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动物狂犬病基因工程亚单位疫苗研究

摘要第1-4页
Summary第4-7页
缩写词索引第7-13页
前言第13-16页
第一篇 文献综述第16-36页
 第一章 狂犬病病病毒分子生物学研究进展第16-25页
  1 病毒的一般特征第16-19页
     ·形态和结构第16-18页
   ·病毒的化学组成第18页
   ·病毒的生物学特性第18-19页
  2 病毒的基因组结构及编码的蛋白第19-25页
   ·病毒的基因组结构第19-20页
   ·病毒基因组编码的蛋白第20-25页
     ·N 蛋白第20-21页
     ·P 蛋白(磷蛋白)第21页
     ·M 蛋白第21-22页
       ·G 蛋白第22-24页
       ·L 蛋白第24-25页
 第二章 狂犬病疫苗研究进展第25-36页
  1. 神经组织疫苗第26页
  2. 鸡胚弱毒疫苗第26页
  3. 灭活细胞培养疫苗第26页
  4. 减毒活疫苗第26-27页
  5. 反向遗传技术研制的狂犬病减毒活疫苗第27-29页
  6. 基因工程重组活载体疫苗第29-31页
  7. DNA 疫苗第31-32页
  8. 基因工程亚单位疫苗第32-36页
第二篇 研究报告第36-91页
 第一章 狂犬病毒 N 蛋白的表达及其产物免疫原性分析第36-57页
   ·材料第38-39页
     ·病毒、细胞、菌株与家蚕品种第38-39页
     ·酶及各类试剂第39页
     ·主要仪器与设备第39页
     ·实验动物第39页
   ·方法第39-48页
     ·重组杆状病毒转移载体的构建第39-40页
     ·Bm-N 细胞的复苏、传代及病毒繁殖第40页
     ·Bm-BacPAK6 基因组DNA 的制备第40-41页
     ·Bm-BacPAK6 基因组DNA 的线性化第41页
     ·用脂质体共转染第41-42页
     ·重组病毒的筛选、纯化和扩增第42页
     ·N 基因在 Bm-N 细胞内表达第42-43页
     ·N 基因在家蚕中的表达第43-44页
     ·N 蛋白Westernblotting 检测第44-45页
     ·疫苗制备第45页
     ·疫苗安全试验第45-46页
     ·疫苗免疫试验第46页
     ·抗体测定第46-47页
     ·病毒攻击保护实验第47-48页
   ·结果第48-55页
     ·重组病毒rBmNPV(N)的构建第48-49页
     ·N 基因在 Bm-N 细胞中表达结果第49页
     ·N 基因在蚕体中的表达结果第49-50页
     ·目的蛋白的 Western blot 分析结果第50-51页
     ·疫苗安全试验结果第51-53页
     ·血清中抗 RV 特异性抗体第53-54页
     ·攻毒保护实验第54-55页
   ·讨论第55-57页
 第二章 狂犬病毒 G 蛋白的表达及其产物免疫原性分析第57-73页
   ·主要材料第59页
   ·方法第59-63页
       ·重组杆状病毒转移载体的构建第59-60页
       ·共转染和重组病毒的筛选第60页
       ·G 基因在 Bm-N 细胞内表达第60页
       ·G 基因在家蚕中的表达第60-61页
       ·G 蛋白 Westernblotting 检测第61页
       ·疫苗制备第61页
       ·疫苗安全试验第61页
       ·疫苗免疫效力试验第61-62页
       ·ELISA 测定抗体第62页
       ·病毒攻击保护实验第62-63页
   ·结果第63-70页
     ·含有G 基因的重组杆状病毒转移载体的构建第63-64页
     ·G 基因在 Bm-N 细胞中表达结果第64页
     ·G 基因在蚕体中的表达结果第64-65页
     ·目的蛋白的 Western blot 分析结果第65-66页
     ·疫苗安全试验结果第66-68页
     ·血清中抗 RV 特异性抗体第68-69页
     ·攻毒保护结果第69-70页
   ·讨论第70-73页
 第三章 狂犬病毒 G 和N 蛋白的共表达及其产物免疫原性分析第73-91页
   ·主要材料第75页
   ·方法第75-80页
     ·重组杆状病毒转移载体的构建第75-76页
     ·共转染和重组病毒的筛选、纯化和扩增第76页
     ·筛选高表达克隆毒株第76-77页
     ·G 和 N 基因在家蚕蛹体中表达第77页
     ·表达时相测定第77页
     ·G/N 双表达蛋白 Westernblotting 检测第77页
     ·疫苗制备第77-78页
     ·疫苗安全试验第78页
     ·疫苗免疫保护试验第78-79页
     ·ELISA 测定抗体:第79页
     ·病毒攻击保护实验第79-80页
   ·结果第80-88页
     ·重组杆状病毒转移载体的构建第80-81页
     ·重组杆状病毒的筛选第81页
     ·G、N 蛋白在蚕体中的表达结果第81-82页
     ·表达时相的测定第82-83页
     ·G/N 目的蛋白的 Western blotting 分析结果第83-84页
     ·疫苗安全试验结果第84-86页
     ·血清中抗 RV 特异性抗体第86-87页
     ·攻毒保护结果第87-88页
   ·讨论第88-91页
全文结论第91-92页
参考文献第92-106页
致谢第106-107页
作者简介第107-108页
攻读博士期间发表的学术论文及其他成果第108-109页
导师简介第109-110页

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