| 英文缩写词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 材料与方法 | 第16-32页 |
| 1. 材料 | 第16-18页 |
| ·引物合成及序列测定 | 第16页 |
| ·菌株和细胞株 | 第16页 |
| ·质粒 | 第16页 |
| ·分子生物学工具酶 | 第16页 |
| ·常用试剂盒 | 第16-17页 |
| ·其它分子生物学试剂和化学试剂 | 第17页 |
| ·细胞培养试剂 | 第17页 |
| ·抗体 | 第17页 |
| ·主要实验仪器 | 第17-18页 |
| 2. 方法 | 第18-32页 |
| ·细胞复苏 | 第18页 |
| ·细胞培养 | 第18页 |
| ·细胞培养 | 第18页 |
| ·细胞传代 | 第18页 |
| ·DNA 的提取 | 第18-19页 |
| ·酶切实验 | 第19-20页 |
| ·DNA 测序 | 第20-22页 |
| ·下调L1 编码的ORF-1p 重组表达载体的构建 | 第22-24页 |
| ·siRNA 的设计 | 第22页 |
| ·退火形成双链 | 第22页 |
| ·酶切载体 | 第22-23页 |
| ·连接 | 第23页 |
| ·转化 | 第23页 |
| ·重组子的筛选 | 第23页 |
| ·测序 | 第23-24页 |
| ·哺乳动物细胞的转染 | 第24页 |
| ·RT-PCR 检测细胞L1 mRNA | 第24-27页 |
| ·RNA 的提起 | 第24-25页 |
| ·RT-PCR | 第25页 |
| ·制备用于绘制标准曲线的梯度稀释DNA 模板 | 第25-26页 |
| ·进行Realtime PCR 反应 | 第26-27页 |
| ·结果与计算 | 第27页 |
| ·Western blot 分析 | 第27-28页 |
| ·荧光素酶和β-半乳糖苷酶活性测定 | 第28页 |
| ·转录激活活性检测 | 第28-29页 |
| ·荧光素酶和β-半乳糖苷酶活性测定中的哺乳动物细胞的转染方法 | 第29页 |
| ·MTT 绘制细胞生长曲线 | 第29页 |
| ·哺乳动物细胞周期测定 | 第29-30页 |
| ·哺乳动物细胞混合克隆的制备 | 第30页 |
| ·肿瘤细胞软琼脂成集落实验 | 第30-31页 |
| ·基因芯片实验 | 第31-32页 |
| 结果 | 第32-58页 |
| 第一部分：L1 在肿瘤细胞中甲基化水平检验 | 第32-37页 |
| ·DNA 的提取 | 第32页 |
| ·PCR 扩增标准曲线的建立 | 第32-33页 |
| ·酶切产物PCR 检测 | 第33-35页 |
| ·L1 启动子区测序 | 第35-37页 |
| 第二部分：L1 编码框ORF-1 的下调 | 第37-45页 |
| ·RNAi 载体的构建 | 第37-38页 |
| ·载体的构建 | 第38页 |
| ·siRNA 表达载体的鉴定 | 第38-39页 |
| ·RT-PCR 检测ORF1 下调效果 | 第39-43页 |
| ·RNA 的提取 | 第39-40页 |
| ·Realtime PCR 检测其转染效率 | 第40-43页 |
| ·Western blot 分析其转染效率 | 第43-45页 |
| 第三部分：L1 对肿瘤细胞生物学行为的调节 | 第45-52页 |
| ·降低L1 ORF1 的表达能够抑制肿瘤细胞的生长速度 | 第45-46页 |
| ·降低L1 ORF1 的表达影响细胞周期的运转 | 第46-48页 |
| ·降低L1 ORF1 的表达减弱肿瘤细胞锚定非依赖性生长能力 | 第48-52页 |
| 第四部分：L1 调控基因的初步鉴定 | 第52-58页 |
| ·降低L1 ORF1 的表达对细胞周期相关基因的影响 | 第52-54页 |
| ·基因芯片筛选降低L1 ORF1 的表达后，常见基因的差异性表达 | 第54-58页 |
| ·总RNA 的提取 | 第54-55页 |
| ·数据分析 | 第55-58页 |
| 讨论 | 第58-62页 |
| 结论总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 文献综述 | 第67-75页 |
| 论著 | 第75-88页 |
| 在读期间发表文章 | 第88-89页 |
| 个人简历 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
