| 摘要 | 第5-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第17-30页 |
| 1.1 肝癌 | 第17-19页 |
| 1.1.1 肿瘤发展进程类似组织创伤修复的进程假说 | 第17-18页 |
| 1.1.2 肿瘤微环境及肿瘤相关成纤维细胞 | 第18-19页 |
| 1.2 骨髓间充质干细胞 | 第19-26页 |
| 1.2.1 间充质干细胞来源及形态 | 第19-20页 |
| 1.2.2 MSC具有多向分化潜能 | 第20页 |
| 1.2.3 MSC具有体内迁移特性 | 第20页 |
| 1.2.4 MSC与肿瘤的相互关系 | 第20-21页 |
| 1.2.5 MSC在肿瘤治疗方面的应用研究 | 第21-22页 |
| 1.2.6 研究MSC归巢的主要方法 | 第22-24页 |
| 1.2.7 活体流式细胞仪 | 第24-25页 |
| 1.2.8 国内研究现状和发展趋势 | 第25-26页 |
| 1.3 前列腺癌及雄性激素剥夺疗法 | 第26-29页 |
| 1.3.1 前列腺癌 | 第27页 |
| 1.3.2 前列腺癌循环中肿瘤细胞及检测方法 | 第27-28页 |
| 1.3.3 雄性激素剥夺疗法 | 第28-29页 |
| 1.4 课题创新性 | 第29-30页 |
| 第二章 荧光染料标记MSC在肿瘤模型体内归巢特性研究 | 第30-60页 |
| 2.1 引言 | 第30-31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-35页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第31页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第31-33页 |
| 2.2.3 耗材和器械 | 第33-34页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-47页 |
| 2.3.1 肿瘤细胞培养 | 第35-36页 |
| 2.3.2 骨髓间充质干细胞的提取 | 第36-37页 |
| 2.3.3 体外流式细胞仪鉴定MSC表面标志物 | 第37页 |
| 2.3.4 MSC细胞分化能力鉴定 | 第37-39页 |
| 2.3.5 体外Transwell实验验证肝癌细胞对MSC募集能力 | 第39-40页 |
| 2.3.6 肿瘤模型构建 | 第40-42页 |
| 2.3.7 组织病理切片及检测 | 第42-43页 |
| 2.3.8 活体流式细胞仪结构 | 第43-44页 |
| 2.3.9 DiD染色步骤 | 第44页 |
| 2.3.10 IVFC动物实验监测 | 第44-45页 |
| 2.3.11 体外流式细胞仪验证外周血中MSC数量变化 | 第45-46页 |
| 2.3.12 小鼠外周血中中性粒细胞的提取分离 | 第46页 |
| 2.3.13 计算和统计学分析 | 第46-47页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第47-58页 |
| 2.4.1 MSC形态鉴定 | 第47页 |
| 2.4.2 流式细胞仪对MSC细胞表面标志物鉴定 | 第47-48页 |
| 2.4.3 体外诱导分化能力鉴定 | 第48-49页 |
| 2.4.4 体外MSC向肿瘤细胞迁移效率验证实验 | 第49-50页 |
| 2.4.5 IVFC检测Di D-MSC在荷瘤小鼠体内循环时间 | 第50-52页 |
| 2.4.6 体外流式细胞仪验证Di D-MSC信号的准确性 | 第52-53页 |
| 2.4.7 体外验证中性粒细胞与MSC相互作用 | 第53-54页 |
| 2.4.8 IVFC检测抗体清除中性粒细胞后MSC的归巢时间 | 第54-55页 |
| 2.4.9 DiD-MSC在小鼠模型体内分布 | 第55-58页 |
| 2.5 讨论和小结 | 第58-60页 |
| 第三章 GFP-MSC在正常小鼠及肿瘤模型体内归巢研究 | 第60-90页 |
| 3.1 引言 | 第60-61页 |
| 3.2 实验材料 | 第61-64页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第61-62页 |
| 3.2.2 引物 | 第62-64页 |
