| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词 | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| 1.1 漆酶研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1.1 漆酶的简介 | 第12页 |
| 1.1.2 漆酶的来源与功能 | 第12-13页 |
| 1.1.3 真菌漆酶的结构与反应机理 | 第13-15页 |
| 1.1.4 漆酶分离纯化方法 | 第15页 |
| 1.1.5 漆酶性质 | 第15-17页 |
| 1.1.6 漆酶的基因克隆 | 第17-18页 |
| 1.1.7 漆酶的应用 | 第18页 |
| 1.2 漆酶/介体系统(LMS) | 第18-24页 |
| 1.2.1 LMS的定义与特点 | 第18-19页 |
| 1.2.2 介体的类型 | 第19-21页 |
| 1.2.3 LMS的反应机理 | 第21-24页 |
| 1.3 LMS的多领域应用 | 第24-26页 |
| 1.3.1 造纸领域应用 | 第24-25页 |
| 1.3.2 纺织领域的应用 | 第25页 |
| 1.3.3 环保领域的应用 | 第25-26页 |
| 1.4 槐耳简介 | 第26页 |
| 1.5 立项依据与研究内容 | 第26-28页 |
| 1.5.1 立项依据 | 第26-27页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第27页 |
| 1.5.3 技术路线图 | 第27-28页 |
| 第二章 槐耳的分离鉴定、最适培养条件及产酶条件研究 | 第28-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.1.1 菌株 | 第28页 |
| 2.1.2 培养基 | 第28页 |
| 2.2 实验药品与溶液 | 第28-30页 |
| 2.2.1 实验药品 | 第28-30页 |
| 2.2.2 溶液与试剂盒 | 第30页 |
| 2.3 实验仪器 | 第30页 |
| 2.4 实验方法 | 第30-35页 |
| 2.4.1 菌株的分离与保存 | 第30-31页 |
| 2.4.2 分子鉴定 | 第31-32页 |
| 2.4.3 最适培养条件研究 | 第32-35页 |
| 2.4.4 最适产酶条件研究 | 第35页 |
| 2.4.5 酶活性测定方法 | 第35页 |
| 2.5 实验结果 | 第35-44页 |
| 2.5.1 形态学鉴定 | 第35-36页 |
| 2.5.2 分子鉴定 | 第36-37页 |
| 2.5.3 最适培养条件研究 | 第37-44页 |
| 2.5.4 最适产酶条件研究 | 第44页 |
| 2.6 分析与讨论 | 第44-45页 |
| 2.7 本章小结 | 第45-47页 |
| 第三章 XS-01 菌株胞外漆酶的分离纯化、酶学性质及基因克隆 | 第47-83页 |
| 3.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第47页 |
| 3.1.2 培养基 | 第47-48页 |
| 3.2 实验试剂 | 第48-52页 |
| 3.2.1 漆酶分离纯化试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.2 漆酶酶学性质实验试剂 | 第49-52页 |
| 3.3 实验仪器 | 第52-53页 |
| 3.4 实验方法 | 第53-68页 |
| 3.4.1 粗酶液的发酵和粗分离 | 第53页 |
| 3.4.2 离子交换层析 | 第53-56页 |
| 3.4.3 凝胶过滤层析 | 第56页 |
| 3.4.4 SDS-PAGE | 第56-58页 |
| 3.4.5 漆酶N-端测序 | 第58-59页 |
| 3.4.6 漆酶肽段测序 | 第59-60页 |
| 3.4.7 漆酶酶学性质 | 第60-62页 |
| 3.4.8 RNA提取与cDNA合成 | 第62-63页 |
| 3.4.9 漆酶核心区域克隆 | 第63-64页 |
| 3.4.10 PCR后产物纯化 | 第64-66页 |
| 3.4.11 漆酶全基因克隆 | 第66-68页 |
| 3.5 实验结果 | 第68-80页 |
| 3.5.1 DEAE-Sepharose分离结果 | 第68-69页 |
| 3.5.2 SP-Sepharose分离结果 | 第69-70页 |
| 3.5.3 Q-Sepharose分离结果 | 第70页 |
| 3.5.4 Superdex75 凝胶过滤层析分离结果 | 第70-71页 |
| 3.5.5 分离纯化效率 | 第71页 |
| 3.5.6 SDS-PAGE检测 | 第71-72页 |
| 3.5.7 XS-01 漆酶肽段序列 | 第72-73页 |
| 3.5.8 XS-01 N-端序列 | 第73-74页 |
| 3.5.9 XS-01 漆酶酶学性质 | 第74-78页 |
| 3.5.10 RNA提取与漆酶核心区扩增 | 第78-79页 |
| 3.5.11 XS-01 漆酶全基因克隆 | 第79-80页 |
| 3.6 分析与讨论 | 第80-81页 |
| 3.7 本章小结 | 第81-83页 |
| 第四章 漆酶/介体系统对活性染料降解研究 | 第83-109页 |
| 4.1 实验材料 | 第83页 |
| 4.1.1 纯化后漆酶(OD420=1.0,8.9x104 IU/mL) | 第83页 |
| 4.1.2 细菌菌株 | 第83页 |
| 4.1.3 培养基 | 第83页 |
| 4.2 实验试剂 | 第83-86页 |
| 4.2.1 Na2HPO4-柠檬酸缓冲液 | 第83-84页 |
| 4.2.2 介体 | 第84-85页 |
| 4.2.3 活性染料 | 第85-86页 |
| 4.3 实验仪器 | 第86页 |
| 4.4 实验方法 | 第86-88页 |
| 4.4.1 介体的筛选与LMS的构建 | 第86页 |
| 4.4.2 不同温度对LMS降解活性染料的影响 | 第86-87页 |
| 4.4.3 不同pH对 LMS降解活性染料的影响 | 第87页 |
| 4.4.4 不同介体浓度对LMS降解活性染料的影响 | 第87页 |
| 4.4.5 最适条件下LMS对于活性染料的降解 | 第87页 |
| 4.4.6 基于全波段扫描对活性染料降解机理的研究 | 第87页 |
| 4.4.7 降解后产物对黑麦草的毒性研究 | 第87-88页 |
| 4.4.8 降解后产物对细菌的毒性研究 | 第88页 |
| 4.5 实验结果 | 第88-106页 |
| 4.5.1 介体的筛选与漆酶/介体系统(LMS)的构建 | 第88-91页 |
| 4.5.2 温度对于LMS降解活性染料的影响 | 第91-93页 |
| 4.5.3 pH对于LMS降解活性染料的影响 | 第93-95页 |
| 4.5.4 介体浓度LMS降解活性染料的影响 | 第95-97页 |
| 4.5.5 最适条件下LMS对于活性染料的降解 | 第97-98页 |
| 4.5.6 基于全段扫描探究LMS对活性染料的降解机理 | 第98-101页 |
| 4.5.7 降解后产物对黑麦草的毒性 | 第101-103页 |
| 4.5.8 降解后产物对细菌的毒性 | 第103-106页 |
| 4.6 分析与讨论 | 第106-108页 |
| 4.7 本章小结 | 第108-109页 |
| 第五章 实验结论与进一步工作 | 第109-110页 |
| 5.1 结论 | 第109页 |
| 5.2 进一步工作 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 附录 | 第111-113页 |
| 个人简介 | 第113页 |
