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miR-28-3P对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
前言第13-18页
第一章 miR-28-3P对胃癌细胞生长速度、凋亡以及迁移侵袭的影响第18-68页
    材料和方法第18-48页
        1. 实验材料第18-20页
        2. 实验器材第20-21页
        3. 实验用细胞株及试剂配备第21-22页
        4. 实验方法第22-27页
        5. PCR实验步骤第27-29页
        6. Western blot实验检测相应蛋白的表达量变化第29-36页
        7. MiR-28-3P对胃癌细胞增殖的影响第36-37页
        8. miR-28-3P对胃癌细胞凋亡的影响第37-39页
        9. miR-28-3P基因影响胃癌细胞的迁移侵袭能力的影响第39-43页
        10. miR-28-3P对裸鼠肿瘤成瘤能力的影响第43页
        11. RT-PCR检测裸鼠皮下移植瘤中miR-28-3P的表达情况第43-44页
        12. HE染色检测抑制miR-28-3P低表达后肿瘤组织恶性程度的变化第44-45页
        13 免疫组化观察肿瘤组织中Ki67的表达情况第45-47页
        14 免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度第47-48页
    实验结果第48-65页
        1. miR-28-3P在胃癌组织中是明显高表达的第48-49页
        2. 选择细胞株并检验转染效率第49-52页
        3. miR-28 -3P对胃癌细胞株增殖能力的影响第52-54页
        4. 抑制miR-28-3P可以促进凋亡的发生第54-56页
        5. miR-28-3P对胃癌细胞的迁移侵袭能力的影响第56-60页
        6. miR-28-3P对裸鼠皮下成瘤能力的影响第60-65页
    讨论第65-68页
第二章 PTEN/AKT/P-AKT通路在miR-28-3P影响胃癌细胞生物学行为中的作用第68-90页
    实验材料第69-72页
        1. 实验材料第69-70页
        2. 实验器材第70-71页
        3. 实验用细胞株及试剂配备第71-72页
    实验方法第72-79页
        1. 运用生物信息学分析miR-28-3P的潜在生物靶标第72-73页
        2. 荧光素梅报告实验第73-74页
        3. PCR技术检测胃癌组织和癌旁组织中PTEN基因的表达情况第74-76页
        4. 胃癌细胞中PTEN蛋白的表达情况检测第76页
        5. 检测PTEN对胃癌细胞株的影响第76-78页
        6. 通过CCK8技术检测PTEN对三组细胞中的增殖能力的变化第78页
        7. 通过transwell技术检测PTEN基因对细胞迁移侵袭的影响第78-79页
        8. PTEN/PI3K/AKT通路与miR-28-3P表达的关系分析第79页
    实验结果第79-86页
        1. PTEN是miR-28-3P的靶基因第79-80页
        2. 胃癌组织中的PTEN是明显低表达的第80-82页
        3. 抑制PTEN可以逆转抑制miR-28-3P对胃癌细胞增殖和侵袭的功能影响第82-86页
    讨论第86-90页
全文小结第90-92页
展望第92-93页
综述第93-99页
参考文献第99-109页
英文缩写第109-110页
在读期间发表论文第110-111页
致谢第111-113页

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