| 摘要 | 第4-11页 |
| Abstract | 第11-18页 |
| 英文缩略词 | 第19-27页 |
| 引言 | 第27-30页 |
| 第一部分 P-AKT和 P-ERKS在人食管鳞癌中的表达及发现其抑制剂Q3ME | 第30-54页 |
| 前言 | 第30-31页 |
| 第一章 P-AKT和 P-ERKS在人食管鳞癌组织中以及人食管癌细胞系中的表达 | 第31-42页 |
| 引言 | 第31页 |
| 1 材料与方法 | 第31-39页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 1.2 主要材料和试剂 | 第32-33页 |
| 1.2.1 人食管癌组织芯片 | 第32页 |
| 1.2.2 主要试剂耗材和试剂盒 | 第32-33页 |
| 1.3 常用试剂配制 | 第33-35页 |
| 1.4 实验方法 | 第35-39页 |
| 1.4.1 免疫组织化学方法检测p-AKT和 p-ERKs的表达 | 第35-37页 |
| 1.4.2 Western Blot检测食管鳞癌细胞株中p-AKT和 p-ERKs的表达。 | 第37-38页 |
| 1.4.3 统计学分析 | 第38-39页 |
| 2 结果 | 第39-42页 |
| 2.1 免疫组化染色结果显示AKT和 ERKS在食管癌组织中磷酸化水平升高 | 第39-40页 |
| 2.2 AKT和 ERKS在食管癌细胞系中磷酸化水平升高 | 第40-42页 |
| 第二章 Q3ME体外结合AKT和 ERKS蛋白并抑制相关通路蛋白 | 第42-51页 |
| 前言 | 第42页 |
| 1 材料与方法 | 第42-48页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 1.2 主要材料和试剂 | 第43页 |
| 1.3 常用试剂配制 | 第43-45页 |
| 1.4 实验方法 | 第45-48页 |
| 1.4.1 超级计算机模拟Q3ME与蛋白的相互作用 | 第45-47页 |
| 1.4.3 蛋白激酶芯片检测Q3ME作用后信号转导通路的改变 | 第47-48页 |
| 2 结果 | 第48-51页 |
| 2.1 Q3ME可以结合于AKT和ERKs蛋白的ATP结合区域 | 第48-49页 |
| 2.2 细胞水平Q3ME与 AKT和 ERKS相互结合 | 第49-50页 |
| 2.3 蛋白激酶芯片检测Q3ME对信号通路的影响 | 第50-51页 |
| 讨论 | 第51-53页 |
| 小结 | 第53-54页 |
| 第二部分 Q3ME抑制食管癌细胞增殖及其分子机制的研究 | 第54-73页 |
| 前言 | 第54-55页 |
| 第一章 Q3ME抑制食管癌细胞的锚定非依赖生长及细胞增殖 | 第55-63页 |
| 引言 | 第55页 |
| 1 材料与方法 | 第55-59页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第55页 |
| 1.2 主要材料和试剂 | 第55-56页 |
| 1.3 常用试剂配制 | 第56页 |
| 1.4 实验方法 | 第56-59页 |
| 1.4.1 化合物合成 | 第56-57页 |
| 1.4.2 化合物的配制 | 第57页 |
| 1.4.3 细胞培养 | 第57页 |
| 1.4.4 检测Q3ME对食管上皮来源永生化细胞SHEE的毒性作用 | 第57页 |
| 1.4.5 克隆形成实验检测Q3ME对食管癌细胞克隆形成能力的作用 | 第57-58页 |
| 1.4.6 检测Q3ME对食管癌细胞增殖的影响 | 第58页 |
| 1.4.7 实验结果的统计学分析 | 第58-59页 |
| 2 结果 | 第59-63页 |
| 2.1 合成高纯度的Q3ME | 第59页 |
| 2.2 Q3ME对 SHEE细胞活力度无明显影响 | 第59-60页 |
| 2.3 Q3ME能够抑制食管癌细胞的克隆形成能力 | 第60-61页 |
| 2.4 Q3ME抑制食管癌细胞增殖 | 第61-63页 |
