| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-37页 |
| ·猪2型链球菌的概述 | 第12-23页 |
| ·病原学 | 第12-13页 |
| ·流行病学 | 第13-15页 |
| ·临床症状 | 第15-16页 |
| ·解剖病理变化 | 第16-17页 |
| ·致病机理 | 第17-19页 |
| ·诊断 | 第19-21页 |
| ·防治 | 第21-23页 |
| ·猪2型链球菌的毒力因子或毒力相关因子研究进展 | 第23-26页 |
| ·体内诱导抗原技术 | 第26-37页 |
| ·细菌毒力基因检测技术概述 | 第26-29页 |
| ·体内诱导抗原技术原理 | 第29-31页 |
| ·IVIAT的优势 | 第31-32页 |
| ·体内诱导抗原技术的应用 | 第32-37页 |
| 第二章 猪2型链球菌体内诱导抗原基因的筛选鉴定 | 第37-61页 |
| ·引言 | 第37-38页 |
| ·材料和方法 | 第38-50页 |
| ·菌株及培养条件 | 第38页 |
| ·pET28系列表达载体 | 第38-39页 |
| ·主要试剂与材料 | 第39-40页 |
| ·培养基与抗生素配制 | 第40页 |
| ·主要缓冲液 | 第40-43页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·猪2型链球菌康复血清与高免血清的制备 | 第43-44页 |
| ·CTAB法制备基因组DNA | 第44页 |
| ·基因组文库的构建 | 第44-47页 |
| ·探针的制备 | 第47页 |
| ·表达文库的筛选 | 第47-48页 |
| ·筛选出体内诱导抗原的体内表达的验证 | 第48-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-58页 |
| ·基因组文库的构建 | 第50-54页 |
| ·文库筛选探针的制备 | 第54页 |
| ·基因组文库的筛选 | 第54-56页 |
| ·筛选出的基因mRNA水平的验证 | 第56-57页 |
| ·体内诱导表达抗原SspA点杂交与抗体检测 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| ·体内诱导抗原技术发掘感染过程中的相关蛋白 | 第58-59页 |
| ·体内诱导抗原的蛋白的特性分析 | 第59-60页 |
| ·体内诱导抗原的发掘为细菌的致病研究提供一些依据 | 第60-61页 |
| 第三章 猪2型链球菌枯草菌素样丝氨酸蛋白酶(Subtilisin-like serine protease ,SspA)的鉴定和致病功能研究 | 第61-88页 |
| ·前言 | 第61页 |
| ·材料与方法 | 第61-72页 |
| ·菌株、质粒、细胞及培养条件 | 第61-62页 |
| ·主要试剂及药品 | 第62-63页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第63页 |
| ·缓冲液 | 第63-66页 |
| ·引物 | 第66页 |
| ·实验动物 | 第66页 |
| ·细菌表面免疫荧光试验 | 第66-67页 |
| ·使用荧光定量PCR验证sspA基因感染猪体内的表达 | 第67-68页 |
| ·冻干猪链球菌菌株的复苏与培养 | 第68页 |
| ·猪2型链球菌基因组的提取 | 第68-69页 |
| ·温敏性重组质粒的构建 | 第69页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第69页 |
| ·猪2型链球菌的电转化 | 第69-70页 |
| ·猪链球菌sspA基因缺失菌株sspA~-的筛选 | 第70页 |
| ·猪链球菌sspA基因缺失突变株的Southern杂交验证 | 第70-71页 |
| ·猪链球菌sspA基因缺失突变株的生物学特性研究 | 第71-72页 |
| ·回复菌株的构建 | 第72页 |
| ·sspA基因缺失突变株对本动物猪的致病力实验 | 第72页 |
| ·统计分析 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-86页 |
| ·sspA基因的特征 | 第72-75页 |
| ·SspA基因缺失突变株、及其互补菌株的构建 | 第75-80页 |
| ·SspA的缺失对S. suis 2基本生物学特征的影响 | 第80-82页 |
| ·sspA基因在感染猪体内高度上调表达 | 第82页 |
| ·sspA~-突变株对仔猪致病力的研究 | 第82-86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| ·SspA蛋白的特性分析 | 第86页 |
| ·SspA参与猪链球菌的致病作用 | 第86-87页 |
| ·SspA不是必需的毒力因子 | 第87页 |
| ·SspA蛋白可能参与的致病机制 | 第87-88页 |
| 第四章 结论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 附录 | 第104页 |
