蛋白G的IgG Fc段结合域克隆、表达及功能研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-15页 |
| ·SPG 的分子结构及结合特性 | 第10-13页 |
| ·分子量 | 第10页 |
| ·分子结构 | 第10页 |
| ·SPG 中Fc 段结合区的结构分析 | 第10-11页 |
| ·SPG 的结合特性 | 第11-13页 |
| ·SPG 的提取方法 | 第13页 |
| ·基因工程方法获得特异性SPG | 第13-14页 |
| ·SPG 的应用 | 第14-15页 |
| 第2章 PGFB 的克隆 | 第15-29页 |
| ·材料 | 第15-17页 |
| ·菌株和质粒 | 第15-16页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第16页 |
| ·相关试剂配制 | 第16页 |
| ·实验仪器及设备 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-24页 |
| ·引物的设计 | 第17-18页 |
| ·PGFB 的基因克隆 | 第18-20页 |
| ·重组质粒的制备 | 第20-23页 |
| ·转化 | 第23-24页 |
| ·重组质粒鉴定及序列分析 | 第24页 |
| ·结果 | 第24-27页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的构建及鉴定 | 第25-26页 |
| ·扩增产物的序列分析 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第3章 目的基因的诱导表达及蛋白的分离纯化 | 第29-40页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·菌株和质粒 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·相关试剂配制 | 第29-30页 |
| ·实验仪器及设备 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-33页 |
| ·目的基因的表达 | 第30-31页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第31-32页 |
| ·表达条件优化 | 第32页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| ·纯化后蛋白的定量（Bradford 法） | 第33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第33-34页 |
| ·表达条件优化 | 第34-36页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第36-38页 |
| ·纯化后蛋白的定量（Bradford 法） | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第4章 重组蛋白的功能研究 | 第40-49页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·实验用蛋白 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·相关试剂配制 | 第40-41页 |
| ·主要实验仪器 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·兔多克隆抗体的粗纯化 | 第41页 |
| ·Western Blot 鉴定重组蛋白的功能 | 第41-43页 |
| ·重组蛋白与多克隆抗体结合力的分析 | 第43页 |
| ·环氧氯丙烷活化琼脂糖凝胶条件的优化 | 第43页 |
| ·重组蛋白与琼脂糖凝胶的偶联及功能鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白琼脂糖凝胶的功能鉴定 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-48页 |
| ·Western Blot 鉴定重组蛋白的功能 | 第44页 |
| ·重组蛋白与多克隆抗体结合能力的分析 | 第44-46页 |
| ·环氧氯丙烷活化琼脂糖凝胶条件的优化 | 第46-48页 |
| ·重组蛋白与琼脂糖偶联后功能的鉴定 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第5章 结论和建议 | 第49-50页 |
| ·主要结论 | 第49页 |
| ·建议 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第58页 |
