| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1 甲壳动物先天免疫系统的研究进展 | 第13-18页 |
| ·细胞免疫 | 第13-15页 |
| ·血细胞的分类 | 第13页 |
| ·血细胞的功能 | 第13-15页 |
| ·体液免疫 | 第15-18页 |
| ·凝集素 | 第15-16页 |
| ·抗菌肽 | 第16页 |
| ·酚氧化酶原激活系统 | 第16-17页 |
| ·溶酶体酶 | 第17-18页 |
| 2 中华绒螯蟹免疫相关基因的研究概况 | 第18-21页 |
| ·酚氧化酶酶原 | 第18-19页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制因子Pacifastin | 第19页 |
| ·抗脂多糖因子 | 第19页 |
| ·硫氧还蛋白 | 第19-20页 |
| ·胸腺肽重复蛋白 | 第20页 |
| ·脂多糖和β-1,3葡聚糖结合蛋白 | 第20-21页 |
| 3 本研究的目的与内容 | 第21-22页 |
| 第二章 中华绒螯蟹cDNA文库的构建及EST序列的初步分析 | 第22-33页 |
| 1 前言 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-26页 |
| ·试验材料 | 第22-24页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·试剂盒与主要试剂 | 第23-24页 |
| ·载体和菌株 | 第24页 |
| ·试验动物 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-26页 |
| ·总RNA的提取及mRNA的纯化 | 第24-25页 |
| ·cDNA第一链、第二链的合成 | 第25页 |
| ·cDNA片段的分离 | 第25页 |
| ·cDNA与载体的连接与转化 | 第25-26页 |
| ·文库滴度及质量检测 | 第26页 |
| ·cDNA文库的筛选与测序 | 第26页 |
| ·EST测序结果分析 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-31页 |
| ·总RNA的提取及mRNA的纯化 | 第26-27页 |
| ·cDNA的合成 | 第27页 |
| ·cDNA的分级分离与转化 | 第27-28页 |
| ·文库滴度及文库克隆的PCR检测 | 第28页 |
| ·EST测序结果初步分析 | 第28-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 中华绒螯蟹两种C型凝集素的克隆与表达 | 第33-51页 |
| 1 前言 | 第33页 |
| 2. 材料与方法 | 第33-39页 |
| ·试验动物 | 第33-34页 |
| ·RNA提取 | 第34页 |
| ·C型凝集素A(EsLecA)5'-RACE的扩增 | 第34-35页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第34页 |
| ·EsLecA cDNA片段的获得 | 第34-35页 |
| ·C型凝集素B(EsLecB)5'-RACE的扩增 | 第35-36页 |
| ·RACE产物的克隆和测序及全长cDNA的获得 | 第36-37页 |
| ·序列分析及系统进化树的构建 | 第37页 |
| ·EsLecA和EsLecB的组织表达分布及诱导性表达 | 第37-39页 |
| ·中华绒螯蟹的免疫刺激、RNA提取 | 第37页 |
| ·RNA样品中DNA的处理 | 第37-38页 |
| ·cDNA模板的制备 | 第38页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-49页 |
| ·EsLecA和EsLecB核酸序列及推导的氨基酸序列特征 | 第39-42页 |
| ·EsLecA核酸序列及推导的氨基酸序列特征 | 第39-41页 |
| ·EsLecB核酸序列及推导的氨基酸序列特征 | 第41-42页 |
| ·EsLecA和EsLecB的系统进化分析 | 第42-44页 |
| ·标准曲线的建立 | 第44-45页 |
| ·实时荧光定量PCR检测EsLecA和EsLecB的组织表达分布 | 第45-47页 |
| ·实时荧光定量PCR检测EsLecA和EsLecB的诱导表达变化 | 第47-49页 |
| ·EsLecA的诱导表达变化 | 第47-48页 |
| ·EsLecB的诱导表达变化 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 中华绒螯蟹铁蛋白基因的克隆与表达 | 第51-62页 |
| 1 前言 | 第51-52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-53页 |
| ·实验动物 | 第52页 |
| ·铁蛋白基因的序列分析及系统进化树的构建 | 第52页 |
| ·中华绒螯蟹的免疫刺激、RNA提取 | 第52页 |
| ·RNA样品中DNA的处理 | 第52页 |
| ·中华绒螯蟹铁蛋白基因的组织表达及诱导性表达 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-59页 |
| ·铁蛋白基因EsFer核酸序列及推导的氨基酸序列特征 | 第53-54页 |
| ·铁蛋白基因EsFer的多序列比对以及系统进化树分析 | 第54-57页 |
| ·标准曲线的建立 | 第57-58页 |
| ·铁蛋白基因EsFer的组织表达分布及诱导性表达 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| 参考文献 | 第62-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
