| 中文摘要 | 第1-20页 |
| 英文摘要 | 第20-25页 |
| 第一章 综述部分 | 第25-41页 |
| 1 微生物气溶胶概述 | 第25-28页 |
| ·微生物气溶胶的概念 | 第25页 |
| ·微生物气溶胶的特性 | 第25-28页 |
| ·来源的多相性 | 第25-27页 |
| ·种类的多样性 | 第27页 |
| ·活力的易变性 | 第27页 |
| ·扩散的三维性 | 第27页 |
| ·沉降微生物气溶胶的再生性 | 第27页 |
| ·感染的广泛性 | 第27-28页 |
| 2 微生物气溶胶的成分及所造成的危害 | 第28-30页 |
| ·畜禽舍中生物气溶胶的成分研究 | 第28页 |
| ·微生物气溶胶造成的危害 | 第28-30页 |
| ·微生物气溶胶对畜牧业的危害 | 第29-30页 |
| ·微生物气溶胶对人类健康的危害 | 第30页 |
| 3 微生物气溶胶的检测 | 第30-35页 |
| ·惯性撞击类 | 第31-33页 |
| ·自然沉降法 | 第31页 |
| ·射流撞击式采样器(裂隙式采样器) | 第31-33页 |
| ·离心撞击式采样器 | 第33页 |
| ·过滤阻留类 | 第33-34页 |
| ·静电沉着类 | 第34页 |
| ·温差迫降类 | 第34页 |
| ·生物类 | 第34-35页 |
| ·采样器的选择 | 第35页 |
| ·空气微生物采样发展趋势 | 第35页 |
| 4 微生物气溶胶学的应用 | 第35-36页 |
| ·应用于动物疫病防治方面 | 第35页 |
| ·应用于植物疫病防治方面 | 第35-36页 |
| 5 微生物气溶胶传播机制的研究 | 第36-37页 |
| 6 微生物气溶胶的国内外研究现状 | 第37-38页 |
| ·微生物气溶胶的国内研究现状 | 第37-38页 |
| ·微生物气溶胶的国外研究现状 | 第38页 |
| 7 研究的目的及意义 | 第38-40页 |
| 8 本论文的整体构思和体系结构 | 第40-41页 |
| 第二章 鸡、猪、牛、兔舍内气载需氧菌、大肠杆菌和肠球菌的含量及其向舍外环境的传播 | 第41-65页 |
| 1 引言 | 第41-43页 |
| ·Andersen-6级生物采样器概述 | 第41页 |
| ·工作原理 | 第41-42页 |
| ·本研究的历史背景 | 第42-43页 |
| ·研究的目的 | 第43页 |
| 2 材料与方法 | 第43-49页 |
| ·材料和仪器 | 第43-46页 |
| ·动物舍情况 | 第43-45页 |
| ·主要试剂、选择性培养基 | 第45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-49页 |
| ·实验设计 | 第46页 |
| ·样本的采集 | 第46-47页 |
| ·样本的处理 | 第47-49页 |
| ·数据统计 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-60页 |
| ·肠球菌PCR方法鉴定结果 | 第49-50页 |
| ·动物舍舍内气载需氧菌、大肠杆菌和肠球菌的含量 | 第50-55页 |
| ·鸡舍内气载需氧菌、大肠杆菌和肠球菌的含量 | 第50-51页 |
| ·猪舍内气载需氧菌、大肠杆菌和肠球菌的含量 | 第51-53页 |
| ·牛舍内气载需氧菌、大肠杆菌和肠球菌的含量 | 第53-54页 |
| ·兔舍内气载需氧菌、大肠杆菌和肠球菌的含量 | 第54-55页 |
| ·兔舍舍内气载革兰氏阴性菌菌群分析 | 第55-56页 |
| ·动物舍内外气载需氧菌含量分布 | 第56-59页 |
| ·鸡舍内外气载需氧菌含量分布 | 第56-57页 |
| ·猪舍内外气载需氧菌含量分布 | 第57-58页 |
| ·牛舍内外气载需氧菌含量分布 | 第58-59页 |
| ·气载需氧菌、大肠杆菌和肠球菌在Andersen各层级上的分布特征 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| ·大肠杆菌和肠球菌对动物造成的危害 | 第60-61页 |
