| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 α-连环蛋白概述 | 第9-12页 |
| 1.1.1 α-连环蛋白的基本结构 | 第9-10页 |
| 1.1.2 α-连环蛋白与肿瘤 | 第10-12页 |
| 1.2 SUMO修饰 | 第12-15页 |
| 1.2.1 SUMO修饰的功能 | 第12-13页 |
| 1.2.2 SUMO修饰过程 | 第13页 |
| 1.2.3 SUMO修饰与肿瘤 | 第13-15页 |
| 1.3 选题依据和研究内容 | 第15-17页 |
| 1.3.1 选题依据 | 第15页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第15-17页 |
| 2 α-连环蛋白的SUMO蛋白修饰研究 | 第17-30页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第17-20页 |
| 2.2.1 仪器与耗材 | 第17-18页 |
| 2.2.2 材料与试剂 | 第18页 |
| 2.2.3 试剂配制 | 第18-20页 |
| 2.3 试验方法 | 第20-24页 |
| 2.3.1 质粒提取 | 第20-21页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第21页 |
| 2.3.3 质粒转染 | 第21-22页 |
| 2.3.4 免疫共沉淀实验 | 第22页 |
| 2.3.5 免疫印迹实验 | 第22-23页 |
| 2.3.6 α-连环蛋白点突变质粒构建 | 第23-24页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第24-29页 |
| 2.4.1 α-连环蛋白的SUMO修饰及确定 | 第24-25页 |
| 2.4.2 Ubc9对α-连环蛋白SUMO修饰的调控作用 | 第25页 |
| 2.4.3 SENP1对α-连环蛋白SUMO修饰的调控作用 | 第25-26页 |
| 2.4.4 内源α-连环蛋白的SUMO修饰作用 | 第26页 |
| 2.4.5 α-连环蛋白的SUMO修饰位点预测 | 第26-27页 |
| 2.4.6 α-连环蛋白的SUMO修饰位点确定 | 第27-28页 |
| 2.4.7 三种亚型的α-连环蛋白的SUMO修饰预测 | 第28-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 3 SUMO修饰对α-连环蛋白的亚细胞定位和蛋白稳定性的影响 | 第30-38页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第30-31页 |
| 3.2.1 仪器与耗材 | 第30页 |
| 3.2.2 材料与试剂 | 第30页 |
| 3.2.3 试剂配制 | 第30-31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-34页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第31页 |
| 3.3.2 MDA-MB-231质粒转染 | 第31-32页 |
| 3.3.3 免疫荧光实验 | 第32页 |
| 3.3.4 细胞核细胞质提取物分离实验 | 第32-33页 |
| 3.3.5 病毒包装 | 第33页 |
| 3.3.6 病毒侵染 | 第33-34页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第34-37页 |
| 3.4.1 SUMO修饰对α-连环蛋白的亚细胞定位的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.2 SUMO修饰对α-连环蛋白核质分布丰度的影响 | 第35页 |
| 3.4.3 SUMO修饰的α-连环蛋白的亚细胞定位检测 | 第35-36页 |
| 3.4.4 SUMO修饰对α-连环蛋白的蛋白稳定性的影响 | 第36-37页 |
| 3.5 小结 | 第37-38页 |
| 4 SUMO修饰对α-连环蛋白肿瘤抑制活性的调控 | 第38-57页 |
| 4.1 引言 | 第38页 |
| 4.2 仪器与试剂 | 第38-39页 |
| 4.2.1 仪器与耗材 | 第38页 |
| 4.2.2 材料与试剂 | 第38-39页 |
| 4.2.3 试剂配制 | 第39页 |
| 4.3 实验方法 | 第39-45页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第39-40页 |
| 4.3.2 细胞转染 | 第40页 |
| 4.3.3 报告基因实验 | 第40页 |
| 4.3.4 RNA提取 | 第40-41页 |
| 4.3.5 cDNA合成 | 第41页 |
| 4.3.6 实时定量PCR | 第41-42页 |
| 4.3.7 免疫印迹实验 | 第42-43页 |
| 4.3.8 干涉实验 | 第43页 |
| 4.3.9 病毒侵染 | 第43页 |
| 4.3.10 MTT实验 | 第43页 |
| 4.3.11 Transwell实验 | 第43-44页 |
| 4.3.12 克隆形成实验 | 第44页 |
| 4.3.13 小鼠成瘤实验 | 第44-45页 |
| 4.3.14 免疫组化实验 | 第45页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第45-56页 |
| 4.4.1 α-连环蛋白的SUMO修饰对Hippo和Wnt通路的影响 | 第45-46页 |
| 4.4.2 α-连环蛋白的SUMO修饰对Hippo和Wnt通路靶基因的调控 | 第46-47页 |
| 4.4.3 α-连环蛋白的SUMO修饰对NF-κB通路的影响 | 第47页 |
| 4.4.4 α-连环蛋白的SUMO修饰对IκBα蛋白水平的调控 | 第47-48页 |
| 4.4.5 α-连环蛋白的SUMO修饰对NF-κB靶基因的调控 | 第48-49页 |
| 4.4.6 乳腺癌细胞中α-连环蛋白的SUMO修饰情况研究 | 第49-50页 |
| 4.4.7 乳腺癌细胞中敲除α-连环蛋白对IκBα的影响 | 第50页 |
| 4.4.8 TNF-α对α-连环蛋白SUMO修饰的作用 | 第50-51页 |
| 4.4.9 SUMO修饰对α-连环蛋白与IκBα相互作用的影响 | 第51-52页 |
| 4.4.10 α-连环蛋白的SUMO修饰对IκBα泛素化的影响 | 第52页 |
| 4.4.11 SUMO修饰α-连环蛋白对肿瘤细胞增殖的影响 | 第52-54页 |
| 4.4.12 α-连环蛋白的SUMO修饰对小鼠体内4T1细胞成瘤能力的影响 | 第54-55页 |
| 4.4.13 SUMO修饰α-连环蛋白对肿瘤细胞运动能力的影响 | 第55-56页 |
| 4.5 小结 | 第56-57页 |
| 结论与创新点摘要 | 第57-59页 |
| 结论 | 第57页 |
| 创新点 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
