| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 前言 | 第7-22页 |
| 1.1 自然界中的砷 | 第7-9页 |
| 1.1.1 砷的毒性 | 第7-8页 |
| 1.1.2 生物降解砷 | 第8-9页 |
| 1.2 原核生物的砷代谢 | 第9-11页 |
| 1.2.1 砷的摄取途径 | 第9页 |
| 1.2.2 基本的脱毒机理 | 第9-10页 |
| 1.2.3 亚砷酸盐的氧化或者还原 | 第10页 |
| 1.2.4 砷的甲基化及二甲基化 | 第10-11页 |
| 1.2.5 砷的泵出机制 | 第11页 |
| 1.3 真核生物的砷代谢 | 第11-14页 |
| 1.3.1 砷的摄取 | 第11-12页 |
| 1.3.2 砷代谢过程 | 第12页 |
| 1.3.3 砷在细胞内的隔离 | 第12页 |
| 1.3.4 砷的转运体 | 第12-13页 |
| 1.3.5 砷的甲基化 | 第13-14页 |
| 1.4 表达载体 | 第14-22页 |
| 1.4.1 表达要素 | 第15页 |
| 1.4.2 蛋白质标签 | 第15-16页 |
| 1.4.3 表达系统 | 第16页 |
| 1.4.4 细菌表达载体 | 第16-17页 |
| 1.4.5 酵母细胞表达载体 | 第17-18页 |
| 1.4.6 杆状病毒表达载体 | 第18页 |
| 1.4.7 植物表达载体 | 第18-19页 |
| 1.4.8 哺乳动物表达载体 | 第19-20页 |
| 1.4.9 无细胞系统 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-31页 |
| 2.1 实验器材 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 2.2.1 质粒构建 | 第22-23页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第23-24页 |
| 2.2.3 细胞传代 | 第24页 |
| 2.2.4 细胞冻存 | 第24页 |
| 2.2.5 细胞复苏 | 第24页 |
| 2.2.6 细胞转染 | 第24-26页 |
| 2.2.7 砷最低致死浓度及G418筛选实验 | 第26-27页 |
| 2.2.8 RNA的提取和Real-time PCR | 第27-28页 |
| 2.2.9 荧光显色和共聚焦显微镜 | 第28页 |
| 2.2.10 检测细胞活性-MTT实验 | 第28-30页 |
| 2.2.11 细胞砷还原能力测定 | 第30-31页 |
| 第三章 实验结果 | 第31-39页 |
| 3.1 pEGFP-N1-ArsC蛋白的表达和定位 | 第31-32页 |
| 3.2 As~(5+)和As~(3+)最小致死浓度 | 第32页 |
| 3.3 G418最佳浓度筛选 | 第32-33页 |
| 3.4 HepG_2-neo-ArsC和HepG_2-EGFP-ArsC稳转细胞的建立 | 第33-34页 |
| 3.5 在稳转细胞ArsC的诱导表达 | 第34-35页 |
| 3.6 HepG_2-ArsC细胞在As~(5+)和As~(3+)下的活力 | 第35-37页 |
| 3.7 HepG_2-ArsC细胞砷酸盐的还原能力检测 | 第37-39页 |
| 第四章 讨论 | 第39-43页 |
| 4.1 ArsC表达定位于真核细胞质 | 第39页 |
| 4.2 arsC诱导表达上调 | 第39-40页 |
| 4.3 ArsC的系统发育树 | 第40-41页 |
| 4.4 ArsC提高了细胞在五价砷下的活力 | 第41-42页 |
| 4.5 ArsC提升了细胞对五价砷的还原能力 | 第42页 |
| 4.6 未来展望 | 第42-43页 |
| 第五章 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