| ·微生物气溶胶的含量与动物疾病的关系 | 第61-62页 |
| ·兔舍环境革兰氏阴性菌菌群分析 | 第62-63页 |
| ·微生物气溶胶向舍外环境的传播 | 第63页 |
| ·细菌气溶胶空气动力学分析 | 第63-64页 |
| ·存在的缺点 | 第64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 第三章 ERIC-PCR对鸡舍和牛舍环境中气载大肠杆菌气溶胶的发生及其向舍外环境传播的鉴定 | 第65-83页 |
| 1 引言 | 第65-70页 |
| ·ERIC-PCR技术 | 第65-70页 |
| ·肠杆菌基因间重复共有序列(ERIC)的发现与分布 | 第65页 |
| ·ERIC结构特征及功能 | 第65-66页 |
| ·ERIC-PCR的原理及特点 | 第66页 |
| ·ERIC-PCR产物形成规律 | 第66-67页 |
| ·ERIC-PCR技术的应用 | 第67-69页 |
| ·存在的问题和展望 | 第69-70页 |
| ·研究的目的及意义 | 第70页 |
| 2 材料与方法 | 第70-72页 |
| ·材料 | 第70-71页 |
| ·菌株来源 | 第70页 |
| ·主要试剂、培养基 | 第70页 |
| ·主要仪器设备 | 第70-71页 |
| ·方法 | 第71-72页 |
| ·细菌培养及模板DNA的提取 | 第71页 |
| ·PCR反应 | 第71-72页 |
| 3 结果 | 第72-80页 |
| ·鸡舍环境中分离到的大肠杆菌ERIC-PCR结果 | 第72-76页 |
| ·牛舍环境中分离到的大肠杆菌ERIC-PCR结果 | 第76-80页 |
| 4 讨论 | 第80-81页 |
| ·以大肠杆菌作为指示菌的依据 | 第80页 |
| ·鸡舍环境中大肠杆菌气溶胶向舍外环境的传播 | 第80-81页 |
| ·牛舍环境中大肠杆菌气溶胶向舍外环境的传播 | 第81页 |
| 5 结论 | 第81-83页 |
| 第四章 鸡舍环境大肠杆菌耐药性的检测及其向舍外环境传播的鉴定 | 第83-93页 |
| 1 引言 | 第83-85页 |
| ·我国鸡源性大肠杆菌的耐药现状 | 第83页 |
| ·常用药物耐药情况 | 第83页 |
| ·多重耐药与交叉耐药 | 第83-84页 |
| ·大肠杆菌耐药性的传播 | 第84页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第84-85页 |
| 2 材料与方法 | 第85-86页 |
| ·材料 | 第85页 |
| ·菌株来源 | 第85页 |
| ·主要试剂、培养基 | 第85页 |
| ·主要仪器设备 | 第85页 |
| ·方法 | 第85-86页 |
| ·实验设计 | 第85页 |
| ·药敏试验 | 第85-86页 |
| 3 结果与分析 | 第86-92页 |
| ·鸡舍A环境中大肠杆菌药敏试验结果 | 第86-87页 |
| ·鸡舍B环境中大肠杆菌药敏试验结果 | 第87-88页 |
| ·鸡舍C环境中大肠杆菌药敏试验结果 | 第88-89页 |
| ·鸡舍D环境中大肠杆菌药敏试验结果 | 第89-91页 |
| ·鸡舍E环境中大肠杆菌药敏试验结果 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92页 |
| ·鸡舍环境中大肠杆菌的耐药现状 | 第92页 |
| ·鸡舍内大肠杆菌的耐药性向舍外环境中的传播 | 第92页 |
| 5 结论 | 第92-93页 |
| 第五章 ERIC-PCR和REP-PCR对猪舍环境气载大肠杆菌气溶胶的发生及其向舍外环境传播的鉴定 | 第93-102页 |
| 1.引言 | 第93-94页 |
| ·REP-PCR方法 | 第93页 |
| ·本研究的目的 | 第93-94页 |
| 2 材料与方法 | 第94-95页 |
| ·材料 | 第94页 |
| ·菌株来源 | 第94页 |
| ·主要试剂、培养基 | 第94页 |
