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烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶基因的克隆表达及生物信息学研究

内容提要第1-10页
前言第10-32页
 1. 烟曲霉及曲霉病概述第10-18页
   ·烟曲霉简介第10-11页
   ·曲霉病简介第11-12页
   ·烟曲霉的治病机制第12-13页
   ·曲霉病的临床表现第13-15页
   ·曲霉病的诊断第15-17页
     ·病理学检查第15页
     ·实验室检查第15-17页
       ·直接镜检第15-16页
       ·培养第16页
       ·病理组织切片第16页
       ·常规化验第16页
       ·血清学检查第16页
       ·分子生物学检查第16-17页
   ·曲霉病的治疗第17页
     ·药物治疗第17页
     ·外科治疗第17页
   ·曲霉病的预防第17-18页
 2. 谷胱甘肽转移酶概述第18-26页
   ·谷胱甘肽转移酶的的基本结构特征第18-19页
   ·谷胱甘肽转移酶家族的分类及命名第19-21页
   ·谷胱甘肽转移酶的催化机制第21-22页
   ·谷胱甘肽转移酶的生物学功能第22-23页
   ·不同物种中的谷胱甘肽转移酶第23-26页
     ·哺乳动物的谷胱甘肽转移酶第23-24页
     ·昆虫的谷胱甘肽转移酶第24页
     ·寄生虫的谷胱甘肽转移酶第24-25页
     ·植物的谷胱甘肽转移酶第25-26页
     ·真菌的谷胱甘肽转移酶第26页
 3. Zeta 类GST 概述第26-31页
   ·Zeta 类GST 结构特点第29-30页
   ·Zeta 类GST 功能介绍第30-31页
 4. 本研究的目的与意义第31-32页
第一部分 烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶基因的克隆、表达及鉴定第32-56页
 1. 实验材料第32-33页
   ·菌株及质粒第32页
     ·试剂第32页
   ·培养基第32-33页
   ·仪器第33页
 2. 实验方法第33-43页
   ·克隆载体的构建第33-39页
     ·A. fumigatus 总RNA 提取第33-34页
     ·反转录PCR第34-36页
     ·引物设计第36-37页
     ·目的片段的扩增第37页
     ·克隆载体的构建和测序第37-39页
       ·连接第37-38页
       ·大肠杆菌DH5α和BL21(DE3)感受态细胞的制备第38-39页
       ·转化第39页
   ·表达载体的构建第39-42页
     ·提质粒第39-40页
     ·双酶切第40-41页
     ·目的基因与表达载体的连接第41页
     ·连接产物转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞第41-42页
   ·目的基因的诱导表达及分离纯化第42-43页
     ·GST 基因的诱导表达第42页
     ·GST 基因表达产物的纯化第42-43页
   ·GST 蛋白的活性测定第43页
 3. 实验结果第43-54页
   ·A. fumigatus 总RNA 提取第43-44页
   ·目的片段的扩增第44页
   ·克隆载体的构建与鉴定第44-46页
   ·目的基因的序列测定第46-50页
   ·目的基因酶切以及表达载体构建第50-51页
   ·目的蛋白的表达第51-52页
   ·目的蛋白的纯化第52-53页
   ·GST 蛋白的活性测定第53-54页
 4. 讨论第54-55页
 5. 本章小结第55-56页
第二部分 烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶的生物信息学分析第56-72页
 1. 生物信息分析工具第56页
   ·主要软件第56页
   ·主要使用的网络资源第56页
 2. 分析方法第56-58页
   ·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶基因的生物信息学分析第56-57页
     ·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶基因在基因组上的定位第56页
     ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶基因的blast分析第56-57页
     ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶基因RNA的二级结构模拟第57页
   ·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶蛋白的一级结构研究第57-58页
     ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶的blast与结构域分析第57页
     ·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶的Alignment 分析第57页
     ·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶的系统进化分析第57-58页
   ·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶蛋白的二级结构预测第58页
   ·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶蛋白的三级结构预测第58页
 3. 结果与讨论第58-71页
   ·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶基因的分析以及染色体定位第58-60页
   ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶基因的blast分析第60-61页
   ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶基因RNA的二级结构模拟第61-62页
   ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶蛋白的blast分析第62-63页
   ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶蛋白的结构域分析第63页
   ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶的Alignment分析第63-65页
   ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶的系统进化分析第65-66页
   ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶蛋白的二级结构预测第66-67页
   ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶蛋白的三级结构模拟第67-70页
   ·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶活性位点预测第70-71页
 4 本章小结第71-72页
参考文献第72-80页
中文摘要第80-83页
Abstract第83-87页
致谢第87页

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