| 提要 | 第1-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-31页 |
| 第一节 背景知识 | 第8-25页 |
| 一 肿瘤的基因治疗 | 第8-9页 |
| 二 自杀基因疗法 | 第9-14页 |
| 1. 自杀基因疗法的优缺点 | 第10-11页 |
| 2. 自杀基因系统的种类 | 第11页 |
| 3. HSV-TK/ GCV系统 | 第11-12页 |
| 4. Coli.NTR/CB1954 系统 | 第12-13页 |
| 5. 双自杀基因联合应用 | 第13-14页 |
| 三 靶向性自杀基因疗法 | 第14-20页 |
| 1. 肿瘤特异启动子 | 第14-17页 |
| 2. 端粒酶催化亚单位启动子 | 第17页 |
| 3. 端粒酶的结构与功能 | 第17-18页 |
| 4. 端粒酶与肿瘤 | 第18-19页 |
| 5. hTERT启动子的结构与功能 | 第19页 |
| 6. hTERT启动子与肿瘤治疗 | 第19-20页 |
| 四 肿瘤基因治疗的载体 | 第20-25页 |
| 1. 基因治疗的载体及分类 | 第20-21页 |
| 2. 腺病毒基因治疗载体 | 第21-25页 |
| 第二节 论文设计 | 第25-31页 |
| 一 靶细胞系的选择 | 第25-26页 |
| 二 论文目的 | 第26-29页 |
| 1. 头颈癌和乳腺癌的端粒酶及hTERT启动子活性 | 第27-28页 |
| 2. 自杀基因抑制头颈癌和乳腺癌细胞的生长 | 第28-29页 |
| 三 实验设计 | 第29-31页 |
| 1. 实验方案 | 第29页 |
| 2. 实验流程 | 第29-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-51页 |
| 第一节 实验材料 | 第31-35页 |
| 一 细胞、质粒、病毒和动物 | 第31页 |
| 二 主要试剂 | 第31-33页 |
| 三 抗体 | 第33页 |
| 四 主要仪器 | 第33-34页 |
| 五 常规试剂 | 第34-35页 |
| 第二节 实验方法 | 第35-51页 |
| 一 hTERT启动子在头颈癌及乳腺癌细胞中的特异性启动 | 第35-45页 |
| 1. 实验细胞株端粒酶活性检测 | 第35-37页 |
| 2. hTERT在真核载体中的特异性启动 | 第37-38页 |
| 3. hTERT在腺病毒载体中的特异性启动 | 第38-45页 |
| 二 HSV-TK和Coli.NTR联合抑制乳腺癌及头颈癌细胞 | 第45-51页 |
| 1. 含双自杀基因重组腺病毒的获得 | 第45-47页 |
| 2. 双自杀基因在体外肿瘤细胞中的联合作用 | 第47-49页 |
| 3. 双自杀基因在荷瘤裸鼠体内的联合作用 | 第49-51页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第51-82页 |
| 第一节 腺病毒载体的选择策略 | 第51-53页 |
| 第二节 端粒酶启动子的肿瘤特异性 | 第53-65页 |
| 一 端粒酶在正常细胞和肿瘤细胞中的表达 | 第53-56页 |
| 1. 端粒酶检测方法的选择 | 第53-54页 |
| 2. 端粒酶活性的检测 | 第54-56页 |
| 二 hTERT在真核载体中的特异性启动 | 第56-58页 |
| 1. 真核表达载体的选择 | 第56-57页 |
| 2. hTERT在真核表达载体中启动活性检测 | 第57-58页 |
| 三 hTERT在腺病毒载体中的特异性启动 | 第58-65页 |
| 1. 重组腺病毒Ad-CMV-TK-enh、Ad-hTERT-TK-enh的鉴定 | 第58-60页 |
| 2. Ad-hTERT-TK-enh在体外肿瘤细胞中TK蛋白的特异性表达 | 第60-62页 |
| 3. Ad-hTERT-TK-enh在荷瘤小鼠肿瘤中的特异性活性 | 第62-65页 |
| 第三节 HSV-TK和Coli.NTR联合抑制头颈癌及乳腺癌细胞生长 | 第65-82页 |
| 一 HSV-TK和Coli.NTR双自杀基因联合选择策略 | 第65页 |
| 二 携带双自杀基因的重组腺病毒的鉴定 | 第65-67页 |
| 三 双自杀基因在体外肿瘤细胞中的联合作用 | 第67-72页 |
| 四 双自杀基因及其前药对于ZR-75-30 细胞的凋亡作用 | 第72-75页 |
| 五 双自杀基因在荷瘤裸鼠体内的联合作用 | 第75-77页 |
| 六 荷瘤裸鼠肿瘤TNF-α检测 | 第77-78页 |
| 七 双自杀基因及其前药对于荷瘤裸鼠主要脏器的影响 | 第78-81页 |
| 八 双自杀基因联合使用的可能机制 | 第81-82页 |
| 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 中文摘要 | 第94-99页 |
| ABSTRACT | 第99-104页 |
| 作者简历 | 第104页 |