| 3.2.3 主要设备 | 第64页 |
| 3.3 实验方法 | 第64-70页 |
| 3.3.1 质粒抽提 | 第64-65页 |
| 3.3.2 将pTurboRFP质粒转染入HCCLM3 细胞 | 第65-66页 |
| 3.3.3 腺病毒转染BMSC细胞 | 第66页 |
| 3.3.4 原位癌及转移灶中细胞提取 | 第66-67页 |
| 3.3.5 肿瘤组织和细胞RNA的提取 | 第67-68页 |
| 3.3.6 逆转录生成cDNA | 第68页 |
| 3.3.7 RT-PCR反应 | 第68-69页 |
| 3.3.8 冰冻组织切片及免疫荧光染色 | 第69页 |
| 3.3.9 动物模型的构建 | 第69-70页 |
| 3.3.10 活体流式细胞仪的检测 | 第70页 |
| 3.3.11 统计学方法 | 第70页 |
| 3.4 实验结果 | 第70-86页 |
| 3.4.1 MSC细胞表面标志物验证 | 第70页 |
| 3.4.2 肿瘤细胞及MSC转染结果 | 第70-71页 |
| 3.4.3 MSC在正常小鼠及肿瘤模型小鼠中归巢特性 | 第71-74页 |
| 3.4.4 用体外流式细胞仪验证GFP-MSC归巢特性 | 第74-75页 |
| 3.4.5 免疫荧光染色考察GFP-MSC在组织内分布 | 第75-81页 |
| 3.4.9 MSC具有向转移灶更强的迁移能力 | 第81-83页 |
| 3.4.10 初步探讨转移灶中肿瘤细胞对MSC募集能力更强的机制 | 第83-86页 |
| 3.5 结果讨论 | 第86-89页 |
| 3.6 本章小结 | 第89-90页 |
| 第四章 不同前列腺癌模型治疗与非治疗组肿瘤发展趋势 | 第90-110页 |
| 4.1 引言 | 第90-91页 |
| 4.2 实验材料 | 第91-93页 |
| 4.2.1 手术器械及实验耗材 | 第91-92页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第92-93页 |
| 4.3 实验方法 | 第93-95页 |
| 4.3.1 PC3 细胞的体外培养及转染 | 第93页 |
| 4.3.2 小鼠肿瘤模型构建 | 第93-94页 |
| 4.3.3 用IVFC实时监测PC3 血行转移情况 | 第94页 |
| 4.3.4 肿瘤体积检测 | 第94-95页 |
| 4.3.5 去势手术 | 第95页 |
| 4.3.6 数据统计 | 第95页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第95-108页 |
| 4.4.1 PC3 细胞经慢病毒转染后荧光表达照片 | 第95-96页 |
| 4.4.2 IVFC监测皮下瘤及原位瘤模型中CTC数量变化 | 第96-97页 |
| 4.4.3 皮下瘤及原位瘤模型中肿瘤体积增长变化 | 第97-98页 |
| 4.4.4 皮下瘤及原位瘤模型中转移灶病理解剖图片 | 第98-99页 |
| 4.4.5 免疫荧光检测淋巴结转移情况分析 | 第99-100页 |
| 4.4.6 皮下瘤及原位瘤模型小鼠存活时间比较 | 第100-101页 |
| 4.4.7 去势后接种皮下瘤及前列腺原位瘤考察CTC变化 | 第101-102页 |
| 4.4.8 去势后接种皮下瘤及原位瘤模型组CTC及肿瘤体积变化 | 第102-103页 |
| 4.4.9 原位瘤模型中出现CTC后手术去势组疗效评估 | 第103-104页 |
| 4.4.10 原位癌模型中治疗与非治疗组中CTC数及肿瘤体积变化 | 第104-106页 |
| 4.4.11 原位瘤模型先去势组及成瘤后去势组病理解剖图片 | 第106-107页 |
| 4.4.12 原位瘤模型非治疗组、先去势组、成瘤后去势组超声图片 | 第107-108页 |
| 4.4.13 皮下瘤及原位瘤模型小鼠非治疗组及治疗组存活时间比较 | 第108页 |
| 4.5 本章小结 | 第108-110页 |
| 全文小结 | 第110-112页 |
| 研究展望 | 第112-113页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-123页 |
| 攻读博士学位期间已发表或录用的论文 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
