| 英文缩略表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| 1． 引言 | 第10-19页 |
| 1．1 顺式调控元件的转录调控 | 第10-12页 |
| 1．1．1 启动子结构和功能 | 第10-11页 |
| 1．1．2 增强子的结构和功能 | 第11页 |
| 1．1．3 启动子类型 | 第11-12页 |
| 1．2 反式作用因子的调控 | 第12-14页 |
| 1．2．1 转录因子的类型 | 第12页 |
| 1．2．2 转录因子的结构 | 第12-13页 |
| 1．2．2．1 DNA结合域 | 第13页 |
| 1．2．2．2 转录激活域 | 第13页 |
| 1．2．3 转录因子的功能 | 第13-14页 |
| 1．3 mas和ocs启动子研究进展 | 第14-18页 |
| 1．3．1 mas启动子 | 第14-17页 |
| 1．3．1．1 影响mas启动子转录活性的主要的功能单元 | 第15页 |
| 1．3．1．2 mas启动子对mas1'和mas2'转录活性影响 | 第15页 |
| 1．3．1．3 各亚单元对mas基因组织特异性表达模式的影响 | 第15-16页 |
| 1．3．1．4 各亚单元对mas基因伤诱导、激素诱导的影响 | 第16-17页 |
| 1．3．2 ocs启动子 | 第17-18页 |
| 1．3．2．1 ocs元件 | 第17页 |
| 1．3．2．2 Z-DNA序列 | 第17页 |
| 1．3．2．3 ocs增强子 | 第17-18页 |
| 1．4 高强启动子研究进展 | 第18-19页 |
| 2． 材料与方法 | 第19-28页 |
| 2．1 植物材料 | 第19页 |
| 2．2 菌株质粒 | 第19页 |
| 2．3 酶与生化试剂 | 第19页 |
| 2．4 PCR引物 | 第19页 |
| 2．5 实验方法 | 第19-21页 |
| 2．5．1 基因组DNA的提取 | 第19-21页 |
| 2．5．1．1 CTAB法提取基因组总DNA | 第19-20页 |
| 2．5．1．2 CTAB法总DNA提取产物的纯化 | 第20页 |
| 2．5．1．3 微量法提取烟草总DNA | 第20-21页 |
| 2．6 感受态细胞制备 | 第21页 |
| 2．7 转化 | 第21-22页 |
| 2．8 质粒DNA提取 | 第22-23页 |
| 2．8．1 碱法小量提取质粒DNA | 第22页 |
| 2．8．2 大量提取质粒DNA | 第22-23页 |
| 2．9 质粒DNA的酶切鉴定 | 第23-24页 |
| 2．10 植物表达载体的构建 | 第24页 |
| 2．11 序列测定 | 第24页 |
| 2．12 根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备、转化 | 第24-25页 |
| 2．12．1 感受态细胞的制备 | 第24页 |
| 2．12．2 冻融法转化农杆菌 | 第24-25页 |
| 2．13 农杆菌介导转化烟草 | 第25页 |
| 2．14 转基因烟草PCR检测 | 第25-26页 |
| 2．15 转基因烟草的GUS活性分析 | 第26-27页 |
| 2．15．1 转基因烟草的组织化学染色 | 第26页 |
| 2．15．2 GUS基因表达的定量分析 | 第26-27页 |
| 2．15．2．1 新鲜的植物组织总蛋白的提取 | 第26页 |
| 2．15．2．2 GUS蛋白提取液蛋白含量测定（Bradford法） | 第26页 |
| 2．15．2．3 GUS酶活反应 | 第26-27页 |
| 2．15．2．4 荧光测定 | 第27页 |
| 2．15．2．5 酶活力计算 | 第27页 |
| 2．16 不同启动子推动的GUS活性向基表达测定 | 第27页 |
| 2．17 伤诱导GUS活性测定 | 第27-28页 |
| 3． 结果与分析 | 第28-47页 |
| 3．1 目的启动子片段的获得 | 第28-31页 |
| 3．1．1 mas启动子片段的获得 | 第28-29页 |
| 3．1．1．1 mas启动子片段的扩增 | 第28页 |
| 3．1．1．2 mas启动子片段的克隆和鉴定 | 第28-29页 |
| 3．1．2 ocs启动子片段的获得 | 第29-31页 |
| 3．1．2．1 ocs启动子片段的扩增 | 第29-30页 |
| 3．1．2．2 ocs增强子片段的克隆和鉴定 | 第30-31页 |
| 3．2 融合启动子及相应融合基因的构建及鉴定 | 第31-39页 |
| 3．2．1 pMAS中间表达载体的构建及鉴定 | 第31-32页 |
| 3．2．1．2 pMAS中间表达载体的构建 | 第31页 |
| 3．2．1．3 pMAS中间表达载体的鉴定 | 第31-32页 |
| 3．2．2 pOMS植物表达载体的构建及鉴定 | 第32-38页 |
| 3．2．3 pOMS植物表达载体结构图 | 第38-39页 |
| 3．3 烟草转基因植株的获得及检测 | 第39-41页 |
| 3．3．1 烟草转基因植株的获得 | 第39-40页 |
| 3．3．2 组织化学染色检测GUS基因稳定表达 | 第40页 |
| 3．3．3 转基因植株的PCR检测 | 第40-41页 |
| 3．4 转化体GUS活性分析 | 第41-44页 |
| 3．5 不同启动子推动的GUS活性随组织年龄梯度增长 | 第44-45页 |
| 3．6 不同启动子推动的GUS活性受损伤诱导 | 第45-47页 |
| 4． 讨论 | 第47-51页 |
| 4．1 多拷贝DNA片段的获得 | 第47页 |
| 4．2 同一基因转化的株系中基因表达水平 | 第47-48页 |
| 4．3 各启动子指导基因组织特异性表达模式 | 第48页 |
| 4．4 转基因植株中外源基因拷贝数与基因表达活性之间的关系 | 第48页 |
| 4．5 增强子拷贝数与融合启动子活性之间的关系 | 第48-49页 |
| 4．6 多拷贝增强子和启动子互作机制模型 | 第49-51页 |
| 5． 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 英文摘要 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
