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HIV-1和其它种属Vif蛋白抑制APOBEC3蛋白抗病毒活性的机制研究

提要第1-9页
第1章 前言第9-28页
   ·背景知识第9-25页
     ·HIV-1 病毒简介第9-10页
     ·Vif蛋白第10-13页
     ·APOBEC家族蛋白质第13-17页
     ·APOBEC3 蛋白的抗病毒作用第17-20页
     ·Vif抑制APOBEC3 抗病毒活性的机制第20-23页
     ·泛素化-蛋白酶降解体系第23-25页
   ·论文设计第25-28页
     ·论文目的和意义第25-26页
     ·实验设计第26-28页
第2章 材料与方法第28-40页
   ·材料、仪器和试剂第28-34页
     ·菌株第28页
     ·质粒构建第28-30页
     ·抗体第30-31页
     ·工具酶和化学试剂第31-32页
     ·引物合成和测序第32页
     ·细胞第32-33页
     ·主要仪器第33-34页
   ·实验方法第34-40页
     ·PCR第34-35页
     ·连接反应第35页
     ·质粒构建,细胞转化第35页
     ·质粒提取第35-36页
     ·质粒的大量提取第36页
     ·利用LIPOFECTAMINE 2000 进行转染第36页
     ·免疫沉淀(Immunoprecipitation)第36-37页
     ·MAGI 测定病毒感染性第37-38页
     ·收集细胞分泌病毒方法第38页
     ·Cycloheximide Pulse-chase第38页
     ·免疫印迹分析第38-40页
第3章 结果与讨论第40-84页
   ·HIV-1 和SIVagmTan Vif 抑制胞嘧啶脱氨酶APOBEC3 蛋白的保守和非保守性特征第40-60页
     ·SIVagmTanVif对人APOBEC3 蛋白抗SIVagm病毒活性的影响第40-43页
     ·SIVagmTanVif与人APOBEC3 蛋白的相互作用第43-45页
     ·SIVagmTanVif的BC-Box和HCCH motif对人A3C抗病毒活性的影响第45-50页
     ·Cu15 功能缺陷型突变体对SIVagmTan Vif抑制人A3C的影响第50-51页
     ·人A3C中被SIVagmTan Vif降解所必需区域的确定第51-55页
     ·人A3C上128 位氨基酸对Vif降解的影响第55-57页
     ·讨论第57-59页
     ·小结第59-60页
   ·BIV Vif抑制牛APOBEC3 胞嘧啶脱氨酶活性的作用机制第60-69页
     ·BIV Vif对牛bA3F抗病毒功能的影响第60-62页
     ·BIV Vif依赖于蛋白酶途径降解bA3F第62页
     ·BC-Box及Cullin-box对BIV Vif功能的影响第62-64页
     ·BIV Vif BC-Box及Cullin-box对抑制bA3F功能的影响第64-66页
     ·BIV Vif对其它种属APOBEC3 蛋白的影响第66-67页
     ·讨论第67-68页
     ·小结第68-69页
   ·HIV-1 Vif与APOBEC3 家族成员的作用位点的研究第69-84页
     ·HIV-1 Vif抑制不同的APOBEC3 胞嘧啶脱氨酶需要不同的决定簇第69页
     ·定义两个分别抑制单一活性中心A3C和双活性中心A3G的不同的HIV-1 Vif界面第69-71页
     ·抑制A3C表达和包装进病毒所必需的HIV-1 Vif功能区的确定第71-73页
     ·对结合A3C的HIV-1 Vif的重要功能区的研究第73-75页
     ·定义HIV-1 Vif中抑制A3DE所必需的功能区第75-77页
     ·A3F的C末端特性第77-80页
     ·讨论第80-82页
     ·小结第82-84页
结论第84-86页
参考文献第86-94页
致谢第94-95页
中文摘要第95-98页
Abstract第98-102页
作者简历第102-103页

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