| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-26页 |
| 1 研究背景 | 第12-24页 |
| 2 本研究工作的总体思路、主要研究方法和预期结果 | 第24-26页 |
| 第一章 幽门螺杆菌DNA旋转酶gyrB基因的克隆与表达 | 第26-58页 |
| 1 材料与方法 | 第26-44页 |
| ·材料 | 第26-33页 |
| ·方法 | 第33-44页 |
| ·目的基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·构建重组质粒pMD18T-HPgyrB | 第34-37页 |
| ·构建重组质粒pGEM-HPgyrB | 第37-38页 |
| ·构建重组质粒pBluescript-HPgyrB | 第38-40页 |
| ·HPgyrB基因原核表达质粒的构建 | 第40-42页 |
| ·原核表达质粒pRSETB-HPgyrB在大肠杆菌中的诱导表达 | 第42-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-52页 |
| ·HPgyrB基因的PCR扩增结果 | 第44-45页 |
| ·重组质粒pMD18T-HPgyrB的鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·构建重组质粒pGEM-HPgyrB结果 | 第46-48页 |
| ·构建重组质粒pBluescript-HPgyrB结果 | 第48-49页 |
| ·HPgyrB基因原核表达质粒pRSETB-HPgyrB构建结果 | 第49-51页 |
| ·HPgyrB基因在大肠杆菌中的诱导表达及融合蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-57页 |
| ·构建克隆质粒策略 | 第52-53页 |
| ·构建表达质粒策略 | 第53-54页 |
| ·测序结果的分析 | 第54-55页 |
| ·大肠杆菌的诱导表达及融合蛋白的纯化 | 第55-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 第二章 大肠杆菌DNA旋转酶gyrA和gyrB基因的克隆与表达 | 第58-77页 |
| 1 材料与方法 | 第58-66页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-66页 |
| ·目的基因的克隆 | 第58-60页 |
| ·构建重组质粒pGEM-ECgyrA和pGEM-ECgyrB | 第60-61页 |
| ·E.coli DH5a gyrA、gyrB基因原核表达质粒的构建 | 第61-64页 |
| ·原核表达质粒pRSETB-ECgyrA在大肠杆菌中的诱导表达 | 第64-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-74页 |
| ·E.coli DH5a gyrA和gyrB基因的PCR扩增结果 | 第66-67页 |
| ·构建重组质粒pGEM-ECgyrA和pGEM-ECgyrB结果 | 第67-70页 |
| ·E.coli DH5a gyrA、gyrB基因原核表达质粒的构建结果 | 第70-73页 |
| ·E.coli DH5a gyrA基因在大肠杆菌中的诱导表达及融合蛋白的纯化 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| 4 结论 | 第76-77页 |
| 结语 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 附录 | 第84-117页 |
| 附录I 相关试剂盒使用说明 | 第85-89页 |
| 附录I-1 赛百盛硅胶膜型TMPCR产物纯化试剂盒使用说明 | 第85-87页 |
| 附录I-2 UNIQ-10柱式胶回收试剂盒使用说明 | 第87-89页 |
| 附录II 序列比对和BLAST结果 | 第89-111页 |
| 附录II-1 pMD18T-HPgyrB插入片段两末端测序结果与HP J99 gyrB的序列比对 | 第89-93页 |
| 附录II-2 pGEM-HPgyrB插入片段中gyrB基因核苷酸序列的BLASTN结果 | 第93-96页 |
| 附录II-3 pRSETB-HPgyrB插入片段中gyrB基因氨基酸序列的BLASTP结果 | 第96-98页 |
| 附录II-4 pGEM-ECgyrA插入片段中gyrA基因核苷酸序列的BLASTN结果 | 第98-102页 |
| 附录II-5 pRSETB-ECgyrA插入片段中gyrA基因氨基酸序列的BLASTP结果 | 第102-106页 |
| 附录II-6 pGEM-ECgyrB插入片段中gyrB基因核苷酸序列的BLASTN结果 | 第106-109页 |
| 附录II-7 pRSETB-ECgyrB插入片段中gyrB基因氨基酸序列的BLASTP结果 | 第109-111页 |
| 附录III 图表清单 | 第111-114页 |
| 附录IV 本研究工作中涉及的菌株和质粒 | 第114-116页 |
| 附录V 英文缩略词 | 第116-117页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
