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杏鲍菇和云柚菇中抗病毒蛋白的分离纯化、理化性质及其生物活性

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
1 前言第13-27页
   ·食用菌中抗病毒抗肿瘤大分子物质第13-25页
     ·多肽及蛋白类第13-22页
       ·来源及分离第14页
       ·类型第14页
       ·理化性质、活性功能及作用方式第14-22页
         ·多肽类第14页
         ·蛋白类第14-16页
         ·核糖核酸酶类第16页
         ·蛋白复合体第16-17页
         ·凝集素第17-20页
         ·核糖体失活蛋白类第20-22页
     ·多糖类第22-24页
       ·活性第22-23页
       ·构效关系第23页
       ·作用方式第23-24页
     ·核酸类第24-25页
   ·食用菌抗病毒抗肿瘤小分子物质第25页
   ·研究目的与意义第25-27页
2 材料与方法第27-36页
   ·材料第27-28页
     ·供试食用菌第27页
     ·毒源及抗血清第27页
     ·供试寄主第27页
     ·层析介质及超滤管第27页
     ·试剂第27页
     ·实验动物第27-28页
     ·肿瘤细胞株第28页
   ·方法第28-36页
     ·抗TMV活性检测第28页
     ·抗病毒蛋白粗提液的制备第28页
       ·杏鲍菇蛋白粗提液的制备第28页
       ·云柚菇蛋白的粗提液的制备第28页
     ·蛋白的理化性质第28-31页
       ·蛋白分子量测定第29页
       ·蛋白等电点的测定第29-30页
       ·蛋白的定量第30页
       ·蛋白糖含量的测定第30页
       ·蛋白紫外扫描图第30页
       ·蛋白pH和温度稳定性第30-31页
     ·蛋白血清性质第31-32页
       ·蛋白抗血清的制备第31页
       ·蛋白抗血清效价的测定第31-32页
       ·蛋白抗血清特异性的测定第32页
     ·蛋白抗TMV活性测定与机理分析第32-34页
       ·蛋白抗TMV活性测定第32页
       ·蛋白对TMV侵染抑制作用的机理分析第32-34页
         ·蛋白与TMV孵育后电镜观察第32-33页
         ·TMV接种前后用蛋白浓液处理叶片第33页
         ·叶圆片法测定XB蛋白对病毒增殖的作用第33页
         ·蛋白与TMV外壳蛋白(CP)的互作第33-34页
     ·蛋白血凝活性的测定第34页
       ·兔血红细胞的采集第34页
       ·对兔血红细胞凝集活性的检测第34页
       ·糖对yy_4蛋白凝集活性的检测第34页
     ·蛋白对人早幼粒细胞(HL-60)的体外抑制作用第34-36页
       ·蛋白对HL-60细胞生长特性及形态的影响第34-35页
       ·MTT法检测蛋白对HL-60细胞的抑制作用第35页
       ·XB蛋白作用下HL-60细胞生长曲线的测定第35-36页
3 结果与分析第36-56页
   ·蛋白的分离纯化第36-42页
     ·XB蛋白的分离纯化第36-40页
     ·XB蛋白的回收率第40页
     ·yy_4蛋白的分离纯化第40-42页
   ·蛋白的理化性质第42-46页
     ·蛋白的纯度鉴定第42页
     ·蛋白亚基分子量的测定第42-44页
       ·XB蛋白亚基分子量的测定第42-43页
       ·yy_4蛋白亚基分子量的测定第43-44页
     ·XB蛋白等电点的测定第44-45页
     ·XB蛋白糖含量的测定第45页
     ·XB蛋白的紫外扫描第45-46页
     ·XB蛋白pH稳定性第46页
     ·XB蛋白的温度稳定性第46页
   ·蛋白的免疫原性及抗血清的制备第46-47页
   ·蛋白的抗TMV活性及机理测定第47-52页
     ·蛋白对TMV侵染抑制有效浓度的测定第47-48页
       ·XB蛋白对TMV侵染抑制有效浓度的测定第47-48页
       ·yy_(4a)蛋白对TMV侵染抑制有效浓度的测定第48页
     ·XB蛋白对TMV侵染抑制作用的机理分析第48-52页
       ·XB蛋白与TMV孵育后的电镜观察第48-50页
       ·TMV接种前、后用蛋白浓液处理叶片第50页
       ·XB蛋白对TMV复制的抑制作用第50-51页
       ·XB蛋白与TMV CP的互作第51-52页
         ·TMV CP的提纯第51页
         ·TMV CP与XB蛋白混合后PAGE电泳第51-52页
   ·纯化蛋白的血凝活性第52-53页
     ·对兔血红细胞的凝集作用第52页
     ·糖对yy_4蛋白血凝活性的抑制作用第52-53页
   ·蛋白对HL-60的体外抑制作用第53-56页
     ·蛋白对HL-60细胞生长特性及形态的影响第53页
     ·蛋白对HL-60细胞增殖的影响第53-54页
     ·XB蛋白作用下HL-60的生长曲线的测定第54-56页
4 讨论第56-61页
   ·抗病毒活性蛋白及其筛选第56页
   ·XB蛋白、yy_(4a)蛋白与其它抗病毒蛋白的比较第56-58页
     ·理化性质的比较第56-58页
     ·抗病毒活性比较第58页
   ·XB蛋白、yy_(4a)蛋白凝集素活性的比较第58-61页
参考文献第61-68页
致谢第68-69页
附录一 缩写词与英文对照第69-70页
附录二 试剂与缓冲液的配制第70-74页
附录三 攻硕期间发表论文第74页

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