| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言与文献综述 | 第8-29页 |
| 1 昆虫神经肽及其在虫害控制上的应用研究进展 | 第8-21页 |
| ·昆虫主要几种神经肽的分子生物学研究概述 | 第9-14页 |
| ·昆虫神经肽保幼激素抑制素(Allatostatin,AST)研究进展 | 第14-21页 |
| 2 利用大肠杆菌获取重组蛋白的研究进展 | 第21-26页 |
| ·胞内直接表达重组蛋白 | 第21-24页 |
| ·重组蛋白分泌到周质 | 第24-25页 |
| ·重组蛋白分泌到胞外培养基中 | 第25-26页 |
| ·pET表达系统 | 第26页 |
| 3 本实验的研究目的和意义 | 第26-28页 |
| 4 本实验的技术路线 | 第28-29页 |
| 材料与方法 | 第29-43页 |
| 第一部分 重组载体pET-44a-A_2的构建与表达 | 第29-42页 |
| 1 材料与试剂 | 第29页 |
| 2 Grb-ast_2串联体基因的拼接 | 第29-31页 |
| ·引物设计与合成 | 第29-30页 |
| ·PCR法拼接 | 第30-31页 |
| ·PCR产物回收 | 第31页 |
| 3 表达载体pET-44a-A_2的构建 | 第31-39页 |
| ·载体pSK、pGEM-5ZF和pET-44a的制备 | 第31-33页 |
| ·pSK-A_2的制备 | 第33-36页 |
| ·pGEM-5ZF-A_2的构建 | 第36-38页 |
| ·pET-44a-A_2的构建 | 第38-39页 |
| 4 Grb-ast_2串联体基因的表达与含量测定 | 第39-42页 |
| ·pET-44a-A_2转化BL21(DE3) | 第39页 |
| ·小量提取质粒鉴定及测序 | 第39-40页 |
| ·诱导表达与含量测定 | 第40-42页 |
| 第二部分 抗虫实验 | 第42-43页 |
| 1 实验材料 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-43页 |
| 结果与分析 | 第43-58页 |
| 第一部分 表达载体pET-44a-A_2的构建与表达 | 第43-53页 |
| 1 Grb-ast_2串联体基因的拼接 | 第43-45页 |
| 2 表达载体pET-44a-A_2的构建 | 第45-52页 |
| ·pSK-A_2的制备 | 第45-48页 |
| ·pGEM-5ZF-A_2与pET-44a-A_2的构建 | 第48-52页 |
| 3 Grb-ast_2串联体基因的表达与含量测定 | 第52-53页 |
| 第二部分 抗虫实验 | 第53-58页 |
| 结论 | 第58页 |
| 讨论 | 第58-63页 |
| 1 Grb-ast_2串联体的构建 | 第58页 |
| 2 外源基因表达效率的影响因素 | 第58-61页 |
| 3 虫效研究 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
