| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-29页 |
| 1 引言 | 第12-13页 |
| 2 成纤维细胞生长因子概况 | 第13-16页 |
| ·成纤维细胞生长因子的来源及分类 | 第13-15页 |
| ·成纤维细胞生长因子家族的主要功能 | 第15-16页 |
| 3 角质维细胞生长因子-2概况 | 第16-25页 |
| ·角质细胞生长因子-2的基因定位、分子结构 | 第17页 |
| ·角质细胞生长因子-2的作用机制 | 第17-18页 |
| ·角质细胞生长因子-2的生物学功能 | 第18-25页 |
| 4 成纤维细胞生长因子研究现状 | 第25-27页 |
| 5 课题设计依据及创新性 | 第27页 |
| ·设计依据 | 第27页 |
| ·创新性 | 第27页 |
| 6 主要研究内容及技术路线 | 第27-29页 |
| ·主要研究内容 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| 第二章 高效表达rhKGF-2重组大肠杆菌的构建 | 第29-42页 |
| 1 引言 | 第29页 |
| 2 技术路线 | 第29页 |
| 3 材料与方法 | 第29-37页 |
| ·材料 | 第29-31页 |
| ·方法 | 第31-37页 |
| 4 结果 | 第37-40页 |
| ·rhKGF-2目的基因的获得 | 第37页 |
| ·重组菌株pET3c-rhKGF-2/BL21(DE3)鉴定 | 第37-38页 |
| ·rhKGF-2工程菌遗传稳定性 | 第38-40页 |
| 5 讨论 | 第40-41页 |
| ·rhKGF-2表达体系的选择和设计 | 第40-41页 |
| ·rhKGF-2工程菌遗传稳定性 | 第41页 |
| 6 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 KGF-2在大肠杆菌中表达条件的摸索 | 第42-70页 |
| 1 引言 | 第42页 |
| 2 技术路线 | 第42页 |
| 3 材料与方法 | 第42-49页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·方法 | 第44-49页 |
| 4 结果 | 第49-65页 |
| ·KGF-2工程菌生长曲线 | 第49页 |
| ·pH值对菌体生长和表达的影响 | 第49-50页 |
| ·温度对菌体生长和表达的影响 | 第50-52页 |
| ·溶氧量对菌体生长和表达的影响 | 第52-53页 |
| ·乙酸浓度对菌体生长和表达的影响 | 第53页 |
| ·不同碳源对菌体生长和表达的影响 | 第53-54页 |
| ·培养基优化 | 第54-59页 |
| ·IPTG诱导对菌体生长和表达的影响 | 第59-61页 |
| ·乳糖诱导对菌体生长和表达的影响 | 第61-63页 |
| ·rhKGF-2工程菌的高密度发酵 | 第63-65页 |
| 5 讨论 | 第65-68页 |
| ·影响发酵的主要因素及控制 | 第65-67页 |
| ·乳糖诱导与IPTG诱导分析 | 第67-68页 |
| ·高密度发酵方案 | 第68页 |
| 6 本章小结 | 第68-70页 |
| 第四章 rhKGF-2蛋白纯化工艺的研究 | 第70-92页 |
| 1 引言 | 第70页 |
| 2 技术路线 | 第70页 |
| 3 材料与方法 | 第70-74页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-74页 |
| 4 结果 | 第74-88页 |
| ·粗提生产工艺优化 | 第74-76页 |
| ·纯化生产工艺优化 | 第76-79页 |
| ·不同缓冲体系及pH值对蛋白稳定性影响 | 第79-86页 |
| ·连续三批中试规模放大纯化结果 | 第86-88页 |
| 5 讨论 | 第88-91页 |
| ·蛋白的分离纯化 | 第88-90页 |
| ·蛋白稳定性 | 第90-91页 |
| 6 本章小结 | 第91-92页 |
| 第五章 rhKGF-2蛋白质量检测 | 第92-102页 |
| 1 引言 | 第92页 |
| 2 材料与方法 | 第92-96页 |
| ·材料 | 第92-93页 |
| ·方法 | 第93-96页 |
| 3 结果 | 第96-100页 |
| ·分子量鉴定 | 第96页 |
| ·纯度鉴定 | 第96-98页 |
| ·蛋白含量测定 | 第98页 |
| ·紫外光谱扫描 | 第98页 |
| ·N端测序 | 第98页 |
| ·内毒素测定 | 第98页 |
| ·鉴别试验 | 第98-99页 |
| ·生物学活性测定 | 第99-100页 |
| 4 讨论 | 第100页 |
| 5 本章小结 | 第100-102页 |
| 第六章 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-112页 |
| 附录 | 第112-117页 |
| 缩略语表 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 作者简介 | 第119-120页 |