| ·主要仪器设备 | 第94页 |
| ·方法 | 第94-95页 |
| ·细菌培养及模板DNA的提取 | 第94页 |
| ·PCR反应 | 第94-95页 |
| 3 结果 | 第95-99页 |
| ·从舍内分离的大肠杆菌与粪便中分离的大肠杆菌的相似性 | 第95-96页 |
| ·从下风方向分离到的大肠杆菌与舍内或粪便中分离的大肠杆菌的相似性 | 第96-98页 |
| ·从上风方向分离到的大肠杆菌与舍内或粪便中分离的大肠杆菌的相似性 | 第98-99页 |
| 4 讨论 | 第99-101页 |
| ·细菌来源性的鉴定方法的选择 | 第99页 |
| ·以大肠杆菌作为指示菌的依据 | 第99-100页 |
| ·ERIC-PCR和REP-PCR两种方法研究动物舍环境微生物气溶胶传播的可行性 | 第100-101页 |
| 5 结论 | 第101-102页 |
| 第六章 鸡、猪、牛舍环境气载大肠杆菌主要毒力基因的检测及其向舍外环境传播的鉴定 | 第102-120页 |
| 1 引言 | 第102-111页 |
| ·肠毒素(enterotoxin) | 第102-109页 |
| ·ST | 第102-105页 |
| ·LT | 第105-109页 |
| ·类志贺氏菌毒素(Shiga toxin,Stx) | 第109-110页 |
| ·研究的目的 | 第110-111页 |
| 2 材料与方法 | 第111-112页 |
| ·材料 | 第111页 |
| ·菌株 | 第111页 |
| ·主要试剂、培养基 | 第111页 |
| ·主要仪器设备 | 第111页 |
| ·方法 | 第111-112页 |
| ·细菌培养及模板DNA的提取 | 第111页 |
| ·PCR反应 | 第111-112页 |
| 3 结果 | 第112-116页 |
| ·不同动物舍环境中大肠杆菌5种主要毒力基因的检测结果 | 第112-115页 |
| ·鸡舍环境中大肠杆菌5种主要毒力基因的检测结果 | 第113-114页 |
| ·猪舍环境中大肠杆菌5种主要毒力基因的检测结果 | 第114页 |
| ·牛舍环境中大肠杆菌5种主要毒力基因的检测结果 | 第114-115页 |
| ·动物舍内大肠杆菌5种主要毒力基因向舍外环境中的传播 | 第115-116页 |
| 4 讨论 | 第116-118页 |
| ·大肠杆菌肠毒素对动物的致病性 | 第116-117页 |
| ·大肠杆菌肠毒素鉴定方法的选择 | 第117-118页 |
| ·不同动物舍环境中大肠杆菌肠毒力基因的检测结果 | 第118页 |
| ·动物舍环境中气载大肠杆菌肠毒力基因向舍外环境的传播 | 第118页 |
| 5 结论 | 第118-120页 |
| 第七章 REP-PCR对动物舍内气载肠球菌向舍外环境传播的鉴定 | 第120-138页 |
| 1 引言 | 第120-121页 |
| ·以肠球菌为指示菌来研究微生物气溶胶传播的依据 | 第120-121页 |
| ·存在于正常动物或人的肠道中 | 第120页 |
| ·指示菌要与致病菌有相似的存活性 | 第120页 |
| ·指示菌应与空气中致病菌含量相仿 | 第120-121页 |
| ·指示菌在空气中不应广泛存在或增值 | 第121页 |
| ·理想指示菌的选择 | 第121页 |
| ·研究的目的 | 第121页 |
| 2 材料与方法 | 第121-123页 |
| ·材料 | 第121-122页 |
| ·菌株来源 | 第121-122页 |
| ·主要试剂、培养基 | 第122页 |
| ·主要仪器设备 | 第122页 |
| ·方法 | 第122-123页 |
| ·细菌培养及模板DNA的提取 | 第122页 |
| ·PCR反应 | 第122-123页 |
| 3 结果与分析 | 第123-135页 |
| ·鸡舍内气载肠球菌向舍外环境的传播 | 第123-127页 |
| ·猪舍内气载肠球菌向舍外环境的传播 | 第127-130页 |
| ·牛舍内气载肠球菌向舍外环境的传播 | 第130-135页 |
| 4 讨论 | 第135-136页 |
| ·肠球菌对动物的危害 | 第135页 |
