嗜热内切纤维素酶及相关纤维素结合结构域的功能研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-22页 |
| ·纤维素与生物质能源 | 第11-14页 |
| ·纤维素酶 | 第14-20页 |
| ·纤维素酶分类、作用方式和分子结构 | 第14-15页 |
| ·CBM 结构域的分类及作用 | 第15-16页 |
| ·纤维素降解过程及其催化机理 | 第16-18页 |
| ·典型的纤维素酶系统 | 第18页 |
| ·糖苷水解酶第九家族纤维素酶 | 第18-19页 |
| ·嗜热纤维素酶的来源及应用 | 第19-20页 |
| ·立题依据和实验设计 | 第20-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-37页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22-28页 |
| ·菌株与质粒 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·抗生素 | 第24-25页 |
| ·常规试剂、溶液和缓冲液 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-28页 |
| ·实验方法 | 第28-37页 |
| ·纤维素酶基因的克隆与表达 | 第28-32页 |
| ·重组纤维素酶的纯化 | 第32-33页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第33页 |
| ·DNS 法测定纤维素酶活力 | 第33-34页 |
| ·最适温度、最适 pH 以及热稳定性测定 | 第34页 |
| ·酶底物特异性测定 | 第34页 |
| ·HPLC 法测定产物谱 | 第34-35页 |
| ·HPLC 法测定杂合酶对寡糖水解能力 | 第35页 |
| ·杂合酶渐进性测定 | 第35页 |
| ·杂合酶对 Avicel 吸附性测定 | 第35-36页 |
| ·协同性测定 | 第36页 |
| ·协同反应产物的薄层层析 | 第36-37页 |
| 第3章 杂合酶的基本性质表征 | 第37-48页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·纤维素酶的序列分析 | 第37-41页 |
| ·杂合酶的克隆、构建和表达 | 第41-42页 |
| ·各杂合酶基因 PCR 产物的鉴定及回收 | 第41页 |
| ·载体的线性化 | 第41页 |
| ·克隆结果鉴定 | 第41-42页 |
| ·酶的纯化及鉴定 | 第42页 |
| ·杂合酶的酶学性质表征 | 第42-46页 |
| ·小结 | 第46-48页 |
| 第4章 杂合酶与不溶性纤维素底物的作用 | 第48-60页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·杂合酶对 RAC 水解产物研究 | 第48-51页 |
| ·杂合酶渐进性研究 | 第51-52页 |
| ·杂合酶对 Avicel 吸附性研究 | 第52-53页 |
| ·杂合酶协同性研究 | 第53-58页 |
| ·小结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
| 硕士期间已发表和待发表的文章 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
