AMF基因在食管鳞癌细胞株中的表达及功能初步分析
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 1 引言 | 第13-15页 |
| 2 AMF基因的克隆与真核表达载体的构建 | 第15-35页 |
| ·材料 | 第15-20页 |
| ·仪器与设备 | 第15-16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·细胞株 | 第16页 |
| ·引物 | 第16-17页 |
| ·常用培养基及液体试剂的配置 | 第17-18页 |
| ·载体及菌株 | 第18-20页 |
| ·方法 | 第20-28页 |
| ·RT-PCR | 第20-23页 |
| ·PCR产物胶回收片段与pMD18-T载体的连接 | 第23-25页 |
| ·测序和序列分析 | 第25-26页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·绿色荧光蛋白载体的构建 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-31页 |
| ·人食管鳞癌细胞株总RNA的鉴定 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR扩增AMF基因的鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组载体的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·测序分析 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| ·小结 | 第33-35页 |
| 3 AMF基因在食管鳞癌细胞株中的功能初步分析 | 第35-52页 |
| ·材料 | 第35-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第35-36页 |
| ·主要试剂与试剂盒 | 第36-37页 |
| ·常用试剂的配制方法 | 第37页 |
| ·细胞系 | 第37页 |
| ·细胞培养所需试剂 | 第37页 |
| ·Western blotting所用的试剂 | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-44页 |
| ·荧光表达载体转染食管鳞癌细胞株 | 第38-40页 |
| ·真核表达载体转染食管鳞癌细胞株 | 第40页 |
| ·pcDNA3.1(+)-AMF转染株的鉴定 | 第40-41页 |
| ·Western blotting分析 | 第41-44页 |
| ·统计学处理方法 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-49页 |
| ·总蛋白含量的测定 | 第44页 |
| ·AMF基因的细胞定位 | 第44-45页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR结果分析 | 第46-48页 |
| ·Western blotting结果分析 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 综述 | 第55-65页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第67页 |
