| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-26页 |
| ·BT 毒蛋白基因的研究 | 第8-12页 |
| ·Bt 分子生物学方面的进展 | 第8-10页 |
| ·Bt 转基因植物的进展 | 第10-12页 |
| ·抗蚜基因的研究 | 第12-18页 |
| ·植物凝集素的分类 | 第13-14页 |
| ·植物外源凝集素的生物学功能 | 第14页 |
| ·植物外源凝集素的植物保护作用 | 第14-15页 |
| ·植物外源凝集素的抗蚜性 | 第15-17页 |
| ·双价抗虫基因载体的构建 | 第17页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| ·微束激光穿刺转化法 | 第18-23页 |
| ·用激光微束穿刺将外源基因导入的研究 | 第19-23页 |
| ·启动子的类型和优化 | 第23-26页 |
| ·组成型启动子 | 第23-24页 |
| ·组织或器官特异性启动子 | 第24-26页 |
| 第二章 双价抗虫基因的克隆和原核真核表达载体的构建 | 第26-46页 |
| ·试验材料和试验仪器 | 第26-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·酶与试剂 | 第26页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·主要溶液成分 | 第26-27页 |
| ·仪器设备 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-34页 |
| ·ARA 基因的克隆 | 第27-30页 |
| ·Bt 基因的获得 | 第30-31页 |
| ·ARA 基因的原核表达载体的构建及其表达 | 第31-33页 |
| ·Bt 基因的原核表达载体的构建及其表达 | 第33页 |
| ·具有ARA-Bt 双价基因的植物表达载体构建 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-45页 |
| ·ARA 基因的获得 | 第34-35页 |
| ·BT 基因的获得 | 第35-39页 |
| ·BT 基因和ARA 基因原核表达载体的构建和表达 | 第39-42页 |
| ·ARA-Bt 双价基因的植物表达载体构建 | 第42-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第三章 用农杆菌介导和激光微束穿刺法将双价抗虫基因植物表达载体转化油菜的研究 | 第46-59页 |
| ·试验材料仪器 | 第46-47页 |
| ·植物材料和菌株 | 第46页 |
| ·仪器和试剂 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·主要溶液成分 | 第46-47页 |
| ·试验方法 | 第47-52页 |
| ·农杆菌介导的ARA-Bt 双价抗虫基因植物表达载体对油菜的转化 | 第47-48页 |
| ·用激光微束穿刺法将ARA-Bt 双价抗虫基因植物表达载体导入油菜 | 第48-49页 |
| ·油菜基因组DNA 的提取,PCR 检测和Southern 杂交分析 | 第49-52页 |
| ·结果分析 | 第52-56页 |
| ·卡那霉素浓度对子叶柄分化的影响 | 第52页 |
| ·AgNO_3 对转化效率的影响 | 第52-53页 |
| ·农杆菌菌液浓度及感染时间对转化的影响 | 第53页 |
| ·油菜细胞质壁分离试验 | 第53页 |
| ·转基因油菜的抗性鉴定和分子生物学鉴定 | 第53-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| ·ARA-Bt 双价抗虫基因植物表达载体对油菜的转化 | 第56页 |
| ·优化农杆菌介导转化油菜的条件 | 第56-57页 |
| ·用激光微束穿刺将外源基因导入植物的优越性 | 第57-59页 |
| 第四章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
