| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 材料和方法 | 第12-23页 |
| 1 材料 | 第12-15页 |
| ·实验对象 | 第12页 |
| ·主要药品及试剂 | 第12-13页 |
| ·主要仪器及设备 | 第13-14页 |
| ·试剂的配制 | 第14-15页 |
| ·DMEM培养基的配制 | 第14页 |
| ·PBS缓冲液的配制 | 第14页 |
| ·0.25%胰蛋白酶的配制 | 第14页 |
| ·0.5%MTT的配制 | 第14页 |
| ·EDTA的配制 | 第14页 |
| ·大黄酸的配制 | 第14-15页 |
| ·高糖DMEM培养基的配制 | 第15页 |
| ·RNASE-FREE水的配制 | 第15页 |
| ·细胞冻存液的配制 | 第15页 |
| 2 方法 | 第15-16页 |
| ·细胞培养方法 | 第15-16页 |
| ·冻存细胞的复苏 | 第15页 |
| ·细胞培养 | 第15页 |
| ·细胞传代 | 第15页 |
| ·细胞冻存 | 第15-16页 |
| ·实验分组 | 第16页 |
| 3 观测指标及方法 | 第16-21页 |
| ·MTT比色法检测肾小球系膜细胞增殖 | 第16-17页 |
| ·MTT方法 | 第16页 |
| ·MTT结果分析 | 第16-17页 |
| ·实时荧光定量PCR法(RT-PCR法)检测系膜细胞WNT、B-CATENINMRNA表达 | 第17-20页 |
| ·引物设计与合成 | 第17页 |
| ·RNA提取实验前的准备 | 第17页 |
| ·RNA提取步骤 | 第17-18页 |
| ·RNA的纯度鉴定 | 第18页 |
| ·反转录(RT)反应 | 第18-19页 |
| ·RT-PCR反应 | 第19页 |
| ·PCR反应结果分析 | 第19-20页 |
| ·免疫组织化学方法测定HMC中WNT、B-CATENIN蛋白的表达 | 第20-21页 |
| ·免疫组化操作步骤 | 第20页 |
| ·结果分析方法 | 第20-21页 |
| ·ELISA法检测细胞上清液TGF-B1含量 | 第21页 |
| ·ELISA操作步骤 | 第21页 |
| ·结果分析方法 | 第21页 |
| 4 统计学处理 | 第21-23页 |
| 实验结果 | 第23-28页 |
| 1 高糖及大黄酸干预对系膜细胞增殖的影响 | 第23-24页 |
| 2 各组细胞WNT、B-CATENIN MRNA表达的结果 | 第24-25页 |
| 3 各组细胞WNT、B-CATENIN蛋白表达结果 | 第25-27页 |
| 4 ELISA法检测细胞上清液TGF-B1含量 | 第27-28页 |
| 讨论 | 第28-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 攻读学位期间发表的文章 | 第37-38页 |
| 缩略词表 | 第38-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 附录 | 第41-43页 |
