中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-9页 |
引言 | 第12-16页 |
材料 | 第16-20页 |
1、实验材料 | 第16-18页 |
2、仪器设备 | 第18-20页 |
方法 | 第20-37页 |
1.细胞复苏、传代培养 | 第20页 |
2.Western blot检测CRC细胞中ING4的表达 | 第20-22页 |
3.ING4重组慢病毒及其对照空病毒的制备 | 第22-24页 |
4.慢病毒介导的ING4稳定过表达SW620 CRC细胞株的构建 | 第24-26页 |
5.慢病毒介导的ING4稳定沉默SW480 CRC细胞株的构建 | 第26页 |
6.Transwell迁移实验检测ING4对CRC细胞迁移能力的影响 | 第26-27页 |
7.Transwell侵袭实验检测ING4对CRC细胞侵袭能力的影响 | 第27页 |
8.裸鼠尾静脉注射肺转移动物实验检测ING4对CRC细胞裸鼠体内肺转移能力的影响 | 第27-28页 |
9.基因、miRNA表达谱芯片筛选 | 第28页 |
10.qRT-PCR、Western blot检测ING4对CRC细胞Snail1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达的影响(验证基因表达谱芯片差异表达结果) | 第28-29页 |
11.qRT-PCR检测ING4对CRC细胞miR-940、miR-1228-3p、miR-1825表达的影 响(验证miRNA表达谱芯片差异表达结果) | 第29-31页 |
12.Snail1-3'UTR荧光素酶报告基因实验 | 第31-32页 |
13.Snail1敲减实验 | 第32-33页 |
14.CRC标本、临床病理资料收集 | 第33页 |
15.Western blot检测CRC癌组织中ING4的表达 | 第33页 |
16.免疫组化检测CRC癌组织中ING4、Snail1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达 | 第33-34页 |
17.免疫组化结果分析 | 第34-35页 |
18.统计学检验 | 第35-37页 |
结果 | 第37-51页 |
1.ING4在CRC癌组织、细胞中表达降低 | 第37-39页 |
2.ING4表达水平与CRC临床病理特征、恶性程度密切相关 | 第39-40页 |
3.建立了ING4稳定过表达、沉默的CRC细胞株 | 第40-42页 |
4.ING4抑制CRC细胞迁移、侵袭、转移 | 第42-43页 |
5.ING4下调CRC细胞Snail1表达、逆转CRC EMT表型 | 第43-44页 |
6.ING4抑制CRC细胞EMT、转移中的作用依赖于ING4介导的Snail1下调 | 第44-46页 |
7.ING4与Snail1等EMT标志物在CRC癌组织标本中的表达呈相关性 | 第46-48页 |
8.ING4可能通过上调miR-940、miR-1228-3p抑制CRC细胞Snail1的表达 | 第48-51页 |
讨论 | 第51-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
综述 | 第62-105页 |
参考文献 | 第81-105页 |
中英文对照缩略词表 | 第105-106页 |
攻读硕士期间发表的科研论文 | 第106-107页 |
致谢 | 第107-108页 |