致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-19页 |
1.1 植物细胞中的钙及钙信号 | 第8页 |
1.2 植物中的钙离子结合蛋白 | 第8-12页 |
1.2.1 钙依赖蛋白激酶(CDPK)家族 | 第8-9页 |
1.2.2 钙调蛋白(CaM)及类钙调素蛋白(Calmodulin-like protein,CML) | 第9-10页 |
1.2.3 CBL家族及其结构特征 | 第10页 |
1.2.4 CIPK蛋白激酶家族及其结构特征 | 第10-12页 |
1.3 CBL-CIPK信号转导途径的简介 | 第12-13页 |
1.3.1 CBL-CIPK信号通路的激活 | 第12页 |
1.3.2 CBLs和CIPKs的表达特点和亚细胞定位 | 第12页 |
1.3.3 CBL-CIPK信号通路在植物应答逆境胁迫中的功能 | 第12-13页 |
1.3.3.1 SOS信号途径 | 第12-13页 |
1.3.3.2 响应低钾胁迫的信号通路 | 第13页 |
1.3.3.3 CBL-CIPK和ABA的交叉信号途径 | 第13页 |
1.4 植物吸收钾离子的分子机制及响应低钾胁迫的信号级联调节 | 第13-15页 |
1.5 脱落酸的简介及在植物逆境胁迫中的抗性作用 | 第15-16页 |
1.6 茉莉酸类化合物的简介及在植物逆境胁迫中的抗性作用 | 第16-17页 |
1.7 ABA、JA及钾营养之间的关系 | 第17页 |
1.8 研究目的及意义 | 第17-19页 |
第二章 玉米ZmCIPK23基因在低钾胁迫、ABA及JA处理下的表达分析 | 第19-33页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 材料 | 第19-21页 |
2.2.1 玉米材料 | 第19页 |
2.2.2 试剂与仪器 | 第19-20页 |
2.2.3 常用缓冲液及试剂的配置 | 第20页 |
2.2.4 实验中所用的引物 | 第20页 |
2.2.5 实验中所用的玉米全营养液 | 第20-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-23页 |
2.3.1 玉米总RNA的提取 | 第21-22页 |
2.3.2 玉米总RNA的纯化 | 第22页 |
2.3.3 反转录合成c DNA的第一条链 | 第22页 |
2.3.4 RT-PCR | 第22-23页 |
2.4 实验结果 | 第23-32页 |
2.4.1 ZmCIPK23的序列及结构分析 | 第23-24页 |
2.4.2 ZmCIPK23与拟南芥和水稻中的CIPKs序列比对结果 | 第24-26页 |
2.4.3 ZmCIPK23和拟南芥及水稻中的CIPKs之间的系统进化分析 | 第26-28页 |
2.4.4 4 个ZmCBLs的序列及结构分析 | 第28-29页 |
2.4.5 ZmCIPK23及4个ZmCBLs在低钾胁迫下的表达特性分析 | 第29-30页 |
2.4.6 ZmCIPK23及4个ZmCBLs在ABA处理下的表达特性分析 | 第30-31页 |
2.4.7 ZmCIPK23及4个ZmCBLs在JA处理下的表达特性分析 | 第31-32页 |
2.5 结论 | 第32-33页 |
第三章 玉米ZmCIPK23基因的启动子及过表达载体的构建 | 第33-46页 |
3.1 引言 | 第33页 |
3.2 材料 | 第33-34页 |
3.2.1 载体 | 第33页 |
3.2.2 试剂与仪器 | 第33页 |
3.2.3 常用培养基 | 第33页 |
3.2.4 常用缓冲液及试剂的配置 | 第33-34页 |
3.2.5 实验中所用的引物 | 第34页 |
3.3 实验方法 | 第34-38页 |
3.3.1 PCAMBIA1391-Pro-ZmCIPK23载体的构建 | 第34-37页 |
3.3.1.1 PCR扩增Pro-ZmCIPK23 | 第34页 |
3.3.1.2 PCR产物的回收 | 第34-35页 |
3.3.1.3 回收DNA片段与PMD-19T载体连接 | 第35页 |
3.3.1.4 连接产物转化感受态细胞-大肠杆菌DH5a | 第35-36页 |
3.3.1.5 阳性克隆的鉴定 | 第36页 |
3.3.1.6 PMD-19T-Pro-ZmCIPK23质粒的提取 | 第36页 |
3.3.1.7 构建重组载体PCAMBIA1391-Pro-ZmCIPK23 | 第36-37页 |
3.3.2 pRI101ZmCIPK23过表达载体的构建 | 第37-38页 |
3.4 实验结果 | 第38-45页 |
3.4.1 PCAMBIA1391-Pro-ZmCIPK23载体的构建结果 | 第38-42页 |
3.4.1.1 Pro-ZmCIPK23的克隆及鉴定 | 第38-39页 |
3.4.1.2 重组质粒PCAMBIA1391-Pro-ZmCIPK23的菌液PCR鉴定 | 第39-40页 |
3.4.1.3 重组质粒PCAMBIA1391-Pro-ZmCIPK23的双酶切鉴定 | 第40页 |
3.4.1.4 ZmCIPK23的启动子序列分析 | 第40-42页 |
3.4.2 pRI101ZmCIPK23过表达载体的构建结果 | 第42-45页 |
3.4.2.1 ZmCIPK23的克隆及鉴定 | 第42-43页 |
3.4.2.2 重组质粒PMD-19T-ZmCIPK23的提取 | 第43-44页 |
3.4.2.3 重组质粒pRI101ZmCIPK23菌液PCR鉴定 | 第44-45页 |
3.4.2.4 重组质粒pRI101ZmCIPK23的双酶切鉴定 | 第45页 |
3.5 结论 | 第45-46页 |
第四章 结论与讨论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
英文摘要 | 第51-52页 |