| ·肠球菌对人的危害 | 第135-136页 |
| ·动物舍内气载肠球菌向舍外环境的传播 | 第136页 |
| 5 结论 | 第136-138页 |
| 第八章 畜禽舍环境气载肠球菌主要耐药基因的检测及其向舍外环境传播的鉴定 | 第138-162页 |
| 1 引言 | 第138-150页 |
| ·细菌耐药分类 | 第138页 |
| ·细菌的耐药机理 | 第138-139页 |
| ·基因机理 | 第138页 |
| ·获得性耐药的生化机理 | 第138-139页 |
| ·肠球菌属的生物学特性和分类 | 第139页 |
| ·肠球菌属的生物学特性 | 第139页 |
| ·肠球菌属的分类 | 第139页 |
| ·肠球菌耐药现状 | 第139-140页 |
| ·肠球菌的耐药机制 | 第140-149页 |
| ·肠球菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制 | 第141-143页 |
| ·肠球菌对氨基糖甙类抗生素耐药机制 | 第143-147页 |
| ·肠球菌对四环素类的耐药机制 | 第147页 |
| ·肠球菌对糖肽类抗生素的耐药机制 | 第147-149页 |
| ·总结 | 第149-150页 |
| ·研究的目的及意义 | 第150页 |
| 2 材料与方法 | 第150-153页 |
| ·材料 | 第150页 |
| ·菌株 | 第150页 |
| ·主要试剂、培养基 | 第150页 |
| ·主要仪器设备 | 第150页 |
| ·方法 | 第150-153页 |
| ·细菌培养及模板DNA的提取 | 第150页 |
| ·PCR反应 | 第150-153页 |
| 3 结果 | 第153-159页 |
| ·β-内酰胺类抗生素耐药基因TEM检测结果 | 第153-154页 |
| ·四环素类抗生素耐药基因TetM检测结果 | 第154-155页 |
| ·万古霉素耐药基因vanA和vanB检测结果 | 第155-156页 |
| ·氨基糖苷修饰酶(AME)基因检测结果 | 第156-158页 |
| ·耐药肠球菌在动物舍舍内及其周围环境中的传播 | 第158-159页 |
| 4 讨论 | 第159-161页 |
| ·养殖环境中肠球菌的耐药现状 | 第159-160页 |
| ·耐药肠球菌在动物舍舍内及其周围环境中的传播 | 第160-161页 |
| 5 结论 | 第161-162页 |
| 第九章 肠球菌vanA耐药基因的克隆、测序及同源性分析 | 第162-168页 |
| 1 引言 | 第162页 |
| 2 材料与方法 | 第162-166页 |
| ·菌株 | 第162页 |
| ·引物 | 第162页 |
| ·PCR产物的克隆、测序分析 | 第162-166页 |
| ·试剂 | 第162页 |
| ·培养基、相关试剂及配制 | 第162-163页 |
| ·主要溶液 | 第163页 |
| ·其他主要试剂 | 第163页 |
| ·主要仪器设备 | 第163页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第163-164页 |
| ·PCR产物与PMD-18T载体的连接 | 第164页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第164页 |
| ·连接产物的转化 | 第164-165页 |
| ·转化菌的筛选与鉴定 | 第165-166页 |
| 3 结果 | 第166-167页 |
| ·耐药基因vanA的扩增 | 第166-167页 |
| ·vanA基因的核苷酸序列分析 | 第167页 |
| 4 讨论 | 第167-168页 |
| 本论文的创新之处 | 第168-169页 |
| 参考文献 | 第169-190页 |
| 附录1 采样仪器及部分采样动物舍 | 第190-193页 |
| 附录2 两种指示菌—大肠杆菌和肠球菌 | 第193-194页 |
| 致谢 | 第194-195页 |
| 博士在读期间发表学术论文 | 第195页 |
