| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 第一章 生物技术生产聚羟基链烷酸酯（PHAs）的研究 | 第11-31页 |
| 第一节 PHAs简介和应用及其共混改性 | 第11-16页 |
| 1 PHAs简介 | 第11-14页 |
| 2 PHAs共混改性 | 第14-15页 |
| 3 PHAs应用 | 第15-16页 |
| 第二节 PHAs生物合成和降解分子机制及其解聚酶 | 第16-19页 |
| 1 PHAs生物合成及其分子机制 | 第16-18页 |
| 2 PHB降解及其解聚酶 | 第18-19页 |
| 第三节 PHAs生产的研究 | 第19-27页 |
| 1 细菌发酵生产PHB/PHBV | 第19页 |
| 2 转基因植物生产PHAs | 第19-27页 |
| 第四节 本研究立题依据与意义 | 第27-28页 |
| 第五节 转基因植物生产PHAs的问题与设想 | 第28-31页 |
| 第二章 种子特异性启动子（napinB promoter）分离、表达载体构建及其功能鉴定 | 第31-66页 |
| 第一节 引言 | 第31-35页 |
| 第二节 材料与方法 | 第35-51页 |
| 1 实验材料和试剂 | 第35页 |
| 1．1 实验材料 | 第35页 |
| 1．2 试剂 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-51页 |
| 2．1 油菜H165基因组DNA提取 | 第35-36页 |
| 2．1．1 提取液配制 | 第36页 |
| 2．1．2 植物DNA提取 | 第36页 |
| 2．2 种子特异性启动子napinB的分离及序列分析 | 第36-39页 |
| 2．2．1 napinB启动子扩增和序列分析 | 第36-39页 |
| 2．2．1．1 napinB启动子扩增 | 第36-37页 |
| 2．2．1．2 nap-T构建 | 第37-39页 |
| 2．2．2 序列测定 | 第39页 |
| 2．3 种子特异性表达载体nap-GUS和nap-EHA构建 | 第39页 |
| 2．3．1 nap-GUS构建 | 第39页 |
| 2．3．2 nap-EHA构建 | 第39页 |
| 2．4 农杆菌介导的烟草转化 | 第39-42页 |
| 2．4．1 转化农杆菌及转化子鉴定 | 第39-42页 |
| 2．4．1．1 农杆菌感受态的制备 | 第39-40页 |
| 2．4．1．2 冻融法转化农杆菌 | 第40页 |
| 2．4．1．3 农杆菌转化子的鉴定 | 第40-42页 |
| 2．4．2 农杆菌介导的植物转化 | 第42页 |
| 2．5 转基因烟草的PCR检测 | 第42-43页 |
| 2．6 转基因植株的PCR-Southern杂交及Southern分析 | 第43-47页 |
| 2．7 转基因烟草的移栽与田间管理 | 第47页 |
| 2．8 转基因烟草GUS基因表达分析 | 第47-51页 |
| 2．8．1 GUS基因表达的荧光检测分析 | 第47-49页 |
| 2．8．2 转基因烟草种子GUS基因表达组织化学分析 | 第49-50页 |
| 2．8．3 3-酮硫裂解酶的提取及酶活性分析 | 第50-51页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第51-66页 |
| 1 种子特异性启动子nap300分离、鉴定及序列分析 | 第51-53页 |
| 2 种子特异性表达载体nap-GUS构建与转基因烟草鉴定 | 第53-61页 |
| 2．2 nap-GUS的构建及PCR和酶切鉴定 | 第53-61页 |
| 2．2．1 nap-GUS构建 | 第53-55页 |
| 2．2．2 nap-GUS的PCR和酶切鉴定 | 第55页 |
| 2．2．3 烟草转化和转基因烟草获得 | 第55-56页 |
| 2．2．3．1 获得烟草转化株 | 第55页 |
| 2．2．3．2 转基因烟草（with nap-GUS）获得 | 第55-56页 |
| 2．2．4 转基因烟草的移栽、管理与生长情况观察 | 第56-58页 |
| 2．2．5 转基因烟草种子GUS检测 | 第58-60页 |
| 2．2．5．1 转基因烟草中GUS基因表达荧光检测 | 第58-60页 |
| 2．2．5．2 转基因烟草中GUS基因表达组织化学分析 | 第60页 |
| 2．2．6 选择GUS基因作为外源基因的依据 | 第60-61页 |
| 3 种子特异性表达载体nap-EHA构建与转基因烟草获得 | 第61-66页 |
| 3．1 nap-EHA构建 | 第61-62页 |
| 3．2 nap-EHA的PCR和酶切鉴定 | 第62页 |
| 3．3 转基因烟草（with nap-EHA）获得 | 第62-64页 |
| 3．4 3-酮硫裂解酸酶活检测分析 | 第64页 |
| 3．5 选择phbA作为外源基因检测napinB启动子功能的意义 | 第64-66页 |
| 第三章 表达PHB合成相关基因的转基因油菜的获得 | 第66-79页 |
| 第一节 引言 | 第66页 |
| 第二节 油莱遗传与转化 | 第66-68页 |
| 第三节 材料与方法 | 第68-72页 |
| 1 材料与试剂 | 第68-69页 |
| 1．1 植物材料 | 第68页 |
| 1．2 菌株 | 第68页 |
| 1．3 试剂 | 第68-69页 |
| 2 方法 | 第69-72页 |
| 2．1 农杆菌介导的植物转化 | 第69-70页 |
| 2．1．1 YEB培养基配制 | 第69页 |
| 2．1．2 农杆菌活化 | 第69页 |
| 2．1．3 细菌菌种保存 | 第69页 |
| 2．1．4 油菜转化 | 第69-70页 |
| 2．1．4．1 油菜转化基本培养基配制 | 第69页 |
| 2．1．4．2 转化材料 | 第69页 |
| 2．1．4．3 转化过程 | 第69-70页 |
| 2．2 转基因油莱PCR鉴定 | 第70-72页 |
| 2．2．1 转基因油菜基因组DNA提取 | 第70页 |
| 2．2．1．1 提取液配制 | 第70页 |
| 2．2．1．2 提取方法 | 第70页 |
| 2．2．2 转基因油莱PCR检测 | 第70-72页 |
| 2．2．2．1 扩增phbA基因 | 第70-71页 |
| 2．2．2．2 扩增phbB基因 | 第71页 |
| 2．2．2．3 扩增phbC基因 | 第71-72页 |
| 2．2．2．4 片断扩增采用的酶切体系 | 第72页 |
| 第四节 结果与讨论 | 第72-79页 |
| 1 油菜转化 | 第72-76页 |
| 2 转基因植物获得及其PCR检测 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-79页 |
| 第四章 总结与展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 缩略词 | 第91-93页 |
| 致谢词 | 第93-94页 |
| 在学期间发表的论文及会议摘要 | 第94页 |
