摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
前言 | 第13-18页 |
第一章 miR-28-3P对胃癌细胞生长速度、凋亡以及迁移侵袭的影响 | 第18-68页 |
材料和方法 | 第18-48页 |
1. 实验材料 | 第18-20页 |
2. 实验器材 | 第20-21页 |
3. 实验用细胞株及试剂配备 | 第21-22页 |
4. 实验方法 | 第22-27页 |
5. PCR实验步骤 | 第27-29页 |
6. Western blot实验检测相应蛋白的表达量变化 | 第29-36页 |
7. MiR-28-3P对胃癌细胞增殖的影响 | 第36-37页 |
8. miR-28-3P对胃癌细胞凋亡的影响 | 第37-39页 |
9. miR-28-3P基因影响胃癌细胞的迁移侵袭能力的影响 | 第39-43页 |
10. miR-28-3P对裸鼠肿瘤成瘤能力的影响 | 第43页 |
11. RT-PCR检测裸鼠皮下移植瘤中miR-28-3P的表达情况 | 第43-44页 |
12. HE染色检测抑制miR-28-3P低表达后肿瘤组织恶性程度的变化 | 第44-45页 |
13 免疫组化观察肿瘤组织中Ki67的表达情况 | 第45-47页 |
14 免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度 | 第47-48页 |
实验结果 | 第48-65页 |
1. miR-28-3P在胃癌组织中是明显高表达的 | 第48-49页 |
2. 选择细胞株并检验转染效率 | 第49-52页 |
3. miR-28 -3P对胃癌细胞株增殖能力的影响 | 第52-54页 |
4. 抑制miR-28-3P可以促进凋亡的发生 | 第54-56页 |
5. miR-28-3P对胃癌细胞的迁移侵袭能力的影响 | 第56-60页 |
6. miR-28-3P对裸鼠皮下成瘤能力的影响 | 第60-65页 |
讨论 | 第65-68页 |
第二章 PTEN/AKT/P-AKT通路在miR-28-3P影响胃癌细胞生物学行为中的作用 | 第68-90页 |
实验材料 | 第69-72页 |
1. 实验材料 | 第69-70页 |
2. 实验器材 | 第70-71页 |
3. 实验用细胞株及试剂配备 | 第71-72页 |
实验方法 | 第72-79页 |
1. 运用生物信息学分析miR-28-3P的潜在生物靶标 | 第72-73页 |
2. 荧光素梅报告实验 | 第73-74页 |
3. PCR技术检测胃癌组织和癌旁组织中PTEN基因的表达情况 | 第74-76页 |
4. 胃癌细胞中PTEN蛋白的表达情况检测 | 第76页 |
5. 检测PTEN对胃癌细胞株的影响 | 第76-78页 |
6. 通过CCK8技术检测PTEN对三组细胞中的增殖能力的变化 | 第78页 |
7. 通过transwell技术检测PTEN基因对细胞迁移侵袭的影响 | 第78-79页 |
8. PTEN/PI3K/AKT通路与miR-28-3P表达的关系分析 | 第79页 |
实验结果 | 第79-86页 |
1. PTEN是miR-28-3P的靶基因 | 第79-80页 |
2. 胃癌组织中的PTEN是明显低表达的 | 第80-82页 |
3. 抑制PTEN可以逆转抑制miR-28-3P对胃癌细胞增殖和侵袭的功能影响 | 第82-86页 |
讨论 | 第86-90页 |
全文小结 | 第90-92页 |
展望 | 第92-93页 |
综述 | 第93-99页 |
参考文献 | 第99-109页 |
英文缩写 | 第109-110页 |
在读期间发表论文 | 第110-111页 |
致谢 | 第111-113页 |