| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1.引言 | 第11-19页 |
| ·山羊关节炎-脑炎病毒的概述 | 第11页 |
| ·山羊关节炎-脑炎病毒基因组结构和编码蛋白 | 第11-12页 |
| ·关于p28基因的表达 | 第12-13页 |
| ·山羊关节炎-脑炎的发病机理 | 第13页 |
| ·山羊关节炎-脑炎的临床症状 | 第13-14页 |
| ·山羊关节炎-脑炎的病理学特征 | 第14页 |
| ·山羊关节炎-脑炎的诊断 | 第14-16页 |
| ·临床诊断 | 第14页 |
| ·实验室诊断 | 第14-15页 |
| ·血清学诊断 | 第15-16页 |
| ·本研究的背景、内容及意义 | 第16-19页 |
| 2.材料和方法 | 第19-30页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·病毒 | 第19页 |
| ·质粒与菌株 | 第19页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·抗体 | 第19页 |
| ·主要生化试剂 | 第19页 |
| ·主要耗材 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-30页 |
| ·山羊关节滑膜细胞(GSM)的培养及CAEV的繁殖 | 第20页 |
| ·核心蛋白p28基因的扩增 | 第20-21页 |
| ·T-p28重组子的构建 | 第21-22页 |
| ·重组表达载体pET30p28的构建与序列分析 | 第22-24页 |
| ·阳性重组质粒pET30p28的表达 | 第24页 |
| ·表达产物的纯化 | 第24-25页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第25-26页 |
| ·用纯化后p28蛋白做抗原的间接ELISA诊断方法的建立 | 第26-27页 |
| ·p28蛋白免疫小鼠制备CAEV阳性血清 | 第27-28页 |
| ·山羊关节炎-脑炎病毒对卵巢颗粒细胞的感染试验 | 第28-30页 |
| 3.结果 | 第30-42页 |
| ·CAEV的培养 | 第30页 |
| ·p28基因的PCR扩增 | 第30页 |
| ·T-p28重组子的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·重组表达载体pET30p28的构建 | 第30-32页 |
| ·重组表达载体pET30p28的序列分析 | 第32-33页 |
| ·p28蛋白的表达与纯化 | 第33-34页 |
| ·重组蛋白抗原性的鉴定 | 第34-35页 |
| ·免疫印迹试验 | 第34-35页 |
| ·间接ELISA试验 | 第35页 |
| ·用纯化后p28蛋白做抗原的间接ELISA诊断方法的建立 | 第35-39页 |
| ·重组抗原和阳性血清最佳稀释度的确定 | 第35-36页 |
| ·酶标记兔抗山羊IgG最佳稀释度的确定 | 第36页 |
| ·酶标记兔抗山羊IgG最佳作用时间的确定 | 第36-37页 |
| ·敏感性试验 | 第37-38页 |
| ·重复性试验 | 第38-39页 |
| ·重组抗原的应用 | 第39页 |
| ·p28蛋白免疫小鼠阳性血清抗体水平的检测 | 第39页 |
| ·CAEV对卵巢颗粒细胞感染性试验 | 第39-42页 |
| ·CAEV感染颗粒细胞的病变 | 第39页 |
| ·感染颗粒细胞中CAEV前病毒的PCR鉴定 | 第39-40页 |
| ·感染颗粒细胞中CAEV特异性蛋白的免疫印迹试验 | 第40-41页 |
| ·感染颗粒细胞中CAEV在山羊关节滑膜细胞上的病毒滴定 | 第41-42页 |
| 4.讨论 | 第42-44页 |
| 5.结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第53页 |
