| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 引言 | 第13-25页 |
| 一 抗病毒DNA疫苗研究进展 | 第13-18页 |
| 1 抗病毒DNA疫苗在小鼠上的应用 | 第14页 |
| 2 DNA疫苗对大动物的免疫效果 | 第14-15页 |
| 3 DNA疫苗的接种 | 第15-17页 |
| 4 DNA疫苗的基因佐剂 | 第17-18页 |
| 二. RNA病毒的反向遗传操作 | 第18-25页 |
| 1 概述 | 第18-19页 |
| 2 感染性分子克隆的构建 | 第19-23页 |
| 3 感染性分子克隆的体外操作 | 第23页 |
| 4 PRRSV的反向遗传操作 | 第23-24页 |
| 5 结语 | 第24-25页 |
| 研究报告 | 第25-82页 |
| 实验一. 猪繁殖与呼吸综合征病毒双基因多组合DNA疫苗的构建及其免疫效力评价 | 第25-51页 |
| 1 材料与方法 | 第26-32页 |
| ·病毒与质粒 | 第26-27页 |
| ·PRRSV基因组RNA的提取 | 第27页 |
| ·PRRSV基因疫苗免疫原基因的扩增与克隆 | 第27-29页 |
| ·PRRSV基因免疫质粒的体外表达 | 第29页 |
| ·PRRSV基因疫苗的动物预试验 | 第29-30页 |
| ·PRRSV基因疫苗的动物免疫试验 | 第30-31页 |
| ·PRRSV基因疫苗的动物保护试验 | 第31-32页 |
| 2 结果 | 第32-43页 |
| ·PRRSV基因组RNA的提取 | 第32页 |
| ·PRRSV免疫原基因的扩增与克隆 | 第32-34页 |
| ·PRRSV基因免疫质粒的体外表达与动物预试验 | 第34页 |
| ·PRRSV基因疫苗在猪体的免疫保护试验 | 第34-43页 |
| 3 讨论 | 第43-51页 |
| ·PRRSV双基因表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·PRRSV基因疫苗诱导的免疫应答 | 第44-47页 |
| ·PRRSV基因疫苗对动物的保护作用 | 第47-48页 |
| ·抗PRRSV疫苗的发展方向 | 第48-51页 |
| 实验二. 猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株基因组全长cDNA克隆的构建及其感染性的检测 | 第51-82页 |
| 1 材料与方法 | 第51-65页 |
| ·病毒、质粒、菌株与细胞系 | 第51-53页 |
| ·PRRSV基因组片段的扩增与克隆 | 第53-56页 |
| ·PRRSV基因组全长cDNA克隆的构建 | 第56-61页 |
| ·PRRSV基因组全长cDNA克隆的体外转录 | 第61-62页 |
| ·稳定表达T7 RNA聚合酶细胞系的建立 | 第62-64页 |
| ·基因组全长cDNA体外转录本的转染及其感染性的检测 | 第64-65页 |
| ·基因组全长cDNA克隆的转染及其感染性的检测 | 第65页 |
| 2 结果 | 第65-75页 |
| ·PRRSV基因组片段的扩增与克隆 | 第65-66页 |
| ·PRRSV基因组全长cDNA克隆的构建 | 第66-73页 |
| ·PRRSV基因组全长cDNA克隆的体外转录 | 第73-74页 |
| ·稳定表达T7 RNA聚合酶细胞系的建立 | 第74-75页 |
| ·基因组全长cDNA及其体外转录本的转染及其感染性的检测 | 第75页 |
| 3 讨论 | 第75-82页 |
| ·克隆序列的完整性与真实性 | 第75-79页 |
| ·体外转录与RNA的转染 | 第79-80页 |
| ·病毒粒子的检测 | 第80页 |
| ·全长cDNA克隆没有感染性的可能原因与今后的解决方法 | 第80-82页 |
| 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 作者简历 | 第95-96页 |
| 附图 | 第96-99页 |
