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烟粉虱共生菌Hamiltonella的功能及垂直传播机制

致谢第7-9页
摘要第9-12页
Abstract第12-14页
1 文献综述及研究目的第20-39页
    1.1 烟粉虱概述第20-22页
        1.1.1 烟粉虱的生物学特性及其分类状况第20-21页
        1.1.2 烟粉虱的入侵及危害第21-22页
    1.2 昆虫共生菌第22-30页
        1.2.1 昆虫共生菌的概述第22页
        1.2.2 共生菌在昆虫体内的分布第22-24页
        1.2.3 昆虫共生菌的功能第24-30页
            1.2.3.1 共生菌与寄主的营养互作第24-25页
            1.2.3.2 共生菌调节寄主的适应性第25-26页
            1.2.3.3 共生菌提高寄主对温度的适应性第26-27页
            1.2.3.4 共生菌增强昆虫对天敌及病原物的防御第27-28页
            1.2.3.5 共生菌对昆虫生殖的调控第28-30页
    1.3 烟粉虱共生菌第30-32页
        1.3.1 烟粉虱共生菌的种类第30-31页
        1.3.2 烟粉虱共生菌的功能第31-32页
    1.4 共生菌的传播方式第32-35页
        1.4.1 共生菌的垂直传播第33-34页
        1.4.2 共生菌的水平传播第34-35页
    1.5 环境胁迫对昆虫共生菌的影响第35-36页
    1.6 本研究的目的与主要内容第36-37页
        1.6.1 本研究的目的第36-37页
        1.6.2 本研究的主要内容第37页
    1.7 技术路线图第37-39页
2 基本材料与方法第39-53页
    2.1 基本材料第39-44页
        2.1.1 供试昆虫第39页
        2.1.2 供试植物第39-40页
        2.1.3 生态学实验使用的主要仪器设备第40-43页
            2.1.3.1 人工气候室第40页
            2.1.3.2 温湿度记录仪第40页
            2.1.3.3 人工气候培养箱第40页
            2.1.3.4 养虫设备第40-41页
            2.1.3.5 玻璃指形管第41页
            2.1.3.6 人工吸虫器第41页
            2.1.3.7 圆柱玻璃双通管第41-43页
            2.1.3.8 体视显微镜第43页
            2.1.3.9 数码显微镜第43页
            2.1.3.10 数码摄像机第43页
        2.1.4 生化及分子生物学研究相关的主要试验仪器和化学试剂第43-44页
            2.1.4.1 主要试验仪器第43-44页
            2.1.4.2 主要化学试剂第44页
    2.2 基本试验方法第44-53页
        2.2.1 烟粉虱总DNA的提取第44-45页
        2.2.2 烟粉虱隐存种的鉴定第45-46页
            2.2.2.1 烟粉虱mtCOI基因的PCR扩增第45页
            2.2.2.2 TaqI酶切反应第45-46页
            2.2.2.3 电泳观察第46页
            2.2.2.4 线粒体COI基因测序第46页
        2.2.3 烟粉虱共生菌的鉴定第46-49页
            2.2.3.1 烟粉虱总DNA的提取第46页
            2.2.3.2 原生共生菌Portiera aleyrodidarum的PCR检测第46-47页
            2.2.3.3 烟粉虱次生共生菌的PCR检测第47-49页
        2.2.4 烟粉虱共生菌的含量的检测第49-51页
            2.2.4.1 烟粉虱总DNA的提取第49页
            2.2.4.2 定量PCR检测第49-51页
        2.2.5 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization)第51-52页
            2.2.5.1 虫体内共生菌的定位第51-52页
            2.2.5.2 烟粉虱组织器官内的共生菌定位第52页
        2.2.6 透射电子显微镜观察第52-53页
3 烟粉虱不同隐存种及种群中共生菌的多样性第53-65页
    3.1 材料与方法第53-56页
        3.1.1 烟粉虱种群的采集第53-55页
