中华卵索线虫cDNA文库构建及Sox-3基因部分片段的克隆
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| ·cDNA文库构建方法及应用 | 第11-15页 |
| ·标准化cDNA | 第11-12页 |
| ·固相cDNA文库构建 | 第12页 |
| ·染色体区域特异性cDNA文库 | 第12页 |
| ·Oligo—capping方法构建cDNA文库 | 第12页 |
| ·抑制消减cDNA文库 | 第12-13页 |
| ·逆转录病毒cDNA表达系统构建 | 第13-14页 |
| ·酵母双杂交文库 | 第14页 |
| ·SMART cDNA文库 | 第14-15页 |
| ·中华卵索线虫相关研究进展 | 第15-18页 |
| ·中华卵索线虫的生物学研究 | 第15-16页 |
| ·中华卵索线虫生理生化研究 | 第16-17页 |
| ·中华卵索线虫分子生物学方面研究 | 第17-18页 |
| ·Sox基因相关研究 | 第18-19页 |
| ·Sox基因特点 | 第18页 |
| ·Sox基因的功能 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-34页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·实验动物来源 | 第21页 |
| ·棉铃虫饲料的配制方法 | 第21页 |
| ·实验材料的收集 | 第21页 |
| ·主要化学试剂 | 第21-22页 |
| ·实验中溶液的配制 | 第22-23页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-34页 |
| ·中华卵索线虫RNA的提取及其检测 | 第23-24页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第24-25页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第25页 |
| ·蛋白酶K消化 | 第25-26页 |
| ·cDNA片段的分级分离 | 第26-27页 |
| ·双链cDNA与载体pTA2连接 | 第27-28页 |
| ·原始文库的构建 | 第28-29页 |
| ·文库质量检测 | 第29-30页 |
| ·文库的扩增 | 第30-31页 |
| ·Sox-3基因部分片段的获得 | 第31-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-41页 |
| ·RNA的提取 | 第34页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第34-35页 |
| ·双链cDNA的分级分离 | 第35-36页 |
| ·文库滴度的测定 | 第36页 |
| ·cDNA文库重组率检测 | 第36-37页 |
| ·β-actin检测 | 第37-38页 |
| ·Sox-3保守片段检测 | 第38-39页 |
| ·菌液PCR检测 | 第39页 |
| ·测序结果 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| ·RNA的提取及双链cDNA的合成 | 第41页 |
| ·转化效率评估 | 第41页 |
| ·文库质量的评估 | 第41-42页 |
| ·Sox-3基因的相关分析 | 第42-43页 |
| 5 小结与展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 攻读硕士期间论文发表情况 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
