内容提要 | 第1-10页 |
前言 | 第10-32页 |
1. 烟曲霉及曲霉病概述 | 第10-18页 |
·烟曲霉简介 | 第10-11页 |
·曲霉病简介 | 第11-12页 |
·烟曲霉的治病机制 | 第12-13页 |
·曲霉病的临床表现 | 第13-15页 |
·曲霉病的诊断 | 第15-17页 |
·病理学检查 | 第15页 |
·实验室检查 | 第15-17页 |
·直接镜检 | 第15-16页 |
·培养 | 第16页 |
·病理组织切片 | 第16页 |
·常规化验 | 第16页 |
·血清学检查 | 第16页 |
·分子生物学检查 | 第16-17页 |
·曲霉病的治疗 | 第17页 |
·药物治疗 | 第17页 |
·外科治疗 | 第17页 |
·曲霉病的预防 | 第17-18页 |
2. 谷胱甘肽转移酶概述 | 第18-26页 |
·谷胱甘肽转移酶的的基本结构特征 | 第18-19页 |
·谷胱甘肽转移酶家族的分类及命名 | 第19-21页 |
·谷胱甘肽转移酶的催化机制 | 第21-22页 |
·谷胱甘肽转移酶的生物学功能 | 第22-23页 |
·不同物种中的谷胱甘肽转移酶 | 第23-26页 |
·哺乳动物的谷胱甘肽转移酶 | 第23-24页 |
·昆虫的谷胱甘肽转移酶 | 第24页 |
·寄生虫的谷胱甘肽转移酶 | 第24-25页 |
·植物的谷胱甘肽转移酶 | 第25-26页 |
·真菌的谷胱甘肽转移酶 | 第26页 |
3. Zeta 类GST 概述 | 第26-31页 |
·Zeta 类GST 结构特点 | 第29-30页 |
·Zeta 类GST 功能介绍 | 第30-31页 |
4. 本研究的目的与意义 | 第31-32页 |
第一部分 烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶基因的克隆、表达及鉴定 | 第32-56页 |
1. 实验材料 | 第32-33页 |
·菌株及质粒 | 第32页 |
·试剂 | 第32页 |
·培养基 | 第32-33页 |
·仪器 | 第33页 |
2. 实验方法 | 第33-43页 |
·克隆载体的构建 | 第33-39页 |
·A. fumigatus 总RNA 提取 | 第33-34页 |
·反转录PCR | 第34-36页 |
·引物设计 | 第36-37页 |
·目的片段的扩增 | 第37页 |
·克隆载体的构建和测序 | 第37-39页 |
·连接 | 第37-38页 |
·大肠杆菌DH5α和BL21(DE3)感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
·转化 | 第39页 |
·表达载体的构建 | 第39-42页 |
·提质粒 | 第39-40页 |
·双酶切 | 第40-41页 |
·目的基因与表达载体的连接 | 第41页 |
·连接产物转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞 | 第41-42页 |
·目的基因的诱导表达及分离纯化 | 第42-43页 |
·GST 基因的诱导表达 | 第42页 |
·GST 基因表达产物的纯化 | 第42-43页 |
·GST 蛋白的活性测定 | 第43页 |
3. 实验结果 | 第43-54页 |
·A. fumigatus 总RNA 提取 | 第43-44页 |
·目的片段的扩增 | 第44页 |
·克隆载体的构建与鉴定 | 第44-46页 |
·目的基因的序列测定 | 第46-50页 |
·目的基因酶切以及表达载体构建 | 第50-51页 |
·目的蛋白的表达 | 第51-52页 |
·目的蛋白的纯化 | 第52-53页 |
·GST 蛋白的活性测定 | 第53-54页 |
4. 讨论 | 第54-55页 |
5. 本章小结 | 第55-56页 |
第二部分 烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶的生物信息学分析 | 第56-72页 |
1. 生物信息分析工具 | 第56页 |
·主要软件 | 第56页 |
·主要使用的网络资源 | 第56页 |
2. 分析方法 | 第56-58页 |
·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶基因的生物信息学分析 | 第56-57页 |
·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶基因在基因组上的定位 | 第56页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶基因的blast分析 | 第56-57页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶基因RNA的二级结构模拟 | 第57页 |
·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶蛋白的一级结构研究 | 第57-58页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶的blast与结构域分析 | 第57页 |
·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶的Alignment 分析 | 第57页 |
·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶的系统进化分析 | 第57-58页 |
·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶蛋白的二级结构预测 | 第58页 |
·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶蛋白的三级结构预测 | 第58页 |
3. 结果与讨论 | 第58-71页 |
·烟曲霉Zeta 类谷胱甘肽转移酶基因的分析以及染色体定位 | 第58-60页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶基因的blast分析 | 第60-61页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶基因RNA的二级结构模拟 | 第61-62页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶蛋白的blast分析 | 第62-63页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶蛋白的结构域分析 | 第63页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶的Alignment分析 | 第63-65页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶的系统进化分析 | 第65-66页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶蛋白的二级结构预测 | 第66-67页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶蛋白的三级结构模拟 | 第67-70页 |
·烟曲霉Zeta类谷胱甘肽转移酶活性位点预测 | 第70-71页 |
4 本章小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
中文摘要 | 第80-83页 |
Abstract | 第83-87页 |
致谢 | 第87页 |