        3.1.2 烟粉虱总DNA的提取第55页
        3.1.3 烟粉虱隐存种的鉴定第55页
        3.1.4 烟粉虱共生菌的检测第55-56页
    3.2 结果与分析第56-57页
        3.2.1 烟粉虱MEAM1隐存种各种群中共生菌多样性第56页
        3.2.2 烟粉虱MED隐存种各种群中共生菌多样性第56页
        3.2.3 烟粉虱本地隐存种各种群中共生菌的多样性第56-57页
    3.3 讨论第57-65页
4 烟粉虱共生菌Hamiltonella对寄主性比的影响第65-92页
    4.1 材料与方法第66-70页
        4.1.1 供试昆虫和植物第66页
        4.1.2 烟粉虱隐存种鉴定与共生菌检测第66-67页
        4.1.3 高温处理对烟粉虱共生菌和寄主的影响第67-68页
        4.1.4 高温去除Hamitonella后对烟粉虱生殖的影响第68页
        4.1.5 抗生素去除Hamitonella的效果以及对烟粉虱生殖的影响第68-69页
        4.1.6 烟粉虱交配的观察第69页
        4.1.7 烟粉虱交配后受精囊内精子的检测第69-70页
        4.1.8 荧光原位杂交检测共生菌第70页
        4.1.9 透射电镜观察第70页
    4.2 数据分析第70页
    4.3 结果与分析第70-73页
        4.3.1 高温去除Hamitonella后对烟粉虱生殖的影响第70-71页
        4.3.2 抗生素去除Hamitonella后对烟粉虱生殖的影响第71-72页
        4.3.3 去除Hamiltonella后烟粉虱的交配及受精状况第72-73页
        4.3.4 共生菌在烟粉虱体内的分布第73页
    4.4 讨论第73-92页
        4.4.1 产雄孤雌生殖的单双倍体昆虫对性比的调控第73-74页
        4.4.2 共生菌对寄主生殖的调控第74-92页
5 含菌细胞介导烟粉虱共生菌的垂直传播第92-103页
    5.1 材料与方法第93-94页
        5.1.1 供试昆虫和植物第93页
        5.1.2 烟粉虱隐存种鉴定与共生菌检测第93页
        5.1.3 荧光原位杂交第93页
        5.1.4 含菌细胞及其行为观察第93-94页
        5.1.5 透射电镜观察第94页
    5.2 结果与分析第94-95页
        5.2.1 烟粉虱含菌细胞特性第94页
        5.2.2 共生菌垂直传播的过程第94-95页
    5.3 讨论第95-103页
6 高温对烟粉虱共生菌的影响第103-116页
    6.1 材料与方法第104-105页
        6.1.1 供试昆虫和植物第104页
        6.1.2 烟粉虱隐存种鉴定与共生菌检测第104页
        6.1.3 烟粉虱的高温处理第104页
        6.1.4 烟粉虱共生菌的检测第104-105页
        6.1.5 烟粉虱含菌细胞的检测第105页
        6.1.6 含菌细胞亚显微结构观察第105页
        6.1.7 高温处理后所产卵的含菌细胞及共生菌检测第105页
    6.2 数据分析第105-106页
    6.3 结果与分析第106-107页
        6.3.1 高温对不同分布类型共生菌的影响第106页
        6.3.2 高温对烟粉虱含菌细胞的影响第106-107页
        6.3.3 高温对含菌细胞和共生菌垂直传播的影响第107页
    6.4 讨论第107-116页
7 总讨论第116-120页
    7.1 全文小结第116-118页
    7.2 本研究的特色和创新之处第118页
    7.3 本研究的不足之处和值得继续研究的问题第118-120页
参考文献第120-145页
附录 利福平对烟粉虱共生菌的去除效果第145-154页
    1.1 材料与方法第146-147页
        1.1.1 供试昆虫和植物第146页
        1.1.2 烟粉虱隐存种鉴定与共生菌检测第146页
        1.1.3 烟粉虱的抗生素处理及共生菌检测第146-147页
    1.2 数据分析第147页
    1.3 结果与分析第147-148页
        1.3.1 不同浓度的利福平对MEAM1烟粉虱共生菌的去除效果第147页
        1.3.2 不同浓度的利福平对MED烟粉虱共生菌的去除效果第147-148页
    1.4 讨论第148-152页
    附录 参考文献第152-154页
作者简历第154-155页

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