| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-42页 |
| 1. 基因文库相关研究 | 第16-20页 |
| ·基因组文库 | 第16页 |
| ·cDNA文库 | 第16-20页 |
| 2. 基于cDNA文库的EST序列分析研究 | 第20-29页 |
| ·EST技术的原理 | 第20-21页 |
| ·EST技术的形成与发展 | 第21-22页 |
| ·EST技术的应用 | 第22-25页 |
| ·生物信息学在EST研究中的应用 | 第25-29页 |
| 3. 赤霉素生物合成研究进展 | 第29-39页 |
| ·赤霉素生物功能 | 第29-30页 |
| ·赤霉素的合成代谢路径 | 第30-32页 |
| ·赤霉素生物合成途径中的关键酶 | 第32-35页 |
| ·赤霉素生物合成与代谢的调控 | 第35-39页 |
| 4 菊花基因克隆研究进展 | 第39-42页 |
| ·同源克隆法 | 第39页 |
| ·DNA文库筛选法 | 第39-40页 |
| ·抑制性差减杂交法 | 第40页 |
| ·mRNA差异显示技术 | 第40-41页 |
| ·EST序列分析法 | 第41-42页 |
| 第二章 菊花花器官cDNA文库构建EST序列分析 | 第42-70页 |
| 第一节 菊花花器官cDNA文库构建 | 第42-56页 |
| 1 材料与方法 | 第43-52页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·试剂与仪器 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-54页 |
| ·RNA提取 | 第52页 |
| ·mRNA分离 | 第52页 |
| ·mRNA反转录成双链cDNA | 第52-53页 |
| ·菊花花器官cDNA文库的滴度检测 | 第53-54页 |
| ·大肠杆菌质粒文库PCR检测 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 第二节 菊花花器官cDNA文库测序及EST序列分析 | 第56-70页 |
| 1 材料与方法 | 第57-59页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·cDNA克隆的大规模EST测序 | 第57页 |
| ·ESTs序列分析 | 第57-58页 |
| ·文库特异基因检测 | 第58-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-67页 |
| ·cDNA序列测定及EST序列获得 | 第59-60页 |
| ·EST序列同源性比对结果 | 第60-61页 |
| ·菊花EST序列功能注释与分类 | 第61-62页 |
| ·Unigene的COG分类 | 第62-63页 |
| ·Unigene中的转录因子分析 | 第63-64页 |
| ·Unigene中的花器官发育相关基因分析 | 第64-65页 |
| ·Unigene中的花色素合成代谢相关基因分析 | 第65-66页 |
| ·花器官优势表达基因在不同组织中的表达分析 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| 第三章 菊花GA20-氧化酶基因的克隆与表达分析 | 第70-93页 |
| 第一节 菊花GA20-氧化酶基因的克隆及序列分析 | 第70-84页 |
| 1 材料与方法 | 第70-75页 |
| ·植物材料 | 第70页 |
| ·试剂与仪器 | 第70-72页 |
| ·实验方法 | 第72-75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-82页 |
| ·RNA提取质量与反转录效果检测 | 第75页 |
| ·目的中间片段序列测定 | 第75-76页 |
| ·RACE-PCR结果 | 第76-77页 |
| ·菊花GA20-氧化酶基因全长序列的获得 | 第77页 |
| ·氨基酸序列同源性比对 | 第77-78页 |
| ·菊花GA20-氧化酶氨基酸序列系统进化树构建 | 第78-80页 |
| ·Southern杂交 | 第80-82页 |
| 3 讨论 | 第82-84页 |
| 第二节 菊花GA20-氧化酶基因的表达分析 | 第84-93页 |
| 1 材料与方法 | 第84-86页 |
| ·植物材料 | 第84页 |
| ·试剂与仪器 | 第84页 |
| ·实验方法 | 第84-86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-90页 |
| ·DgGA20ox在不同组织器官中的表达 | 第86页 |
| ·长日照条件下一天内DgGA20ox表达动态 | 第86-88页 |
| ·外源激素处理对DgGA20ox表达的影响 | 第88-90页 |
| 3 讨论 | 第90-93页 |
| 第四章 菊花GA20-氧化酶基因遗传转化研究 | 第93-108页 |
| 1 材料与方法 | 第93-98页 |
| ·植物材料 | 第93页 |
| ·试剂与仪器 | 第93-94页 |
| ·实验方法 | 第94-98页 |
| 2 结果与分析 | 第98-105页 |
| ·菊花DgGA20ox基因正义表达载体的构建 | 第98-101页 |
| ·菊花DgGA20ox基因正义表达载体转基因植株的获得及分子鉴定 | 第101-102页 |
| ·转基因植株表型观察 | 第102-104页 |
| ·菊花GA20-氧化酶基因在转基因植株不同器官中的表达分析 | 第104页 |
| ·转基因植株内源赤霉素GA_3含量的测定和分析 | 第104-105页 |
| 3 讨论 | 第105-108页 |
| 全文讨论 | 第108-112页 |
| 1. 菊花花器官cDNA文库构建与EST序列分析 | 第108页 |
| 2. 菊花花器官cDNA文库中与花器官发育相关的转录因子 | 第108-109页 |
| 3. 菊花花色素合成相关基因 | 第109页 |
| 4. 通过EST序列信息克隆新基因 | 第109-110页 |
| 5. 菊花GA 20-氧化酶基因(DgAG20ox)的表达特性 | 第110页 |
| 6. 转基因的共抑制效应 | 第110-112页 |
| 全文结论及创新之处 | 第112-114页 |
| 全文结论 | 第112-113页 |
| 创新之处 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-134页 |
| 附录 | 第134-152页 |
| 攻读学位期间发表的论文及获奖情况 | 第152-154页 |
| 致谢 | 第154页 |
