 第18-32页 |
| 1．1 材料 | 第18-19页 |
| 1．2 实验方法 | 第19-22页 |
| 1．2．1 引物设计与合成 | 第19页 |
| 1．2．2 SARS冠状病毒GD322株RNA的提取 | 第19页 |
| 1．2．3 目的基因扩增 | 第19-20页 |
| 1．2．4 目的基因的纯化回收 | 第20页 |
| 1．2．5 目的基因克隆 | 第20-22页 |
| 1．2．6 M基因的序列测定及同源性分析 | 第22页 |
| 1．2．7 M基因的生物信息学分析 | 第22页 |
| 结果 | 第22-28页 |
| 讨论 | 第28-31页 |
| 小结 | 第31-32页 |
| 第二部分 SARS-CoV Mc区重组表达质粒的构建及鉴定 | 第32-44页 |
| 2．1 材料 | 第32-35页 |
| 2．2 实验方法 | 第35-37页 |
| 2．2．1 Mc区片段的获取 | 第35页 |
| 2．2．2 目的基因克隆 | 第35页 |
| 2．2．3 酶切鉴定 | 第35页 |
| 2．2．4 PCR鉴定 | 第35页 |
| 2．2．5 表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 2．2．6 重组表达质粒的筛选与鉴定 | 第36页 |
| 2．2．7 阳性重组克隆pET32a(+)／Mc的诱导表达及鉴定 | 第36-37页 |
| 2．2．8 免疫印迹(Western-Blot)检测表达蛋白 | 第37页 |
| 结果 | 第37-42页 |
| 讨论 | 第42-43页 |
| 小结 | 第43-44页 |
| 第三部分 SARS冠状病毒Mc蛋白的表达、纯化及复性 | 第44-55页 |
| 3．1 材料 | 第44-45页 |
| 3．2 实验方法 | 第45-47页 |
| 3．2．1 表达产物可溶性的确定 | 第45页 |
| 3．2．2 目的基因表达条件的优化 | 第45页 |
| 3．2．3 表达产物的纯化 | 第45-46页 |
| 3．2．4 纯化蛋白复性 | 第46-47页 |
| 结果 | 第47-52页 |
| 讨论 | 第52-54页 |
| 小结 | 第54-55页 |
| 第四部分 SARS-CoV Mc蛋白抗原活性的初步研究 | 第55-63页 |
| 4．1 材料 | 第55-56页 |
| 4．2 实验方法 | 第56-57页 |
| 4．2．1 复性蛋白免疫大白兔 | 第56页 |
| 4．2．2 Westen-Blot鉴定制备多克隆抗体的特异性 | 第56-57页 |
| 4．2．3 间接ELISA检测复性蛋白免疫原性并测定多抗效价 | 第57页 |
| 4．2．4 复性蛋白的耐热实验 | 第57页 |
| 4．2．5 复性蛋白与人血清反应 | 第57页 |
| 4．2．6 复性蛋白与兔抗229E、OC43血清反应 | 第57页 |
| 结果 | 第57-60页 |
| 讨论 | 第60-62页 |
| 小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 缩略语词汇表 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第70-71页 |
| 学位论文原创性声明 | 第71页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第71页 |
