摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
引言 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-23页 |
1.1 PGC-1α 的研究现状 | 第14-19页 |
1.1.2 PGC-1α 的结构 | 第14-16页 |
1.1.3 PGC-1α 的功能 | 第16-19页 |
1.2 细胞凋亡 | 第19-20页 |
1.2.1 线粒体与细胞凋亡 | 第19-20页 |
1.3 Bcl-2 研究现状 | 第20-23页 |
1.3.1 Bcl-2 家族与细胞凋亡 | 第21-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-37页 |
2.1 实验所用细胞系和质粒 | 第23页 |
2.2 实验主要仪器 | 第23-24页 |
2.3 药物与抗体 | 第24页 |
2.4 实验方法与步骤 | 第24-37页 |
2.4.1 细胞培养与转染 | 第24-25页 |
2.4.2 ZF4-PGC-1α shRNA质粒的构建 | 第25-30页 |
2.4.3 慢病毒质粒转染HEK293T细胞 | 第30页 |
2.4.4 PGC-1α shRNA稳转ZF4细胞系的筛选 | 第30-31页 |
2.4.5 Real time PCR检测PGC-1α 敲降效率 | 第31-32页 |
2.4.6 Western blot检测PGC-1α 蛋白水平 | 第32-34页 |
2.4.7 ROS、细胞凋亡和线粒体膜电位的检测 | 第34页 |
2.4.8 线粒体膜电位检测 | 第34-35页 |
2.4.9 细胞凋亡的检测 | 第35-37页 |
第三章 结果 | 第37-49页 |
3.1 低温诱导ZF4细胞内PGC-1α 的表达量上升 | 第37-38页 |
3.2 PGC-1α shRNA质粒测序验证 | 第38页 |
3.3 嘌呤霉素筛选得到PGC-1α 敲降的细胞系 | 第38-40页 |
3.4 ZF4细胞PGC-1α 敲降效率的检测 | 第40-41页 |
3.5 PGC-1α 敲降的ZF4细胞冷处理后ROS含量升高 | 第41-42页 |
3.6 PGC-1α 敲降的ZF4细胞冷处理后MMP下降 | 第42-44页 |
3.7 PGC-1α 敲降的ZF4细胞冷应激后诱导细胞发生凋亡 | 第44-47页 |
3.8 PGC-1α 敲降后冷处理影响ZF4细胞中Bax和Bcl-2 的表达 | 第47-49页 |
第四章 讨论 | 第49-51页 |
第五章 结论及展望 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |