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酶法水解啤酒酵母RNA制备5-核苷酸工艺的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-26页
   ·核苷酸的结构与部分性质第12-14页
   ·核苷酸的生产方法第14-15页
     ·化学法合成法第14页
     ·酶解法第14-15页
     ·发酵法第15页
   ·酶解法生产核苷酸技术的研究现状第15-18页
     ·RNA 制备第15-16页
     ·5’-磷酸二酯酶第16-18页
     ·核酸酶解工艺第18页
   ·核苷酸的分离、精制第18-20页
   ·核苷酸类物质的应用第20-24页
     ·食品工业第20-21页
     ·医药工业第21-23页
     ·农业第23页
     ·其他行业第23-24页
   ·本课题的立题背景及研究意义第24-25页
   ·本课题的主要研究内容第25-26页
     ·麦芽根中5’-磷酸二酯酶提取方案的研究第25页
     ·5’-磷酸二酯酶性质的初步探讨第25页
     ·RNA 酶解工艺的研究第25页
     ·核苷酸的初步分离第25-26页
2 材料与方法第26-39页
   ·实验材料第26-28页
     ·主要材料和试剂第26-27页
     ·主要仪器设备第27-28页
   ·实验方法第28-39页
     ·麦芽根中5’-磷酸二酯酶的提取第28页
     ·RNA 的酶解第28页
     ·核苷酸的初步分离第28-29页
     ·5’-磷酸二酯酶酶活的测定第29-30页
     ·蛋白质的测定第30-32页
     ·核酸及核苷酸的测定第32-33页
     ·5’-单核苷酸的测定第33-37页
     ·RNA 酶解5’-核苷酸转化率的计算第37页
     ·5’-单核苷酸的定性鉴定第37-39页
3 结果与分析第39-66页
   ·麦芽根中5’-磷酸二酯酶提取工艺的研究第39-46页
     ·麦芽根的粉碎对酶提取的影响第39-40页
     ·时间对5’-磷酸二酯酶活力影响第40页
     ·pH 值对5’-磷酸二酯酶活力的影响第40-41页
     ·缓冲溶液对5’-磷酸二酯酶提取的影响第41-42页
     ·加水比例对5’-磷酸二酯酶活力的影响第42页
     ·酶提取条件的正交实验第42-44页
     ·酶提取较优方案的验证第44页
     ·无机盐对5’-磷酸二酯酶提取的影响第44-46页
   ·麦芽根中 5’-磷酸二酯酶酶学性质的研究第46-50页
     ·5’-磷酸二酯酶的热稳定性第46-47页
     ·5’-磷酸二酯酶的pH 稳定性第47-48页
     ·粗酶液的盐析处理第48-49页
     ·酶液的存储稳定性第49-50页
   ·酶液预处理第50-53页
     ·预热温度对酶解反应的影响第50-51页
     ·预处理时间对酶解反应的影响第51页
     ·添加锌离子对酶解反应的影响第51-53页
   ·磷酸二酯酶水解RNA 工艺的研究第53-58页
     ·5’-核苷酸转化率的表示方法第53页
     ·底物浓度对酶解反应的影响第53-54页
     ·酶用量对酶解反应的影响第54-55页
     ·反应时间对酶解反应的影响第55页
     ·反应温度对酶解反应的影响第55-56页
     ·pH 值对酶解反应的影响第56-57页
     ·酶解产物的鉴定第57-58页
   ·5’-核苷酸阳离子交换树脂的初步分离第58-66页
     ·阳离子交换树脂的选型第59页
     ·洗脱流速对流出曲线的影响第59-61页
     ·上样pH 值对洗脱曲线的影响第61-62页
     ·柱的高径比对洗脱曲线的影响第62-64页
     ·分离产物的鉴定第64-66页
4 讨论第66-68页
   ·5’-磷酸二酯酶测定方法的讨论第66页
   ·关于5’-磷酸二酯酶稳定性的讨论第66页
   ·酶解工艺中酶用量的讨论第66-68页
5 结论第68-70页
   ·研究确定了麦芽根5’-磷酸二酯酶的较优提取方案第68页
   ·对5’-磷酸二酯酶的性质进行了初步探讨第68页
   ·确定了 5’-磷酸二酯酶水解 RNA 的工艺参数第68-69页
   ·初步探讨了树脂柱层析分离单核苷酸工艺第69页
   ·进一步研究方向第69-70页
     ·5’-磷酸二酯酶的深入研究第69页
     ·酶解工艺的进一步探讨第69页
     ·核苷酸分离技术的研究第69页
     ·核苷酸的浓缩、纯化工艺的研究第69-70页
参考文献第70-80页
致谢第80-81页
攻读硕士学位期间发表的论文第81页

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