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植酸酶构象稳定性与催化活性的关系及抑制动力学研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
英文缩略表第11-12页
1 引言第12-19页
 1.1 植酸酶的结构第13-14页
 1.2 二硫键对蛋白质作用的研究现状第14-15页
 1.3 寡糖链对蛋白质作用的研究进展第15-16页
 1.4 植酸酶热稳定研究进展第16-17页
 1.5 植酸酶酶活调解因子第17-18页
 1.6 本研究的目的意义第18-19页
2 材料与方法第19-23页
 2.1 材料与仪器第19页
  2.1.1 试验材料第19页
  2.1.2 主要试剂与仪器第19页
 2.2 试验方法第19-23页
  2.2.1 植酸酶的分离与纯化第19页
  2.2.2 蛋白质含量的测定第19-20页
  2.2.3 植酸酶的变性和复性第20页
  2.2.4 植酸酶的去糖基化第20页
  2.2.5 金属离子对植酸酶的作用第20页
  2.2.6 磷酸盐和钒酸盐对植酸酶的抑制作用第20-21页
  2.2.7 植酸酶活力的测定方法第21-22页
  2.2.8 荧光光谱和CD光谱的测定第22页
  2.2.9 样品的DSC测定第22-23页
3 结果与分析第23-46页
 3.1 二硫键对植酸酶催化活性和构象的影响第23-27页
  3.1.1 植酸酶于存在和不存在DTT的pH5.6和pH8.3缓冲液中复性第23-24页
  3.1.2 植酸酶在有无还原剂DTT的pH 5.6和pH 8.3缓冲液中复性时构象的变化第24-27页
   3.1.2.1 荧光光谱的变化第24-25页
   3.1.2.2 CD光谱的变化第25-27页
 3.2 去糖基化对植酸酶的稳定性的影响第27-31页
  3.2.1 去糖基化对植酸酶变性温度的影响第27-28页
  3.2.2 糖基化对植酸酶热稳定性的影响第28-29页
  3:2.3 糖基化对植酸酶构象的影响第29-30页
  3.2.4 糖基化对植酸酶的抗胰蛋白酶和胃蛋白酶的影响第30-31页
 3.3 金属离子对植酸酶催化活性和构象的影响第31-37页
  3.3.1 Mg~(2+)对植酸酶催化活性和热稳定性的作用第31-32页
  3.3.2 Mg~(2+)对植酸酶构象的影响第32-35页
  3.3.3 Mg~(2+)对植酸酶热变性温度的影响第35页
  3.3.4 Cu~(2+)和Zn~(2+)对植酸酶的影响第35-37页
 3.5 植酸对植酸酶的抑制作用第37-41页
  3.5.1 植酸浓度对植酸酶活性的影响第37-38页
  3.5.2 植酸抑制参数的测定第38-41页
 3.6 钒酸盐对植酸酶的影响第41-43页
 3.7 以pNPP为底物,磷酸盐及钒酸盐对植酸酶的影响第43-46页
4 讨论第46-51页
 4.1 二硫键对植酸酶构象、催化活性的作用第46-47页
 4.2 去糖基化对植酸酶作用的探讨第47-48页
 4.3 植酸酶的激活和抑制机理第48-50页
 4.4 尚待进一步研究的问题第50-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-61页
致谢第61-62页
攻读学位期间发表的学术论文第62页

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