提要 | 第1-9页 |
第1章 前言 | 第9-28页 |
·背景知识 | 第9-25页 |
·HIV-1 病毒简介 | 第9-10页 |
·Vif蛋白 | 第10-13页 |
·APOBEC家族蛋白质 | 第13-17页 |
·APOBEC3 蛋白的抗病毒作用 | 第17-20页 |
·Vif抑制APOBEC3 抗病毒活性的机制 | 第20-23页 |
·泛素化-蛋白酶降解体系 | 第23-25页 |
·论文设计 | 第25-28页 |
·论文目的和意义 | 第25-26页 |
·实验设计 | 第26-28页 |
第2章 材料与方法 | 第28-40页 |
·材料、仪器和试剂 | 第28-34页 |
·菌株 | 第28页 |
·质粒构建 | 第28-30页 |
·抗体 | 第30-31页 |
·工具酶和化学试剂 | 第31-32页 |
·引物合成和测序 | 第32页 |
·细胞 | 第32-33页 |
·主要仪器 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-40页 |
·PCR | 第34-35页 |
·连接反应 | 第35页 |
·质粒构建,细胞转化 | 第35页 |
·质粒提取 | 第35-36页 |
·质粒的大量提取 | 第36页 |
·利用LIPOFECTAMINE 2000 进行转染 | 第36页 |
·免疫沉淀(Immunoprecipitation) | 第36-37页 |
·MAGI 测定病毒感染性 | 第37-38页 |
·收集细胞分泌病毒方法 | 第38页 |
·Cycloheximide Pulse-chase | 第38页 |
·免疫印迹分析 | 第38-40页 |
第3章 结果与讨论 | 第40-84页 |
·HIV-1 和SIVagmTan Vif 抑制胞嘧啶脱氨酶APOBEC3 蛋白的保守和非保守性特征 | 第40-60页 |
·SIVagmTanVif对人APOBEC3 蛋白抗SIVagm病毒活性的影响 | 第40-43页 |
·SIVagmTanVif与人APOBEC3 蛋白的相互作用 | 第43-45页 |
·SIVagmTanVif的BC-Box和HCCH motif对人A3C抗病毒活性的影响 | 第45-50页 |
·Cu15 功能缺陷型突变体对SIVagmTan Vif抑制人A3C的影响 | 第50-51页 |
·人A3C中被SIVagmTan Vif降解所必需区域的确定 | 第51-55页 |
·人A3C上128 位氨基酸对Vif降解的影响 | 第55-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
·BIV Vif抑制牛APOBEC3 胞嘧啶脱氨酶活性的作用机制 | 第60-69页 |
·BIV Vif对牛bA3F抗病毒功能的影响 | 第60-62页 |
·BIV Vif依赖于蛋白酶途径降解bA3F | 第62页 |
·BC-Box及Cullin-box对BIV Vif功能的影响 | 第62-64页 |
·BIV Vif BC-Box及Cullin-box对抑制bA3F功能的影响 | 第64-66页 |
·BIV Vif对其它种属APOBEC3 蛋白的影响 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-68页 |
·小结 | 第68-69页 |
·HIV-1 Vif与APOBEC3 家族成员的作用位点的研究 | 第69-84页 |
·HIV-1 Vif抑制不同的APOBEC3 胞嘧啶脱氨酶需要不同的决定簇 | 第69页 |
·定义两个分别抑制单一活性中心A3C和双活性中心A3G的不同的HIV-1 Vif界面 | 第69-71页 |
·抑制A3C表达和包装进病毒所必需的HIV-1 Vif功能区的确定 | 第71-73页 |
·对结合A3C的HIV-1 Vif的重要功能区的研究 | 第73-75页 |
·定义HIV-1 Vif中抑制A3DE所必需的功能区 | 第75-77页 |
·A3F的C末端特性 | 第77-80页 |
·讨论 | 第80-82页 |
·小结 | 第82-84页 |
结论 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
中文摘要 | 第95-98页 |
Abstract | 第98-102页 |
作者简历 | 第102-103页 |