| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-17页 |
| 第一章 牛蛙生长激素基因cDNA的克隆与序列分析 | 第17-35页 |
| 摘要 | 第17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 材料和方法 | 第19-25页 |
| 结果 | 第25-33页 |
| 讨论 | 第33-20页 |
| 图片和图表 | 第20-35页 |
| 图1.1 牛蛙生长激素基因克隆技术路线 | 第20-23页 |
| 图1.2 pMDl8-T载体物理图谱 | 第23-25页 |
| 图1.3 BfGH RT-PCR电泳图 | 第25-26页 |
| 图1.4 BfGH克隆菌落PCR | 第26-27页 |
| 图1.5 重组质粒pbfGH酶切鉴定 | 第27页 |
| 图1.6 牛蛙生长激素基因cDNA序列和推导的蛋白质序列 | 第27-29页 |
| 图1.7 BfGH与已有报道牛蛙生长激素基因的蛋白质分子进化树 | 第29页 |
| 图1.8 本研究新克隆牛蛙生长激素蛋白质序列与已有报道的差异 | 第29-31页 |
| 图1.9 BfGH蛋白质的二级结构 | 第31-32页 |
| 图1.10 BfGH蛋白修饰位点的预测 | 第32页 |
| 图1.11 牛蛙生长激素BfGH蛋白质与生长激素保守结构域的比较 | 第32-28页 |
| 表1.1 本研究克隆的牛蛙生长激素基因与已有报道的同源性分析 | 第28-30页 |
| 表1.2 牛蛙生长激素蛋白(BfGH)的氨基酸组成 | 第30-35页 |
| 第二章 牛蛙生长激素基因在大肠杆菌中的表达与重组蛋白回收 | 第35-49页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 引言 | 第35页 |
| 材料和方法 | 第35-40页 |
| 结果 | 第40-45页 |
| 讨论 | 第45-36页 |
| 图片和图表 | 第36-49页 |
| 图2.1 pGEX1-λT载体的物理图谱 | 第36-41页 |
| 图2.2 重组pGEX质粒的菌落PCR电泳图 | 第41页 |
| 图2.3 pgBfGH plasmid/BamHI+EcoRI酶切电泳图谱 | 第41-42页 |
| 图2.4 重组质粒原核表达产物SDS-PAGE | 第42-43页 |
| 图2.5 重组pgBfGH融合蛋白的回收产物SDS-PAGE | 第43-45页 |
| 图2.6 重组BfGH蛋白的ELISA-RA检测 | 第45-44页 |
| 表2.1 间接ELISA法检测兔抗血清 | 第44-49页 |
| 第三章 牛蛙生长激素BfGH基因真核表达研究 | 第49-59页 |
| 摘要 | 第49页 |
| 引言 | 第49页 |
| 材料和方法 | 第49-53页 |
| 结果 | 第53-56页 |
| 讨论 | 第56-50页 |
| 图片和图表 | 第50-59页 |
| 图3.1 VR1020载体物理图谱 | 第50-54页 |
| 图3.2 真核表达质粒VBFGH菌落PCR筛选 | 第54页 |
| 图3.3 真核表达质粒VBFGH的酶切鉴定与质粒PCR | 第54-55页 |
| 图3.4 真核表达RT-PCR电泳图谱 | 第55-56页 |
| 图3.5 重组牛蛙GH的标准曲线 | 第56页 |
| 表3.1 真核表达样品中BfGH相对含量 | 第56-59页 |
| 第四章 re-BfGH蛋白制剂与核酸制剂的制备及其对牛蛙促长效应的初步研究 | 第59-76页 |
| 摘要 | 第59页 |
| 引言 | 第59-60页 |
| 材料和方法 | 第60-63页 |
| 结果 | 第63-69页 |
| 讨论 | 第69-63页 |
| 图片和图表 | 第63-76页 |
| 图4.1 阳离子脂质体(CLs)的透射电镜观察 | 第63-64页 |
| 图4.2 阳离子脂质体(CLs)包裹重组质粒VBFGH电泳检测 | 第64-65页 |
| 图4.3 VBFGH/CLs复合物的透射电镜观察 | 第65-67页 |
| 图4.4 重组牛蛙GH蛋白的脂质体包裹透射电镜观察 | 第67-71页 |
| 图4.5 牛蛙和草鱼GH蛋白修饰位点和二级结构比较 | 第71-62页 |
| 表4.1 实验动物分组及剂量 | 第62-68页 |
| 表4.2 牛蛙注射不同制剂后的重量和体长 | 第68-69页 |
| 表4.3 牛蛙体内注射不同制剂的血清GH含量变化 | 第69-76页 |
| 总结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-92页 |
| 综述:动物生长激素基因工程研究进展 | 第92-136页 |
| 参考文献 | 第116-136页 |
| 在校期间论文发表与获奖情况 | 第136-137页 |
| 在读期间登记的基因序列 | 第137-138页 |
| 声明 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139页 |