| 第二章 Q3ME靶向作用于AKT和 ERKS信号通路抑制食管癌变 | 第63-70页 |
| 引言 | 第63页 |
| 1 材料与方法 | 第63-68页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第63页 |
| 1.2 主要材料和试剂 | 第63-64页 |
| 1.3 常用试剂配制 | 第64-65页 |
| 1.4 实验方法 | 第65-68页 |
| 1.4.1 细胞总蛋白的提取 | 第65页 |
| 1.4.2 测定样品蛋白的浓度 | 第65-66页 |
| 1.4.3 SDS-PAGE电泳 | 第66-67页 |
| 1.4.4 制备扩增AP-1 质粒 | 第67页 |
| 1.4.5 Qi Aprep质粒小提试剂盒提取质粒 | 第67-68页 |
| 1.4.6 荧光素酶报告基因检测 | 第68页 |
| 1.4.7 统计学分析 | 第68页 |
| 2 结果 | 第68-70页 |
| 2.1 Q3ME抑制食管癌细胞系中AKT和 ERKS信号转导通路活化 | 第68-69页 |
| 2.2 Q3ME可以抑制AP-1 的荧光素酶活性 | 第69-70页 |
| 讨论 | 第70-72页 |
| 小结 | 第72-73页 |
| 第三部分 Q3ME对大鼠食管癌变的抑制作用及其机制研究 | 第73-94页 |
| 前言 | 第73-74页 |
| 第一章 构建甲基苄基亚硝胺诱导大鼠食管癌前病变模型并确定Q3ME效果 | 第74-82页 |
| 引言 | 第74页 |
| 1 材料与方法 | 第74-78页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第74页 |
| 1.2 主要材料和试剂 | 第74-75页 |
| 1.3 常用试剂配制 | 第75页 |
| 1.4 实验方法 | 第75-78页 |
| 1.4.1 动物饲养 | 第75-76页 |
| 1.4.2 实验分组 | 第76-77页 |
| 1.4.3 动物取材 | 第77页 |
| 1.4.4 H&E染色 | 第77-78页 |
| 1.4.5 观察大鼠食管上皮病理组织学变化 | 第78页 |
| 1.4.6 统计学分析 | 第78页 |
| 2 结果 | 第78-82页 |
| 2.1 大鼠的一般情况 | 第78-79页 |
| 2.2 光学显微镜观察各组大鼠食管上皮病变 | 第79-80页 |
| 2.3 Q3ME对 NMBA诱导的大鼠食管上皮癌变的干预情况 | 第80-82页 |
| 第二章 Q3ME抑制大鼠食管癌变的机制研究 | 第82-92页 |
| 引言 | 第82页 |
| 1 材料与方法 | 第82-87页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第82页 |
| 1.2 主要材料和试剂 | 第82-83页 |
| 1.3 常用试剂配制 | 第83页 |
| 1.4 实验方法 | 第83-87页 |
| 1.4.1 免疫组化染色 | 第83-87页 |
| 1.4.3 统计学分析 | 第87页 |
| 2 结果 | 第87-92页 |
| 2.1 Q3ME抑制KI-67,C-JUN,和 P-P70S6K蛋白并抑制炎症相关指标NF-ΚB,COX-2和CD11B在 NMBA诱导的大鼠食管上皮的表达 | 第87-91页 |
| 2.2 Q3ME抑制大鼠血清中炎症相关蛋白的表达 | 第91-92页 |
| 讨论 | 第92-93页 |
| 小结 | 第93-94页 |
| 全文结论 | 第94-95页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第95-101页 |
| 综述 | 第101-113页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第108-113页 |
| 个人简历 | 第113-114页 |
| 在学校期间发表的论文、研究成果 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
