摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
1.1 稻曲病的研究现状 | 第9-13页 |
1.1.1 稻曲病的病原菌 | 第9-10页 |
1.1.2 稻曲病的病害循环 | 第10-11页 |
1.1.3 稻曲病菌的侵染机制 | 第11-12页 |
1.1.4 稻曲病抗病遗传机制 | 第12页 |
1.1.5 稻曲病的发病条件和防治措施 | 第12-13页 |
1.2 植物与病原菌的互作机制研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 植物免疫反应的分子机制 | 第13-16页 |
1.2.2 病原菌效应蛋白的作用机制 | 第16-17页 |
1.3 论文选题依据及研究意义 | 第17-19页 |
第二章 材料和方法 | 第19-32页 |
2.1 实验材料 | 第19-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 主要菌株和质粒 | 第19-20页 |
2.1.3 主要试剂和试剂盒 | 第20页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.1.5 培养基的配制 | 第21页 |
2.1.6 试剂配制 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-32页 |
2.2.1 PCR扩增及载体构建 | 第22-23页 |
2.2.2 大肠杆菌和农杆菌感受态的制备 | 第23-24页 |
2.2.3 大肠杆菌和农杆菌的电击转化 | 第24页 |
2.2.4 本生烟瞬时表达 | 第24-25页 |
2.2.5 Uv2169信号肽验证 | 第25页 |
2.2.6 Uv2169蛋白的原核表达 | 第25页 |
2.2.7 水稻原生质体的制备及转化 | 第25-26页 |
2.2.8 总RNA的提取及cDNA的制备 | 第26-27页 |
2.2.9 Real-timePCR 分析 | 第27页 |
2.2.10 拟南芥的培养与遗传转化 | 第27-28页 |
2.2.11 活性氧爆发测定 | 第28-29页 |
2.2.12 拟南芥叶片的胼胝质染色 | 第29页 |
2.2.13 稻曲病菌原生质体的制备和PEG-CaC12介导的转化 | 第29-30页 |
2.2.14 稻曲病菌孢子电击转化 | 第30页 |
2.2.15 农杆菌介导的稻曲病菌转化 | 第30-31页 |
2.2.16 设计合成以稻曲病菌Uv2169为靶标基因的小干涉RNA | 第31-32页 |
第三章 结果和分析 | 第32-57页 |
3.1 筛选鉴定稻曲病菌候选效应蛋白 | 第32-38页 |
3.2 候选效应蛋白Uv2169能够诱导本生烟细胞死亡 | 第38-40页 |
3.3 Uv2169能够诱导水稻原生质体死亡 | 第40-41页 |
3.4 Uv2169能够抑制本生烟防御相关反应 | 第41-44页 |
3.5 Uv2169使本生烟更感马铃薯疫霉 | 第44页 |
3.6 UV2169能够抑制拟南芥防御相关反应 | 第44-46页 |
3.7 Uv2169增加拟南芥对白粉菌和寄生疫霉菌的感病性 | 第46-49页 |
3.8 UV2169的信号肽功能验证 | 第49-50页 |
3.9 UV2169在植物细胞中的定位 | 第50-52页 |
3.10 Uv2169小干涉RNA处理影响稻曲病菌的生长发育 | 第52-55页 |
3.11 Uv2169基因敲除和超表达载体的构建 | 第55-57页 |
第四章 讨论与结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
附录 | 第68-71页 |
附表1 引物 | 第68-71页 |
攻读学位期间参与发表的论文目录 | 第71页 |