| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-16页 |
| 引言 | 第16-50页 |
| 一、 性别的形成与分化 | 第18-24页 |
| (一) 人类性腺的器官发生 | 第18-21页 |
| (二) 小鼠的性腺发生 | 第21-23页 |
| (三) 鸡的性腺发育 | 第23页 |
| (四) 鳄鱼的性腺发生 | 第23-24页 |
| 二、 性别决定与性别分化机制 | 第24-35页 |
| (一) 性别决定与性别分化的分子机制 | 第24-33页 |
| (二) 性别决定与性别分化的研究方法 | 第33-34页 |
| (三) 鱼类的性别决定与性别分化研究进展 | 第34-35页 |
| 三、 DMY／Dmrt1——参与性别决定的重要基因 | 第35-37页 |
| (一) DMY／Dmrt1的发现与命名 | 第35页 |
| (一) DMY／Dmrt1的分布与表达 | 第35-36页 |
| (三) DMY／Dmrt1的研究进展与展望 | 第36-37页 |
| 四、 P450c17——参与性别分化的基因 | 第37-43页 |
| (一) P450c17是P450超基因家族成员之一 | 第37-38页 |
| (二) 类固醇激素的生物合成及功能 | 第38页 |
| (三) P450c17的研究进展 | 第38-43页 |
| 五、 选择性剪接 | 第43-47页 |
| (一) 选择性剪接的模式 | 第43-44页 |
| (二) 剪接机理 | 第44-46页 |
| (三) 选择性剪接与蛋白质多样性 | 第46-47页 |
| 六、 本论文研究的意义 | 第47-50页 |
| 材料和方法 | 第50-74页 |
| 一、 材料与试剂 | 第50-54页 |
| (一) 实验动物 | 第50页 |
| (二) 实验动物的生物学特性 | 第50-51页 |
| (三) 引物 | 第51-52页 |
| (四) 菌株及细胞 | 第52页 |
| (五) 主要试剂及来源 | 第52-53页 |
| (六) 常用试剂配方 | 第53-54页 |
| 二、 实验方法 | 第54-74页 |
| (一) 性别的鉴定 | 第54-55页 |
| (二) DNA的提取与纯化: | 第55-56页 |
| (三) RNA的提取与纯化 | 第56-58页 |
| (四) cDNA模板的制备 | 第58-60页 |
| (五) RACE扩增 | 第60-62页 |
| (六) RACE产物的克隆和鉴定 | 第62-67页 |
| (七) 序列测定及分析 | 第67页 |
| (八) RT-PCR | 第67-68页 |
| (九) Southern杂交与Northern杂交 | 第68-70页 |
| (十) mRNA组织原位杂交 | 第70-74页 |
| 结果与分析 | 第74-109页 |
| 第一部分 黄鳝P450c17基因的选择性剪接——克隆、结构与表达分析 | 第74-102页 |
| 一、 黄鳝各组织cDNA合成 | 第74-76页 |
| (一) 总RNA和mRNA的提取 | 第74页 |
| (二) cDNA合成 | 第74-76页 |
| 二、 黄鳝CYP17基因的5′-RACE和3′-RACE及RACE产物的克隆 | 第76-79页 |
| (一) 黄鳝CYP17基因的RACE反应及杂交检测 | 第76-77页 |
| (二) RACE产物的克隆及鉴定 | 第77-79页 |
| 三、 黄鳝CYP17基因的序列分析 | 第79-86页 |
| (一) 4个黄鳝全长CYP17基因及推导的氨基酸序列 | 第79-83页 |
| (二) 4个转录本的结构示意图 | 第83-85页 |
| (三) 黄鳝CYP17基因的系统进化分析 | 第85-86页 |
| 四、 Southern杂交分析 | 第86-87页 |
| 五、 黄鳝CYP17基因的结构分析 | 第87-98页 |
| (一) 黄鳝CYP17基因的推导氨基酸一级结构序列分析 | 第87-89页 |
| (二) 黄鳝CYP17基因的推导氨基酸二级结构分析 | 第89-92页 |
| (三) 黄鳝CYP17基因的推导氨基酸空间结构预测 | 第92-98页 |
| 六、 黄鳝CYP17基因的表达分析 | 第98-102页 |
| (一) Northern杂交分析 | 第98-99页 |
| (二) 黄鳝CYP17基因的表达谱 | 第99-100页 |
| (三) 黄鳝CYP17基因在性腺组织中的原位杂交分析 | 第100-102页 |
| 第二部分 青鳉DMY和Dmrt1的选择性剪接分析 | 第102-109页 |
| 一、 青鳉性腺SMART cDNA模板的制备 | 第102-103页 |
| 二、 青鳉DMY和Dmrt1基因3′-RACE及RACE产物克隆 | 第103页 |
| 三、 青鳉DMY和Dmrt1序列分析 | 第103-109页 |
| (一) 青鳉DMY和Dmrt1基因的3’序列及推导的氨基酸序列 | 第103-106页 |
| (二) 青鳉DMY和Dmrt1的选择性剪接模式图 | 第106-107页 |
| (三) 青鳉DMY和Dmrt1基因的结构分析 | 第107-109页 |
| 讨论 | 第109-124页 |
| 一、 性腺发育的特征 | 第109-111页 |
| (一) 黄鳝性腺的发生与分化 | 第109-110页 |
| (二) 青鳉性腺发育的特征 | 第110-111页 |
| 二、 黄鳝P450c17、青鳉DMY和Dmrt1在性别发育分化中的功能探讨 | 第111-113页 |
| (一) 黄鳝P450c17基因的表达与功能 | 第111-112页 |
| (二) 青鳉DMY和Dmrt1基因是其性别形成的主基因 | 第112-113页 |
| (三) 性别决定是一个复杂的级联网络调控体系 | 第113页 |
| 三、 选择性剪接与性别决定 | 第113-120页 |
| (一) 选择性剪接与生物进化 | 第114页 |
| (二) 果蝇的性别决定与选择性剪接 | 第114-118页 |
| (三) 小鼠Sry的表达与WT1选择性剪接 | 第118-119页 |
| (四) 黄鳝P450c17、青鳉DMY和Dmrt1基因的选择性剪接 | 第119-120页 |
| 四、 Y染色体的进化与性别决定主基因 | 第120-124页 |
| (一) 人类Y染色体进化与SRY的进化 | 第121-122页 |
| (二) 青鳉DMRT基因的进化 | 第122-124页 |
| 研究总结 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-153页 |
| 博士期间发表与待发表论文 | 第153-154页 |
| 致谢 | 第154-155页 |
| 缩写 | 第155-158页 |
