| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-15页 |
| ·生长抑制特异性基因及其表达产物的研究进展 | 第8-13页 |
| ·酵母双杂交系统的原理 | 第13-15页 |
| ·本实验的研究目的 | 第15页 |
| 2 第一部分 Gas8 多克隆抗体的制备及小鼠组织表达图谱分析 | 第15-20页 |
| ·实验材料 | 第15-16页 |
| ·菌株和质粒 | 第15页 |
| ·细胞系和实验动物 | 第15页 |
| ·工具酶、试剂和抗体 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-17页 |
| ·Gas8 基因的扩增 | 第16页 |
| ·表达载体的构建 | 第16页 |
| ·Gas8 在E.coliBL21（DE3）中的表达及纯化 | 第16页 |
| ·抗原的制备 | 第16-17页 |
| ·兔多抗血清的制备和纯化 | 第17页 |
| ·Gas8 多抗特异性检测 | 第17页 |
| ·Gas8 多抗检测小鼠各组织内源表达 | 第17页 |
| ·实验结果 | 第17-20页 |
| ·表达、纯化Gas8 蛋白 | 第17-18页 |
| ·制备Gas8 特异性多抗 | 第18-20页 |
| ·Gas8 在小鼠各组织器官中广泛表达 | 第20页 |
| 3 第二部分 cdc25H 酵母系统筛选Gas8 相互作用蛋白 | 第20-24页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·质粒和菌株 | 第20页 |
| ·酶类、试剂及试剂盒 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·酵母双杂交系统的建立 | 第20-22页 |
| ·人肺组织cDNA 文库的筛选 | 第22-23页 |
| ·从阳性克隆中提取质粒并再次验证相互作用 | 第23-24页 |
| ·结果分析 | 第24页 |
| ·诱饵质粒pSos-Gas8 的构建 | 第24页 |
| ·酵母菌株表型鉴定及诱饵蛋白的转录激活活性分析 | 第24页 |
| ·文库筛选 | 第24页 |
| 4 第三部分 AH109 酵母系统筛选Gas8 相互作用蛋白 | 第24-35页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·菌株及质粒 | 第24-25页 |
| ·工具酶、试剂及试剂盒 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·制备AH109 酵母感受态细胞 | 第25页 |
| ·构建pGBKT7-Gas8 质粒，验证自激活 | 第25页 |
| ·融合法筛选人肺组织cDNA 文库 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆分离 | 第26-27页 |
| ·相互作用验证 | 第27页 |
| ·阳性克隆cDNA 的测序及同源性分析 | 第27页 |
| ·实验结果 | 第27-35页 |
| ·自激活及毒性检测 | 第27页 |
| ·筛选人肺组织cDNA 文库结果 | 第27页 |
| ·阳性克隆cDNA 的测序及同源性分析结果 | 第27-35页 |
| 5 讨论 | 第35-36页 |
| ·Gas8 抗体制备及小鼠组织表达图谱 | 第35页 |
| ·cdc25H 酵母双杂交筛选Gas8 相互作用蛋白 | 第35-36页 |
| ·AH109 酵母系统筛选Gas8 相互作用蛋白 | 第36页 |
| 6 结论 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 作者简介 | 第42页 |
