| 内容提要 | 第1-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-23页 |
| ·AΒ的产生及毒性 | 第8-9页 |
| ·AD 的免疫治疗 | 第9-13页 |
| ·AD 免疫治疗的机理 | 第10页 |
| ·AD 免疫治疗的背景 | 第10-13页 |
| ·APP 的研究进展 | 第13-21页 |
| ·APP 分子中的重要结构域 | 第13-14页 |
| ·APP 的相互作用 | 第14-21页 |
| ·APP 与AD 的关系 | 第21-23页 |
| 第2章 阿尔茨海默病的实验免疫研究 | 第23-51页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·菌种和质粒 | 第24页 |
| ·各种酶、抗体及主要生化试剂 | 第24页 |
| ·实验动物、细胞株及细胞培养相关试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-40页 |
| ·质粒的提取 | 第25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第25-26页 |
| ·DNA 的定量 | 第26页 |
| ·目的基因的获得 | 第26-27页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第27-28页 |
| ·DNA 片段的3’凹端补平 | 第28页 |
| ·线性质粒DNA 末端去磷酸化 | 第28-29页 |
| ·DNA 片段的回收 | 第29页 |
| ·外源DNA 片段与质粒载体的连接反应 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·连接产物的转化 | 第30-31页 |
| ·阳性菌株筛选及鉴定 | 第31页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·表达菌体的超声破碎 | 第32页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第32-33页 |
| ·组氨酸标签融合蛋白的纯化（镍柱纯化） | 第33-34页 |
| ·蛋白印迹分析（Western blot） | 第34-35页 |
| ·蛋白浓度测定（考马斯亮蓝法） | 第35-36页 |
| ·免疫原的处理 | 第36页 |
| ·BALB/c 小鼠的免疫 | 第36页 |
| ·抗血清的制备 | 第36-37页 |
| ·抗体滴度的测定 | 第37-38页 |
| ·抗体浓度的测定 | 第38页 |
| ·抗体亚型的测定 | 第38页 |
| ·不同聚集形式的Aβ42 的制备及电镜观察 | 第38-39页 |
| ·抗体对不同聚集形式的Aβ42 的特异性识别的差异 | 第39页 |
| ·抗体在体外抑制Aβ42 聚集、诱导Aβ42 纤维解聚的分析 | 第39页 |
| ·MTT 法测定抗体对Aβ42 细胞毒性的抑制和中和作用 | 第39-40页 |
| ·实验结果 | 第40-50页 |
| ·pET-416(+)-Aβ28/Aβ35/Aβ42 表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第41-43页 |
| ·Aβ28、Aβ35、Aβ42 的表达与纯化 | 第43页 |
| ·Western blot 分析 | 第43-44页 |
| ·抗血清中抗体的滴度、浓度、亚型的测定 | 第44-46页 |
| ·血清抗体在体外抑制Aβ42 聚集以及诱导Aβ42 纤维解聚的作用分析 | 第46-48页 |
| ·血清抗体抗Aβ42 不同聚集形式的特异性分析 | 第48页 |
| ·血清抗体抑制或中和Aβ42 细胞毒性的作用分析 | 第48-50页 |
| 本章小结 | 第50-51页 |
| 第3章 阿尔茨海默病致病机理的研究 | 第51-81页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·细胞系、菌株以及载体质粒 | 第52页 |
| ·抗体及转染试剂 | 第52页 |
| ·包被用基质蛋白及高粘性96 孔板 | 第52页 |
| ·主要实验设备 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-58页 |
| ·细胞培养 | 第53-54页 |
| ·细胞计数 | 第54-55页 |
| ·细胞冻存 | 第55页 |
| ·转染 | 第55页 |
| ·细胞爬片 | 第55-56页 |
| ·免疫荧光 | 第56页 |
| ·细胞裂解 | 第56页 |
| ·免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，co-IP） | 第56-57页 |
| ·细胞伤口愈合实验（Cell Wound Healing Assay） | 第57页 |
| ·Transwell 实验 | 第57页 |
| ·细胞聚集实验 | 第57-58页 |
| ·靶细胞在细胞外基质上的粘附实验 | 第58页 |
| ·实验结果 | 第58-80页 |
| ·真核表达载体pEGFP-C3 -APP695 的构建 | 第58-61页 |
| ·APP 在C057 细胞中的表达与定位 | 第61-63页 |
| ·APP 对靶细胞迁移能力的影响 | 第63-64页 |
| ·APP 的相互作用（co-IP） | 第64-65页 |
| ·Aβ42 或由Aβ28 诱导产生的抗体对APP 分子间相互作用的抑制 | 第65页 |
| ·APP 介导靶细胞间的粘附 | 第65-67页 |
| ·Aβ42 或由Aβ28 诱导产生的抗体对靶细胞之间的相互聚集的影响.. | 第67-68页 |
| ·APP 对靶细胞在胞外基质上粘附的影响 | 第68-80页 |
| 本章小结 | 第80-81页 |
| 全文结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-89页 |
| 博士期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 摘要 | 第92-94页 |
| ABSTRACT | 第94-95页 |
