摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
第1章 引言 | 第7-17页 |
1.1 念珠菌的分类 | 第7-9页 |
1.2 白色念珠菌的菌丝形态转换和特性 | 第9-11页 |
1.3 白色念珠菌氨基酸的吸收利用 | 第11页 |
1.4 白色念珠菌碱化外界环境pH的研究 | 第11-14页 |
1.5 UGA35在酿酒酵母中的功能 | 第14页 |
1.6 白色念珠菌的致病与流行病学概况 | 第14-15页 |
1.7 抗白色念珠菌感染的药物研究 | 第15-17页 |
第2章 UGA35缺失导致白念珠菌碱化外界环境pH的缺陷 | 第17-29页 |
2.1 材料 | 第17-20页 |
2.1.1 菌株 | 第17-18页 |
2.1.2 培养基 | 第18页 |
2.1.3 主要试剂 | 第18页 |
2.1.4 常用缓冲液及其他溶剂 | 第18-19页 |
2.1.5 主要实验设备 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-23页 |
2.2.1 质粒DNA抽提(生工质粒小提kit) | 第20-21页 |
2.2.2 质粒DNA的酶切和电泳 | 第21页 |
2.2.3 酶切片段回收 | 第21页 |
2.2.4 PCR产物的回收 | 第21-22页 |
2.2.5 UGA35回补菌株的构建 | 第22页 |
2.2.6 白色念珠菌碱化环境的筛选 | 第22页 |
2.2.7 白色念珠菌形态变化培养 | 第22页 |
2.2.8 白色念珠菌生长动力学和pH变化曲线 | 第22-23页 |
2.3 结果 | 第23-27页 |
2.3.1 UGA35缺失导致白念珠菌碱化外界环境pH能力下降 | 第23-24页 |
2.3.2 UGA35通过影响白念珠菌碱化外界环境pH影响菌丝的发育 | 第24-26页 |
2.3.3 UGA35缺失影响白念珠菌吸收外界环境氨基酸 | 第26-27页 |
2.4 讨论 | 第27-29页 |
第3章 UGA35影响白念珠菌碱化外界环境pH的机制研究 | 第29-40页 |
3.1 材料 | 第29-31页 |
3.1.1 培养基 | 第29-30页 |
3.1.2 主要试剂 | 第30页 |
3.1.3 常用缓冲液及其他溶剂 | 第30-31页 |
3.1.4 主要实验设备 | 第31页 |
3.2 实验方法 | 第31-38页 |
3.2.1 大肠杆菌DH5 α的转化 | 第31-32页 |
3.2.2 白色念珠菌的转化 | 第32页 |
3.2.3 白色念珠菌基因组RNA的抽提 | 第32页 |
3.2.4 RT-qPCR | 第32-34页 |
3.2.5 白色念珠菌蛋白质提取 | 第34页 |
3.2.6 蛋白胶的配置与跑蛋白胶 | 第34-35页 |
3.2.7 Western Blot | 第35-36页 |
3.2.8 Stp2-3×HA质粒的构建 | 第36页 |
3.2.9 Uga35-13×MYC质粒的构建 | 第36-37页 |
3.2.10 转录因子UGA35与STP2在转录水平的关系 | 第37-38页 |
3.2.11 蛋白水平Uga35与Stp2的调控关系 | 第38页 |
3.3 讨论 | 第38-40页 |
第4章 UGA35影响白色念珠菌的毒力 | 第40-45页 |
4.1 材料 | 第40页 |
4.1.1 培养基 | 第40页 |
4.1.2 主要试剂 | 第40页 |
4.1.3 主要实验设备 | 第40页 |
4.2 主要实验方法 | 第40-41页 |
4.2.1 小鼠系统感染法 | 第40-41页 |
4.2.2 肠道共生感染法 | 第41页 |
4.3 结果 | 第41-43页 |
4.3.1 UGA35缺失影响白念珠菌毒力 | 第41-43页 |
4.3.2 UGA35缺失显著降低白念珠菌在小鼠肠道的定植 | 第43页 |
4.4 讨论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第50-53页 |
致谢 | 第53页 |