摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-30页 |
1.1 细胞自噬 | 第12-14页 |
1.1.1 细胞自噬的概论 | 第12-13页 |
1.1.2 细胞自噬的分类 | 第13-14页 |
1.2 细胞自噬的形成及分子机制分子机制 | 第14-18页 |
1.2.1 细胞自噬的形成 | 第14-15页 |
1.2.2 细胞自噬的分子机制 | 第15-18页 |
1.3 细胞自噬的检测 | 第18-20页 |
1.3.1 细胞自噬的形态学观察 | 第18页 |
1.3.2 荧光显微镜观察 | 第18-19页 |
1.3.3 自噬流的检测 | 第19页 |
1.3.4 电泳法 | 第19页 |
1.3.5 长周期蛋白的降解 | 第19-20页 |
1.4 细胞自噬的生理功能 | 第20页 |
1.4.1 细胞自噬作为细胞内能量的来源 | 第20页 |
1.4.2 细胞自噬在维持细胞稳态中也发挥了关键作用 | 第20页 |
1.4.3 细胞自噬可以引起细胞的程序性死亡 | 第20页 |
1.5 自噬的抑制和促进 | 第20-22页 |
1.5.1 诱导自噬的发生 | 第20-21页 |
1.5.2 自噬的抑制 | 第21页 |
1.5.3 细胞自噬相关蛋白定位 | 第21-22页 |
1.6 纳米材料 | 第22-24页 |
1.6.1 纳米材料的定义 | 第22页 |
1.6.2 纳米材料的特性 | 第22-23页 |
1.6.3 纳米材料的作用 | 第23-24页 |
1.7 细胞功能调控的重要转录因子TFEB | 第24-30页 |
1.7.1 TFEB印的特点 | 第25页 |
1.7.2 TFEB的生物学功能 | 第25-27页 |
1.7.3 TFEB的入核机制 | 第27-30页 |
第二章 实验材料和实验方法 | 第30-42页 |
2.1 实验材料 | 第30-31页 |
2.1.1 实验试剂 | 第30页 |
2.1.2 实验材料及仪器 | 第30页 |
2.1.3 实验主要试剂配方 | 第30-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-42页 |
2.2.1 细胞复苏和细胞冻存 | 第31-32页 |
2.2.2 细胞传代 | 第32页 |
2.2.3 质粒抽提 | 第32-33页 |
2.2.4 Western blot蛋白印迹实验 | 第33-34页 |
2.2.5 氧化钇纳米颗粒的表征 | 第34-36页 |
2.2.6 MTT细胞活力分析 | 第36-37页 |
2.2.7 细胞转染 | 第37-38页 |
2.2.8 自噬标志性染料染色分析 | 第38-39页 |
2.2.9 EGFP-LC3点聚集形成分析 | 第39页 |
2.2.10 溶酶体酸性分析 | 第39页 |
2.2.11 中性红染色 | 第39-40页 |
2.2.12 核质分离 | 第40-41页 |
2.2.13 TFEB进核阳性细胞统计 | 第41-42页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第42-56页 |
3.1 简介 | 第42页 |
3.2 纳米氧化钇表征 | 第42-43页 |
3.3 纳米氧化钇引起细胞发生完整自噬 | 第43-46页 |
3.3.1 细胞活力检测 | 第43-44页 |
3.3.2 细胞自噬引起的荧光点聚集 | 第44页 |
3.3.3 氧化钇纳米颗粒引起完整地细胞自噬 | 第44-46页 |
3.4 纳米氧化钇引起细胞空泡化并引起TFEB的入核 | 第46-55页 |
3.4.1 纳米氧化钇引起细胞的空泡化 | 第46页 |
3.4.2 氧化钇所引起的空泡化细胞为变性的溶酶体 | 第46-48页 |
3.4.3 氧化钇导致溶酶体碱化 | 第48-49页 |
3.4.4 Y203导致细胞空泡化进而促进TFEB进核 | 第49-51页 |
3.4.5 部分内吞抑制剂抑制Y203所导致的空泡化 | 第51-53页 |
3.4.6 Y203导致的TFEB进核的机制探究 | 第53-55页 |
3.5 讨论与展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-58页 |
致谢 | 第58页 |